Nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện protein tái tổ hợp TS24 của Taenia spp

Bài viết Nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện protein tái tổ hợp TS24 của Taenia spp nghiên cứu này chúng tôi đã tạo dòng và biểu hiện đoạn gene tái tổ hợp TS24 mã hóa protein TS24 của Taenia spp. để sử dụng như một nguồn kháng nguyên thay thế cho kháng nguyên thô.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện protein tái tổ hợp TS24 của Taenia spp Vietnam Journal of Community Medicine, Vol. 64, Special Issue (2023) 115-121INSTITUTE OF COMMUNITY HEALTH CLONING AND EXPRESSION OF TS24 RECOMBINANT PROTEIN OF TAENIA SPP Nguyen Thi Van Anh*, Dang Trinh Minh Anh, Pham Nguyen Thuy Vy, Ngo Thi Hong Phuong, Nguyen Thi Minh Chau, Tran Thi Khanh Quynh, Tran Minh Qui, Nguyen Ho Quynh Ngan, Nguyen Thi My Duyen, Vo Huynh Minh Hien Institute of Malariology Parasitology and Entomology of HCMC - 685 Tran Hung Dao, 1 ward, 5 district, Ho Chi Minh City, Vietnam Received 08/12/2022 Revised 10/01/2023; Accepted 14/02/2023 ABSTRACT Background: Cysticercosis is a parasitic tissue infection caused by larval cysts of the tapewormTaenia solium. The patients often have few or no symptoms for many years. Currently, serological tests are being increasingly, and ELISA test is widely used for diagnosis. Nevertheless, ELISA using native antigens had the problem with cross reactions with other parasites. Moreover, the preparation of native antigens also had the limition of source of antigen. Therefore, recombinant antigens have been decribed as an alternative to native antigens for diagnosis. Objective: The purpose is to clone and express the TS24 recombinant protein of Taenia spp. to use it as an alterlative source in order to overcome the problems in using native antigens. Subject and method: TS24 gene (extracted from proglottid of Taenia spp. collected in Institute of Malariology - Parasitology - Entomology in HCM City) encoding TS24 protein was amplified and cloned into the vector pET28a. Then, the plasmid pET28a-TS24 was transformed into E. coli BL21 for expression. Results: TS24 gene encoding TS24 recombinant protein had the size of 282 bp and had 92,5 % identical to TS24 of T. solium on GenBank (AY211879.1). TS24 gene was successfully subcloned to pET28a for expression. Finally, TS24 recombinant protein was expressed at 37oC in 6h and had the size of 12 kDa. Conclusion: The TS24 recombinant protein will be used as an antigen for developing of ELISA test for cysticercosis. Key word: TS24; cysticercosis; Recombinant protein; IMPEHCM.*Corressponding author Email address: vananh_061288@yahoo.com.vn Phone number: (+84) 966 777 143 115 N.T.V. Anh et al. / Vietnam Journal of Community Medicine, Vol. 64, Special Issue (2023) 115-121 NGHIÊN CỨU TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN PROTEIN TÁI TỔ HỢP TS24 CỦA TAENIA SPP Nguyễn Thị Vân Anh*, Đặng Trịnh Minh Anh, Phạm Nguyễn Thúy Vy, Ngô Thị Hồng Phương, Nguyễn Thị Minh Châu, Trần Thị Khánh Quỳnh, Trần Minh Qúi, Nguyễn Hồ Quỳnh Ngân, Nguyễn Thị Mỹ Duyên, Võ Huỳnh Minh Hiền Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Tp.HCM - 685 Đ. Trần Hưng Đạo, phường 1, quận 5, thành phố Hồ Chí Minh, Việt Nam Ngày nhận bài: 08 tháng 12 năm 2022 Chỉnh sửa ngày: 10 tháng 01 năm 2023; Ngày duyệt đăng: 14 tháng 02 năm 2023 TÓM TẮT Đặt vấn đề: Cysticercosis là bệnh do ấu trùng của sán dâyTaenia soliumgây ra. Người nhiễm bệnh thường có rất ít hoặc không có triệu chứng trong nhiều năm. Hiện nay, các xét nghiệm huyết thanh học ngày càng được sử dụng nhiều hơn, trong đó thuật kỹ thuật ELISA được sử dụng rộng rãi. Tuy nhiên vấn đề chính của việc sử dụng kháng nguyên thô thường có phản ứng chéo với huyết thanh người nhiễm các ký sinh trùng khác.Ngoài ra, việc chuẩn bị các kháng nguyên thô cũng bị hạn chế nguồn cung.Do đó để chủ động trong việc tạo ra nguồn kháng nguyên ổn định, có độ đặc hiệu cao sử dụng cho kỹ thuật ELISA thì protein tái tổ hợp là một lựa chọn thay thế. Mục tiêu: Nghiên cứu này chúng tôi đã tạo dòng và biểu hiện đoạn gene tái tổ hợp TS24 mã hóa protein TS24 của Taenia spp. để sử dụng như một nguồn kháng nguyên thay thế cho kháng nguyên thô. Phương pháp nghiên cứu: Đoạn gene TS24 mã hóa protein TS24 (được phân lập từ đốt sán thu thập tại Viện Sốt rét- Ký sinh trùng- Côn trùng ...