Phân lập, xác định cấu trúc một số hợp chất tự nhiên từ lá thông đỏ lá dài (taxus wallichiana zucc.), thiết lập chất chuẩn đối chiếu taxuspine F đã phân lập

Đề tài này được thực hiện với mục tiêu phân lập, xác định cấu trúc một số hợp chất tự nhiên từ lá thông đỏ lá dài và thiết lập chất chuẩn đối chiếu từ hợp chất taxoid phân lập được. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phân lập, xác định cấu trúc một số hợp chất tự nhiên từ lá thông đỏ lá dài (taxus wallichiana zucc.), thiết lập chất chuẩn đối chiếu taxuspine F đã phân lậpY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013Nghiên cứu Y họcPHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT TỰ NHIÊNTỪ LÁ THÔNG ĐỎ LÁ DÀI (TAXUS WALLICHIANA ZUCC.),THIẾT LẬP CHẤT CHUẨN ĐỐI CHIẾU TAXUSPINE F ĐÃ PHÂN LẬPHứa Hoàng Oanh*, Trần Ngọc Thùy Dương*, Bùi Thị Bích Trâm*, Hà Diệu Ly**,Bùi Thế Vinh***,Trần Công Luận***, Nguyễn Đức Tuấn*TÓM TẮTMở đầu: Thông đỏ lá dài (Taxus wallichiana Zucc.) là một dược liệu quý, đã được trồng ở Lâm Đồngvới triển vọng là nguồn cung cấp nguyên liệu cho việc sản xuất các thuốc trị ung thư. Do đó, việc xây dựngtiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu cũng như đánh giá chất lượng các taxoid được chiết tách từ thông đỏ ládài là hết sức quan trọng và cần thiết. Chính vì vậy, đề tài này được thực hiện với mục tiêu phân lập, xácđịnh cấu trúc một số hợp chất tự nhiên từ lá thông đỏ lá dài và thiết lập chất chuẩn đối chiếu từ hợp chấttaxoid phân lập được.Đối tượng - Phương pháp nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu: cao methanol 60% của lá thông đỏ ládài.Phương pháp nghiên cứu: Xử lý cao: loại tạp kém phân cực có trong cao methanol 60% bằng ether dầu hỏa.Phân lập và xác định cấu trúc hợp chất tự nhiên: phân lập hợp chất tự nhiên từ cao sau khi loại tạp bằng các kỹthuật sắc ký cột cổ điển, sắc ký lỏng hiệu năng cao điều chế và phương pháp kết tinh trong dung môi, xác định cấutrúc chất phân lập bằng các phương pháp phổ nghiệm UV-Vis, IR, MS, NMR. Sau cùng, độ tinh khiết của chấtphân lập được xác định bằng kỹ thuật HPLC pha đảo với đầu dò PDA. Thiết lập chất chuẩn thiên nhiên theohướng dẫn của WHO, ASEAN và ISO/IEC 15328: đánh giá chất chuẩn bằng định tính dựa trên các giá trị: phổUV-Vis, IR, MS, NMR, định lượng bằng HPLC; đóng gói, đánh giá đồng nhất, đánh giá liên phòng thí nghiệm(ba phòng thí nghiệm đạt tiêu chuẩn GLP).Kết quả: Từ 75 g cao methanol 60% đã phân lập được 425 mg hợp chất taxinine B (độ tinh khiết > 98%),732 mg hợp chất taxuspine F (độ tinh khiết > 97%) và 310 mg hợp chất bis-(2-ethylhexyl)-phtalate. Theo hướngdẫn của WHO, ASEAN và ISO/IEC 15328, 300 mg chất chuẩn taxuspine F được thiết lập đạt độ đồng nhất khiđóng gói và độ tinh khiết 97,46%.Kết luận: Đề tài đã phân lập được hai taxoid là taxinine B và taxuspine F, và hợp chất bis-(2-ethylhexyl)phtalate từ lá thông đỏ lá dài (Taxus wallichiana Zucc.) trồng ở Lâm Đồng. Trong đó, bis-(2-ethylhexyl)-phtalateđược phân lập lần đầu tiên từ Taxus wallichiana. Thiết lập được một chất chuẩn đối chiếu là taxuspine F đạt độtinh khiết 97,46%.Từ khóa: Taxus wallichiana, taxinine B, taxuspine F, bis-(2-ethylhexyl)-phtalate, reference standard.ABSTRACTISOLATION AND STRUCTURAL IDENTIFICATION OF CHEMICAL CONSTITUENTSFROM THE NEEDLES OF TAXUS WALLICHIANA ZUCC.,AND ESTABLISHMENT OF REFERENCE STANDARD TAXUSPINE FHua Hoang Oanh, Tran Ngoc Thuy Duong, Bui Thi Bich Tram, Ha Dieu Ly, Bui The Vinh,Tran Cong Luan, Nguyen Duc Tuan* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 - Supplement of No 1 – 2014: 235 - 242* Đại học Y Dược Tp. Hồ Chí Minh*** Trung tâm Sâm và Dược liệu TP. HCMTác giả liên lạc: ThS. Hứa Hoàng OanhChuyên Đề Y Học Cổ Truyền** Viện Kiểm nghiệm thuốc TP. HCMĐT: 0909 62 32 35Email: oanhhuahoang@yahoo.com235Nghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013Background – Objectives: Taxus wallichiana Zucc. is a precious medicinal herb with prospect of becomingthe source for supplying raw material to produce anti-cancer drugs. Therefore, standardization of this herb as wellas evaluation of quality of the taxoids extracted from Taxus wallichiana Zucc. are very important and necessary.Thus, the aim of this study was to isolate, identify chemical structure of chemical constituents from the needles ofTaxus wallichiana Zucc. and establish reference standard from one of isolated taxoids.Materials and Methods: Materials: 60% methanol extract from the needles of Taxus wallichiana Zucccultivated in Lam Dong province. Methods: Isolated and identification of chemical constituents: Low polarresidues from 60% methanol extract were removed by petroleum ether, the constituents were isolated and purifiedfrom the resultant methanol extract by column chromatography, preparative HPLC, and crystallization insolvent. Then, the purified compounds was elucidated chemical structure by means of UV-Vis, IR, MS, NMRspectroscopy. Finally, the purity of two taxoids was determined by reversed phase HPLC with PDA detector.Establishment of reference standard taxuspine F according to the guidelines of WHO, Asean and ISO/IEC 15328:Basing on the data of infrared spectrometry, ultraviolet spectrometry, mass spectrometry, nuclear magneticresonance spectrometry and high performance liquid chromatography, the quality and quantity of taxuspine Fwere evaluated. In addition, the validation of met ...