protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi khuẩn E.coli

Hiện nay, chúng ta đang phải đối phó với một thử thách rất lớn do dịch cúm gia cầm H5N1 gây ra. Một đại dịch cúm do H5N1 có thể xảy ra do con người không có kháng thể tồn tại đối với virus H5N1 này và do độc lực cao của chúng mà hiện nay vẫn chưa sẵn có vaccine phòng bệnh cúm H5N1.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
protein tái tổ hợp HA và M2 của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi khuẩn E.coli protein tái tổ hợp HA và M2của virus cúm gia cầm H5N1 trong vi khuẩn E.coliBước đầu thu nhận một số kết quảbiểu hiện protein tái tổ hợp HA vàM2 của virus cúm gia cầm H5N1trong vi khuẩn E.coliKể từ cuối năm 2003 đến nay, dịchcúm gia cầm H5N1 đã gây thiệt hạivề tài sản và con người ở nhiều nơitrên thế giới. Hàng trăm triệu giacầm, động vật bị chết do virus H5N1hoặc bị tiêu hủy để ngăn chặn sự lanrộng của dịch cúm. Theo Tổ chức Ytế thế giới (WHO), trong tổng số 328ca được ghi nhận bị nhiễm cúm là đãcó 200 ca bị tử vong, trong đó ViệtNam đứng thứ hai trên thế giới, sauIndonesia, có số người tử vong docúm H5N1 là 46 ca (theo ghinhận của WHOđếnngày10/09/2007). Hiện nay, chúng tađang phải đối phó với một thử tháchrất lớn do dịch cúm gia cầm H5N1gây ra. Một đại dịch cúm do H5N1có thể xảy ra do con người không cókháng thể tồn tại đối với virus H5N1này và do độc lực cao của chúng màhiện nay vẫn chưa sẵn có vaccinephòng bệnh cúm H5N1. Trước tìnhhình cấp thiết đó, chúng tôi tiến hànhnghiên cứu “Tạo kháng nguyên táitổ hợp HA, NA, M2 và NS1 củavirus cúm gia cầm H5N1 và thửnghiệm đáp ứng miễn dịch”. Mụctiêu của chúng tôi là tạo 4 proteinbiến đổi (ký hiệu là HAP, NAP, M2và NS1) của virus cúm H5N1 làmkháng nguyên. Bốn protein này đượcnhân dòng và biểu hiệntrong E.coli BL21 thông qua plasmidbiểu hiện pGEX 4T-3. Bước đầu đãcó một số kết quả khả quan. Chúngtôi đã biểu hiện thành công 2 proteintái tổ hợp HAP và M2 (có trọnglượng tương ứng 46 kDa và 37 kDa)trong E.coli BL21. Kết quả biểu hiệnđã được kiểm tra bằng điện di SDS-PAGE và Western blot. Hàm lượngprotein biểu hiện khá cao. Hình: Kết quả cảm ứng biểu hiện protein HAP và M2Giếng 1: BL21 sau 6 giờ cảm ứngIPTG 0.5mM (phần không tan)Giếng 2: BL21 sau 6 giờ cảm ứngIPTG 0.5mM (phần tan)Giếng 3: BL21-pGEX 4T-3 sau 6 giờcảm ứng IPTG 0.5mM (phần khôngtan)Giếng 4: BL21-pGEX 4T-3 sau 6 giờcảm ứng IPTG 0.5mM (phần tan)Giếng 5: BL21-HAP sau 6 giờ cảmứng IPTG 0.5mM (phần không tan)Giếng 6: BL21-HAP sau 6 giờ cảmứng IPTG 0.5mM (phần tan)Giếng 7: BL21-M2 sau 6 giờ cảmứng IPTG 0.5mM (phần không tan)Giếng 8: BL21-M2 sau 6 giờ cảmứng IPTG 0.5mM (phần tan)Giếng 9: BL21-HAP sau 6 giờ cảmứng IPTG 0.5mM (trước khi phá vởtế bào)M: thang protein (2-212 kDa, NEB)Khi chúng tôi so sánh kết quả giảitrình tự của protein tái tổ hợp HAP,M2 với dữ liệu của GeneBank chothấy đoạn protein mà chúng tôi thiếtkế có độ tương đồng rất cao (100%)so với các chủng thuộc clade 1 (ởViệt Nam, Thái Lan, Campuchia,Lào) và một số chủng thuộc clade 2(ở Hàn Quốc, Trung Quốc). Với kếtquả ghi nhận được cho chúng tôi hyvọng là sử dụng các protein này làmkháng nguyên thì tiềm năng rất lớntạo được đáp ứng miễn dịch của cáckháng nguyên là trên phổ rộng,kháng lại nhiều chủng cúm H5N1gây độc cao. Đây là một kết quả thậtcó ý nghĩa, mở ra triển vọng rất lớntrong nghiên cứu vaccine phòngbệnh cúm gia cầm H5N1. Nếu việcnghiên cứu sản xuất vaccine proteintái tổ hợp này phòng được bệnh cúmH5N1 là thành công, sẽ góp phần rấtlớn trong việc giảm bớt thiệt hại vềtài sản và con người do virus H5N1gây ra.