Nghiên cứu tạo dòng tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng kháng kháng nguyên tái tổ hợp Alpha-Fetoprotein

Ung thư gan nguyên phát mà điển hinh là ung thư biểu mô tế bào gan (HCC), một trong những bệnh lý phổ biến nhất trên toàn cầu, đặt ra những thách thức lớn đối với ngành y tế và cộng đồng. Nghiên cứu này nhằm mục tiêu: Tạo dòng tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng kháng kháng nguyên tái tổ hợp AFP trên chuột nhắt trắng thuần chủng BALB/c trong quy mô phòng thí nghiệm.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu tạo dòng tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng kháng kháng nguyên tái tổ hợp Alpha-Fetoprotein TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 539 - THÁNG 6 - SỐ CHUYẤN ĐỀ - 2024 NGHIÊN CỨU TẠO DÒNG TẾ BÀO LAI SINH KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG KHÁNG KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP ALPHA-FETOPROTEIN Hồ Trường Giang1, Võ Thị Bích Thủy2, Nghiêm Ngọc Minh2TÓM TẮT 60 gây báng trên chuột BALB/c. Dịch báng được Mục tiêu: Tạo dòng tế bào lai sinh kháng thể đánh giá kháng thể cho kết quả hàm lượng khángđơn dòng kháng kháng nguyên tái tổ hợp Alpha- thể đơn dòng trong dịch báng thu được từ haiFetoprotein (AFP) trên chuột nhắt trắng thuần dòng tế bào AFP1 và AFP2 đều rất cao. Kếtchủng BALB/c. Phương pháp nghiên cứu: Gây luận: Tạo thành công 2 dòng tế bào lai tiết khángmiễn dịch cho chuột nhắt trắng thuần chủng thể đơn dòng đặc hiệu với kháng nguyên tái tổBALB/c, phục hồi tế bào myeloma, cấy chuyển hợp AFP là AFP1 và AFP2.và nhân giống tế bào myeloma, sàng lọc tế bào Từ khóa: Kháng thể đơn dòng kháng khánglai có khả năng tiết kháng thể đặc hiệu với kháng nguyên tái tổ hợp AFP; gây báng trên chuộtnguyên tái tổ hợp AFP, đánh giá và kiểm tra hiệu BALB/c; hai dòng tế bào AFP1 và AFP2.giá kháng thể bằng phương pháp ELISA, lựachọn và gây báng trên chuột BALB/c, thu nhận SUMMARYdịch báng chuột và đánh giá hiệu giá kháng thể RESEARCH ON CREATION OFbằng phương pháp ELISA. Kết quả: Kháng HYBRABILOGIC CELL LINESnguyên tái tổ hợp AFP (nồng độ 400µg/ml) được PRODUCING MONOCLONEphối trộn với chất bổ trợ FIA, tiêm vào chuột với ANTIBODIES AGAINSTtổng thể tích là 50µl/ con. Tách tế bào lympho B RECOMBINANT ANTIGENS ALPHA-từ hạch lách và hạch bẹn của chuột, Dung hợp tế FETOPROTEINbào bằng chất xúc tác PEG và bổ sung môi Objective: To create a hybrid cell linetrường DMEM, Dịch huyền phù tế bào sau dung producing monoclonal antibodies againsthợp được nuôi trong đĩa 96 giếng, ngày thứ 10 recombinant Alpha-Fetoprotein (AFP) antigen innuôi cấy tế bào đạt khoảng 80% độ phủ bề mặt. purebred BALB/c mice. Methods: ImmunizeMỗi kháng nguyên tái tổ hợp chọn được 2 dòng purebred BALB/c mice, recover myeloma cells,sinh kháng đặc hiệu với kháng nguyên tái tổ hợp transplant and proliferate myeloma cells, screenAFP, tăng số lượng tế bào và thu nhận thành hybrid cells capable of secreting antibodiescông 2 dòng tế bào lai sinh kháng thể đơn dòng specific to recombinant AFP antigen, evaluatekháng lại kháng nguyên tái tổ hợp và sử dụng để and test antibody titers by ELISA method, select and induce ascites in BALB/c mice, collect mouse ascites fluid and evaluate antibody titers1 Học viện Quân y by ELISA method. Results: Recombinant AFP2 Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt nam antigen (concentration 400µg/ml) was mixedChịu trách nhiệm chính: Võ Thị Bích Thủy with FIA adjuvant, injected into mice with a totalEmail: thuytbvo.igr@gmail.com volume of 50µl/ mouse. Lympho B cells wereNgày nhận bài: 18/4/2024 separated from the lymph nodes and spleen of theNgày phản biện khoa học: 6/5/2024 mouse, cell suspension was made with PEGNgày duyệt bài: 26/5/2024 437 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC THƯỜNG NIÊN HỘI HÌNH THÁI HỌC VIỆT NAM - 2024catalyst and supplemented with DMEM medium, được sử dụng để đánh giá hiệu quả của cáccell suspension was cultured in 96 wells plate, on liệu pháp điều trị, cũng như dự báo về kếtthe 10th day of culture, the cells reached about quả điều trị. Nghiên cứu liên quan đến AFP80% surface coverage. Each recombinant antigen đã không ngừng phát triển từ đó. Nhiềuselected 2 specific antibody-producing lines with nghiên cứu đã tập trung vào việc cải thiện độrecombinant AFP antigen, increased the number nhạy và độ đặc hiệu của AFP trong việc phátof cells and successfully obtained 2 hybrid cell hiện HCC [3, 4].lines producing monoclonal antibodies against Hiện nay, kháng thể đơn dòng được sảnrecombinant antigen and used to induce ascites in xuất bằng công nghệ tế bào lai từ các khángBALB/c mice. The ascites fluid was evaluated nguyên tái tổ hợp [5] là một phương phápfor antibodies, the results showed that the đang được phát triển để góp phần chẩn đoánmonoclonal antibody content in the ascites fluid sớm sự có mặt của các biomarker đặc hiệuobtained from the two cell lines AFP1 and AFP2 c ...