Nghiên cứu quy trình nhân giống in vitro cây Kỷ tử (Lycium barbarum L.)

Cây Kỷ tử (Lycium barbarum L.) là một loài cây thực phẩm và cây dược liệu quý và quan trọng được dùng trong Đông y từ xa xưa. Hiện nay, nhu cầu về nguồn cây giống Kỷ tử sạch bệnh, số lượng lớn tại Việt Nam đang ngày càng gia tăng. Nghiên cứu này được thực hiện nhằm xây dựng quy trình nhân giống in vitro cây Kỷ tử từ hạt.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu quy trình nhân giống in vitro cây Kỷ tử (Lycium barbarum L.)Tập 18  Số 3-2024, Tạp chí Khoa học Tây Nguyên NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY KỶ TỬ (Lycium barbarum L.) Bùi Thị Thơ1 Ngày nhận bài: 25/05/2024; Ngày phản biện thông qua: 27/06/2024; Ngày duyệt đăng: 28/06/2024 TÓM TẮT Cây Kỷ tử (Lycium barbarum L.) là một loài cây thực phẩm và cây dược liệu quý và quan trọng đượcdùng trong Đông y từ xa xưa. Hiện nay, nhu cầu về nguồn cây giống Kỷ tử sạch bệnh, số lượng lớn tạiViệt Nam đang ngày càng gia tăng. Nghiên cứu này được thực hiện nhằm xây dựng quy trình nhân giốngin vitro cây Kỷ tử từ hạt. Kết quả cho thấy, mẫu hạt được khử trùng bằng cồn 700 trong thời gian 3 phút,cho tỷ lệ mẫu nảy mầm đạt 67,2%. Môi trường MS (Murashige and Skoog) bổ sung 0,5 mg/L BAP làphù hợp cho sự tái sinh chồi in vitro sau 3 tuần nuôi cấy, với hệ số nhân chồi đạt 7,35 chồi/mẫu; chiềucao cây 1,9 cm; số lá 5,3 lá/chồi. Môi trường ½ MS thích hợp cho giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh, tỷ lệ rarễ đạt 95,57%; số rễ/chồi 5,9 rễ; chiều dài rễ 3,03 cm sau 3 tuần nuôi cấy. Từ khóa: Lycium barbarum, Kỷ tử, in vitro, nuôi cấy mô.1. MỞ ĐẦU giống vô tính, cho phép nhân nhanh các giống cây Cây Kỷ tử (Lycium barbarum L.)hay còn gọi trồng trong điều kiện kiểm soát được các điều kiệnlà cây Câu khởi, Khởi tử, Địa cốt tử thuộc họ môi trường. Là phương pháp triển vọng để cungCà. Đây là cây thuốc rất phổ biến hơn 2500 năm cấp giống cây trồng chất lượng cao có khả năngtrước tại Trung Quốc, Nhật Bản, Việt Nam. Kỷ thương mại, nâng cao năng suất, giảm chi phítử được biết đến như một loại siêu trái cây, siêu trong trồng trọt.thực phẩm được sử dụng trong Đông y để chữa Ở nước ta hiện nay vẫn chưa có quy trìnhbệnh, đồng thời làm món ăn, thức uống hàng ngày sản xuất giống cây Kỷ tử in vitro được công bố.(Shahrajabian, 2018). Xuất phát từ những cơ sở trên, chúng tôi đã tiến Qua các kết quả nghiên cứu cho thấy trong quả hành “Nghiên cứu nhân giống in vitro cây Kỷ tửvà rễ Kỷ tử chứa các hợp chất giúp tăng cường sức (Lycium barbarum L.).khỏe, tăng tuổi thọ, tăng cường thị lực, chức năng 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNcủa gan, thận, ngăn ngừa các bệnh tiểu đường, tim CỨUmạch, ung thư, tăng khả năng miễn dịch, giảm 2.1. Vật liệu nghiên cứunồng độ cholesteron trong máu (Potterat, 2010) Hạt giống cây Kỷ tử được cung cấp bởi công ty(Yu, 2017). Nuts Talk, Trung Quốc. Trung Quốc vẫn là nhà cung cấp chính các sản 2.2. Phương pháp khử trùng mẫuphẩm Kỷ tử trên thế giới. Tuy nhiên, hiện nay mộtsố nước đã có xu hướng nhân rộng diện tích giống Hạt Kỷ tử được rửa sạch dưới vòi nước chảy,cây này ở những khu vực có điều kiện thích hợp ngâm xà phòng trong10 phút, sau đó hạt được rửa(Gîdea, 2017). sạch lại bằng nước. Tiếp theo, hạt được khử trùng bằng cồn 700 (Việt Nam) với các khoảng thời gian Ở nước ta, cây Kỷ tử còn có tên gọi khác là củ khác nhau (3, 5 và 7 phút). Sau đó hạt được rửakhởi, tuy đem lại giá trị kinh tế cao, nhưng diện sạch bằng nước cất vô trùng 3 lần. Mẫu hạt sautích trồng còn rất hạn chế, chỉ phân bố ở một số khi khử trùng được cấy lên môi trường Murashigetỉnh miền núi phía bắc như Sa Pa, Lào Cai trồng để and Skoog (MS) (Sigma, Mỹ); 3% (w/v) saccroselấy lá nấu canh, làm thuốc chữa ho, sốt. Hiện nay, (Merch, Đức), 0,8% (w/v) agar (Samchun, Hànchúng ta đã bắt đầu quan tâm đến việc trồng Kỷ Quốc).tử. Tuy nhiên, việc nhân rộng diện tích trồng Kỷtử còn gặp nhiều khó khăn về nguồn giống. Chủ Đánh giá hiệu quả khử trùng mẫu sau 2 tuầnyếu là sử dụng giống từ phương pháp giâm cành nuôi cấy thông qua các chỉ tiêu: tỷ lệ mẫu nhiễmhoặc gieo hạt. Khi trồng bằng cách gieo hạt, sự (%), tỷ lệ mẫu chết (%), tỷ lệ mẫu nảy mầm (%).nảy mầm không đồng đều, chất lượng cây giống 2.3. Phương pháp nhân nhanh chồi in vitrovà năng suất chưa tốt. Chồi in vitro sau 3 tuần nuôi cấy có chiều Nuôi cấy mô thực vật là một công cụ để nhân cao khoảng 5-6 cm, 6-8 lá/cây, được tái sinh1 Trường Đại học Sư Phạm, Đại học Đà Nẵng;Tác giả liên hệ: Bùi Thị Thơ; ĐT: 0931943387; Email: bttho@ued.udn.vn. 19Tập 18  Số 3-2024, Tạp chí Khoa học Tây Nguyêntrong môi trường MS (Sigma, Mỹ); bổ sung 3% trùng ở nhiệt độ 121°C trong 20 phút. Mẫu được(w/v) saccrose (Merch, Đức), 0,8% (w/v) agar nuôi cấy trên môi trường thích hợp ở nhiệt độ 25(Samchun, Hàn Quốc), 6-Benzylaminopurine ± 2°C, cường độ chiếu sáng 2000 lux, thời gian(BAP) (BioReagent, Mỹ) (0,5; 1,0; 1,5; 2,0 chiếu sáng 12h/ngày.mg/L), Kinetin (KIN) (BioReagent, Mỹ) (1,0; 2,0; 2.5. Phương pháp xử lý thống kê3,0 mg/L). Đánh giá hiệu quả phát sinh chồi sau 3 Mỗi thí nghiệm trên được bố trí lặp lạ ...