Nghiên cứu xử lý và bảo quản dài ngày tế bào gốc tạo máu

Tế bào gốc tạo máu được thu gom từ dịch tủy xương, máu ngoại vi sau huy động bằng G-CSF và máu dây rốn. Các mẫu thu gom sẽ được xử lý loại bỏ hồng cầu và huyết tương để tiến hành bảo quản dàingày. Vì vậy nghiên cứu với mục tiêu đánh giá kết quả xử lý và bảo quản dài ngày tế bào gốc tạo máu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu xử lý và bảo quản dài ngày tế bào gốc tạo máuY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 4 * 2011Nghiên cứu Y họcNGHIÊN CỨU XỬ LÝ VÀ BẢO QUẢN DÀI NGÀY TẾ BÀO GỐC TẠO MÁUNguyễn Quang Tùng*TÓM TẮTĐặt vấn đề: Tế bào gốc tạo máu được thu gom từ dịch tủy xương, máu ngoại vi sau huy động bằng G-CSFvà máu dây rốn. Các mẫu thu gom sẽ được xử lý loại bỏ hồng cầu và huyết tương để tiến hành bảo quản dàingày.Mục tiêu: Đánh giá kết quả xử lý và bảo quản dài ngày tế bào gốc tạo máu.Đối tượng và phương pháp: Áp dụng kỹ thuật xử lý có dung dịch cao phân tử HES 6% để loại bỏhồng cầu và huyết tương của 40 mẫu tế bào gốc, gồm 10 mẫu dịch tủy xương, 10 mẫu máu ngoại vi sauhuy động và 20 mẫu máu dây rốn. Sau đó bảo quản các mẫu dài ngày trong nitơ lỏng và đếm tỷ lệ tế bàosống sau bảo quản 3 tháng.Kết quả: Đã loại bỏ được 86,4% hồng cầu từ dịch hút tủy, 88,5% từ máu dây rốn, đồng thời tỷ lệ mất bạchcầu lần lượt là 13,5% và 8,3%. Hiệu quả thu hồi tế bào CD34 đạt 99,2% từ máu ngoại vi, 91,3% từ dịch tủy và85,4% từ máu dây rốn. Tỷ lệ tế bào sống sau rã đông đạt cao trên 90% và tỷ lệ này giảm dần theo thời gian khitiếp tục bảo quản sau rã đông ở 4 độ C.Kết luận: Quy trình xử lý và bảo quản dài ngày tế bào gốc tạo máu có hiệu quả cao, có thể ứng dụng tốttrên lâm sàng.Từ khóa: Tế bào gốc tạo máu, thu gom, xử lý, bảo quản, rã đông.ABSTRACTSAVE PROCESSING RESOURCES AND LONG – TERM PRESERVATION OF HEMATOPOIETICSTEM CELLSNguyen Quang Tung * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 - Supplement of No 4 - 2011: 459- 464Introduction: Hematopoietic stem cell were collected from bone marrow (BMSC), G-CSF mobiliziedperipheral blood (PBSC) and cord blood (CBSC). Stem cell products could be storaged for long term afterprocessing for elimination red blood cell and plasma, which is remained in collected components.Purpose: To evaluate(1) the result of processing technics for eliminate RBC and plasma in the components,and the result of long-term storage of those component in nitrogen liquid.(2)Material and methods: Using centrifugation with hydroxyethyl starch (HES) 6% to eliminate RBC andplasma of 40 samples: 10 BMSC, 10 PBSC and 20 CBSC. Processed samples have been storaged for 3 months innitrogen liquid, then the percentage of alive cells has been counted after thawing.Results: The percentage of red blood cell was removed from bone marrow, peripheral blood and cord bloodproducts is 86.4% and 88.5%, simutanously, white blood cell loss is 13.5% and 8.3%. CD34 recovery is 99.2%,91.3% and 85.4% from PBSC, bone marrow and cord blood components. After thawing, more than 90% of cellssurvived in the storaged products, however, the percentage of cell death is incrising gradually in 4oC.Conclusions: The tecnical protocol has been shown a very high efficiancy for processing samples aftercolletion, and those protocols could be useful also for storage of HSC components.Key words: Hematopoietic stem cell: HSC, BMSC, PBSC, CBSC, collection, processing, storage, thawing.* Trường Đại Học Y Hà NộiTác giả liên lạc: ThS. Nguyễn Quang TùngChuyên Đề Truyền Máu Huyết HọcĐT: 0912.015.997Email: bsquangtung@gmail.com459Nghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 4 * 2011ĐẶT VẤN ĐỀĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUGhép tế bào gốc tạo máu là phương phápđiều trị hiện đại, được sử dụng để điều trị chocác bệnh lý tạo máu và hiện đang mở rộng chỉđịnh cho các bệnh lý chuyên khoa khác: timmạch, tiêu hóa, thần kinh, mắt và cơ xươngkhớp... Các tế bào gốc được thu gom chủ yếu từtủy xương, từ máu ngoại vi sau huy động bằngyếu tố kích thích tạo máu (phổ biến nhất đếnnay là yếu tố kích thích tạo cụm dòng bạch cầuhạt: Granulocyte-colony stimulating factor GCSF) và từ máu dây rốn(2).Đối tượng nghiên cứuKhi thu gom với mục đích ghép đồng loại,trong nhiều trường hợp, các chế phẩm cầnphải được bảo quản dài hạn, như trong điềukiện –1960C, đến khi sử dụng. Để đảm bảochất lượng bảo quản, các mẫu tế bào gốc cầnđược loại bỏ hồng cầu và huyết tương nhằmtránh ảnh hưởng đến chất lượng các tế bàođược bảo quản, đồng thời giảm thể tích chấtbảo quản cần phải sử dụng. Mặc dù máy táchtự động có thể được sử dụng để xử lý các mẫusau thu gom, nhưng phương pháp thủ côngrất phù hợp khi tiến hành xử lý các mẫu thểtích nhỏ mà không đòi hỏi các trang bị phứctạp, kỹ thuật tiến hành khá đơn giản và rấtkinh tế, có thể triển khai được ở nhiều cơ sởđể tạo điều kiện mở rộng ứng dụng tế bào gốcvào điều trị lâm sàng. Để đánh giá quá trìnhbảo quản dài ngày, các mẫu tế bào gốc cầnphải được xác định chỉ số tế bào sống sót saubảo quản và tỷ lệ các tế bào chết theo thờigian sau bảo quản. Thông tin này sẽ giúp íchcho việc sử dụng hợp lý các chế phẩm tế bàogốc trên lâm sàng.Hiện nay, nhu cầu sử dụng tế bào gốc trongđiều trị ngày càng cao, phạm vi ứng dụng tế bàogốc đang được mở rộng nhanh chóng trongnhiều chuyên ngành. Chính vì vậy, việc nghiêncứu áp dụng t ...