Phân lập và thiết lập chất đối chiếu isoquercitrin

Bài viết "Phân lập và thiết lập chất đối chiếu isoquercitrin" nghiên cứu với mục tiêu nhằm phân lập và xây dựng chất chuẩn isoquercitrin từ lá trinh nữ hoàng cung (TNHC) để làm chất đối chiếu. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phân lập và thiết lập chất đối chiếu isoquercitrinNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014PHÂN LẬP VÀ THIẾT LẬP CHẤT ĐỐI CHIẾU ISOQUERCITRINNguyễn Hữu Lạc Thủy*, Võ Ngọc Trái*, Hoàng Anh Việt*, Nguyễn Thị Phương Trang*, Võ Thị Bạch Huệ*TÓM TẮTMục tiêu: Phân lập và xây dựng chất chuẩn isoquercitrin từ lá Trinh nữ hoàng cung (TNHC) để làm chấtđối chiếu.Phương pháp: Isoquercitrin được chiết xuất và phân lập từ lá TNHC bằng phương pháp chiết ngấm kiệt vớidung môi là cồn 70%. Sử dụng kỹ thuật sắc ký cột với chất hấp phụ silicagel được tẩm đệm pH 3-4. Độ tinhkhiết, điểm chảy của chất phân lập được xác định bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và quét nhiệt vi sai.Cấu trúc hợp chất tinh khiết được xác định bằng các kỹ thuật phổ UV, IR, MS và NMR.Kết quả và bàn luận: Qui trình phân lập isoquercitrin từ lá TNHC được báo cáo và độ tinh khiết củaisoquercitrin là 98,14% (tính trên nguyên trạng) được xác định bằng HPLC. Qui trình thiết lập chất đốichiếu được thực hiện theo hướng dẫn của WHOvà ASEAN(3,5). Giá trị ấn định, độ lệch chuẩn, độ khôngđảm bảo đo chuẩn được tính toán theo hướng dẫn của ISO 13528(2).Isoquercitrin đạt yêu cầu của một chấtchuẩn sử dụng trong công tác kiểm tra và đánh giá chất lượng nguyên liệu TNHC và sản phẩm có nguồngốc từ nguyên liệu này.Từ khóa: trinh nữ hoàng cung, flavonoid, isoquercitrin, chất đối chiếu, thiết lập, phân lập.ABSTRACTISOLATION AND ESTABLISHMENT OF THE REFERENCE STANDARDFOR ISOQUERCITRINE FROM THE LEAVES OF CRINUM LATIFOLIUM L.Nguyen Huu Lac Thuy, Vo Ngoc Trac, Hoang Anh Viet, Nguyen Thi Phương Trang, Vo Thi Bach Hue* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 - Supplement of No 4 - 2013: 150 - 156Objectives: Isolation and establishment of the reference standard (RS) for isoquercitrine from the leaves ofCrinum latifolium L. (Amaryllidaceae).Methods: The total flavonoid from the leaves of Crinum latifolium L. was extracted by percolation extractionwith 70% ethanol. The total extracts were separated by CC on buffer-coated sillica gel at pH 3-4. The structure ofpure compound was identified by UV, IR, MS and NMR spectrometry. Thepurity,meltingpointof isolatedcompound were determined by HPLC and DSC, respectively.Results and Conclusions: A procedure for isolation of isoquercitrine from the leave of Crinum latifoliumwas reported. The content of isolated compound was 98.14% by HPLC. Establishment of the reference standardfor isoquercitrine was carried out by general guidelines of WHO and ASEAN(3,5).The standard uncertainty,assigned value, standard deviation were calculated by ISO 13528(2). Isoquercitrine can be accepted as a RS forquality control of materials and products containing Crinum latifolium L.Keywords:crinum latifolium L., flavonoid, isoquercitrin, reference standard, estabishment, isolation.thuốc trung ương và Viện kiểm nghiệm thuốcĐẶT VẤN ĐỀTpHCM vẫn chưa cung cấp isoequercitrin nhưIsoquercitrin là 1 flavonoid phổ biến trongmột chất đối chiếu. Trong khi đó thuốc códược liệu nhưng hiện tại hệ thống kiểmnguồn gốc từ dược liệu ngày càng được cácnghiệm thuốc quốc gia như Viện kiểm nghiệm∗Khoa Dược, Đại học Y Dược TP.HCMTác giả liên hệ: DS. Nguyễn Hữu Lạc Thủy ĐT: 0903838274150Email: nguyenhuulacthuy@yahoo.comChuyên Đề Dược HọcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014công ty dược và cả người tiêu dùng quan tâmdo những tính năng đặc biệt. Các phươngpháp phân tích như phương pháp quang phổ,sắc ký, điện di đều cần có chất chuẩn để sosánh và đánh giá mẫu thử. Vì vậy, việc chiếtxuất - thiết lập chất chuẩn từ dược liệu đạt yêucầu chuẩn quốc gia là rất cần thiết để đẩymạnh việc tiêu chuẩn hóa, nâng cao chấtlượng dược liệu và các chế phẩm từ dược liệu.NGUYÊNLIỆU -PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨUNguyên liệu – Trang thiết bịLá TNHC (Crinum latifolium L.,) họ Thủytiên (Amaryllidaceae) thu hái tại tỉnh BìnhĐịnh vào tháng 4/2012năm 2012, được địnhdanh bởi PGS. Võ Thị Bạch Huệ - Khoa Dược,Đại học Y Dược TpHCM. Lá được rửa sạch,phơi khô, xay đạt yêu cầu chiết xuất và bảoquản trong túi nhựa chống ẩm trước khi thửnghiệm, độ ẩm khoảng 12%.Các chất phân lập bằng bằng sắc ký cột dùngchất hấp phụ sillicagel pha thường cỡ hạt 0,040,063 mm (Merck) có tẩm đệm pH 3-4.Độ tinh khiết được xác định bằng hệ thốngHPLC Alliance 2695-2996 và thiết bị DSCQ20.Các phổ khối được thực hiện trên máy LCMS hiệu Micro Quattro API ESCi Multi-modeIonization (Micromass). Máy cộng hưởng từ hạtnhân Bruker AM500 FTNMR Spectrometer(Viện hóa học và Công nghệ Việt nam).Tủ đóngống Labconco Protector Glove Box (Viện KNthuốc TPHCM).Phương pháp nghiên cứuChiếtxuất,phânlập,tinhchếIsoquercitrin được phân lập từ caopolyphenol toàn phần chiết từ lá TNHC.Cáckỹ thuật được sử dụng như sắc ký cột, thayđổi dung môi, kết tinh lại để đạt độ tinh khiếtcao nhất.Xác định độ tinh khiết, xây dựng bộ dữ liệuchuẩnChất phân lập được kiểm tra độ tinh khiếtbằng phương pháp sắc ký lỏng hiệ ...