Nghiên cứu xác định giới tính bằng kỹ thuật PCR đa mồi

Bài viết tiến hành nghiên cứu nhằm hoàn thiện quy trình PCR đa mời để khuếch đại các đoạn gên SRY và ZFY; đánh giá giá trị của kỹ thuật này trong việc xác định giới tính.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu xác định giới tính bằng kỹ thuật PCR đa mồi NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH BẰNG KỸ THUẬT PCR ĐA MỒI HÀ PHƯƠNG THƯ Viện Khoa học Vật liệu HÀ THỊ MINH THI, NGUYỄN VIẾT NHÂN, Trường Đại học Y Dược Huế TÓM TẮT: ĐẶT VẤN ĐỀ Xác định giới tính đóng một vai trò quan trọng Xác định giới tính đóng một vai trò quan trọngtrong di truyền y học. Để xác định giới tính, ngoài trong di truyền y học. Trước đây, việc xác định giớiphương pháp lập karyotype, kỹ thuật PCR đa mồi đã tính chỉ được thực hiện bằng phương pháp di truyềnđược sử dụng rộng rãi nhằm xác định sự hiện diện tế bào là lập karyotype, trong đó cặp nhiễm sắc thểcủa gene SRY. Đề tài được thực hiện nhằm các mục (NST) giới tính của nữ là XX và của nam là XY. Tuytiêu sau: nhiên, trên thực tế đã có nhiều trường hợp đảo (1) Hoàn thiện quy trình PCR đa mồi để khuếch ngược giới tính (sex reverse), đó là một người mangđại các đoạn gene SRY và ZFY. kiểu hình nữ nhưng cặp NST giới tính là XY, ngược (2) Đánh giá giá trị của kỹ thuật này trong việc xác lại một người mang kiểu hình nam nhưng cặp NSTđịnh giới tính. giới tính là XX. Vì vậy, việc phối hợp thêm một Quy trình PCR đa mồi được thực hiện với 2 cặp phương pháp di truyền phân tử nhằm phân tích genemồi tương ứng gene SRY và ZFX/ZFY, trong đó gene chịu trách nhiệm hình thành giới tính nam là rất cầnZFX/ZFY được dùng làm chứng nội. Các mẫu DNA thiết. Hiện nay, người ta đã phát hiện ra nhiều genedùng trong thí nghiệm được chiết tách từ máu ngoại liên quan đến việc hình thành giới tính nam, trong đóvi của 30 người tình nguyện đã có con cái, gồm 15 quan trọng nhất là gene SRY (sex-determining regionnam và 15 nữ. of Y gene) được phân lập vào năm 1990. Gene SRY Chúng tôi rút ra các kết luận sau: mã hoá một yếu tố phiên mã có khả năng gắn với - Kỹ thuật PCR đa mồi với việc sử dụng 2 cặp DNA đặc hiệu và thúc đẩy hoạt động của các genemồi tương ứng với gene SRY và ZFX/ZFY đã khuếch mã hoá các yếu tố tham gia hình thành tinh hoàn.đại được các đoạn DNA thích hợp. Những người mang NST Y nhưng thiếu gen SRY sẽ - Kỹ thuật PCR đa mồi này đủ điều kiện để ứng không hình thành tinh hoàn và mang kiểu hình bêndụng trong xác định giới tính dựa trên việc đánh giá ngoài là nữ, ngược lại những người mang NST giớisự hiện diện của gene SRY. tính XX nhưng có gene SRY thì vẫn hình thành tinh Summary: hoàn và có kiểu hình bên ngoài là nam. Để xác định STUDY ON THE SEX IDENTIFICATION BY sự hiện diện gene SRY trong genome, một kỹ thuậtMULTIPLEX PCR TECHNIQUE phân tử đơn giản, nhanh và nhạy là PCR đã được sử The sex identification plays an important role in dụng rộng rãi. Tuy nhiên, nếu chỉ dùng một cặp mồimedical genetics. For sex identification, apart from nhằm khuếch đại một đoạn của gene SRY thì sẽ gặpmethod of karyotyping, multiplex PCR technique is khó khăn khi phân tích kết quả ở người nữ, vì khioften used in order to identify the presence of SRY không có sản phẩm PCR sẽ không phân biệt đượcgene. This study is aimed at: đó là do không có gene SRY (người nữ) hay do phản (1) Improving of multiplex PCR technique in order ứng PCR không hiệu quả. Vì vậy, cần phải thiết kếto amplify the DNA fragments of SRY and ZFY gene. một kỹ thuật PCR đa mồi, trong đó ngoài cặp mồi đặc (2) Evaluating of the value of this technique in the hiệu với gene SRY, còn phải kết hợp thêm một cặpsex identification. mồi khuếch đại một gene khác luôn có mặt ở cả nam The process of multiplex PCR was carried out by lẫn nữ để làm chứng nội (internal control). Geneusing two primer pairs of SRY and ZFY gene. được lựa chọn làm chứng nội trong kỹ thuật củaZFX/ZFY gene was used as an internal control. The chúng tôi là ZFX/ZFY.DNA samples used in this experiment were extracted Đề tài được thực hiện nhằm các mục tiêu sau:from peripheral blood of thirty volunteers who have (1) Hoàn thiện quy trình PCR đa mồi để khuếchchildren, including fifteen men and fifteen women. đại các đoạn gene ...