Tạo dòng và biểu hiện interleukin-33 người dung hợp với SUMO trên Escherichia coli

Nghiên cứu này được thực hiện với mong muốn tạo được nguồn IL-33 tái tổ hợp dạng tan trên Escherichia coli nhằm đáp ứng nhu cầu nghiên cứu và thử nghiệm thuốc tại Việt Nam. Bước đầu tiên gen mã hoá cho il33 người được tối ưu hóa cho biểu hiện trên E. coli. Chủng E. coli với plasmid mang gen này được tạo dòng và kiểm tra sự biểu hiện của protein tái tổ hợp.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tạo dòng và biểu hiện interleukin-33 người dung hợp với SUMO trên Escherichia coli vietnam medical journal n03 - MAY - 2024người, TBBC giả lập và TBTC giả lập trên từng 2. Sciacovelli, L.; Secchiero, S.; Zardo, L.;thiết bị phân tích giữa 10 phòng xét nghiệm là Zaninotto, M.; Plebani, M. External quality assessment: an effective tool for clinicaltương đương nhau, cùng một mức nồng độ thì governance in laboratory medicine. Clin. Chem.thiết bị Celldyn 3200, Celldyn Ruby sẽ cho kết Lab. Med. 2006, 44, 740-749.quả TBBC giả lập và TBHC người tương đương 3. Sciacovelli, L.; Secchiero, S.; Zardo, L.;nhau, chỉ có chỉ số TBTC là khác nhau. và sự Plebani, M. The role of the external quality assessment. Biochem. Med. 2010, 20, 160-164.khác biệt này có ý nghĩa thống kê (p < 0,05). 4. Vo, N.N.; Tran, H.T.; Truong, Q.T.; Nguyen,Như vậy, mẫu sinh phẩm đo số lượng tế bào T.H. Optimization of Storage Medium formáu đạt tiêu chuẩn để có thể được sử dụng để Hematological Reference Samples in Externalđánh giá kết quả của các phòng xét nghiệm có Quality Assessment. Appl. Sci. 2021, 11, 8777. https://doi.org/ 10.3390/app11188777.sử dụng dòng máy đo quang là Celldyn 3200, 5. Miller, W.G., Specimen materials, target valuesCelldyn Ruby. and commutability for external quality assessment (proficiency testing) schemes. Clinica ChimicaTÀI LIỆU THAM KHẢO Acta, 2003. 327(1): p. 25-37.1. Whitehead, T.; Woodford, F. External quality 6. Westgard J.O. Basic QC practies, 4th ed.; assessment of clinical laboratories in the United Westgard QC Inc., USA, 2016. Kingdom. J. Clin. Pathol. 1981, 34, 947-957. TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN INTERLEUKIN-33 NGƯỜI DUNG HỢP VỚI SUMO TRÊN ESCHERICHIA COLI Nguyễn Quốc Thái1, Nguyễn Thanh Hoài Phong1, Mai Thành Tấn1, Mai Huỳnh Như1, Thái Khắc Minh1TÓM TẮT 25 SUMMARY Đặt vấn đề: Các nghiên cứu gần đây cho thấy EXPRESSION OF HUMAN INTERLEUKIN-33interleukin (IL)-33 và thụ thể đóng vai trò quan trọng FUSED WITH SUMO IN ESCHERICHIA COLItrong các bệnh lí viêm, nhiễm trùng và tự miễn. Tuy Background: Recent studies showed thatnhiên, việc chiết xuất IL-33 trực tiếp từ các mô gặp interleukin (IL)-33 and its receptor play an importantnhiều khó khăn và lượng protein chiết được rất thấp role in inflammation, infection, and autoimmunegây trở ngại cho nghiên cứu phát triển thuốc ức chế diseases. Nevetheless, direct extractions of IL-33 fromcytokin này. Mục đích: tạo được IL-33 người tái tổ human tissues often resulted in limited amount of thishợp dạng dung hợp với tag SUMO trên Escherichia cytokine, which may hinder the drug discoverycoli. Phương pháp: gen mã hoá cho IL-33 người process. Objectives: This study aims to expressđược tối ưu hóa codon cho biểu hiện trên E. coli bằng recombinant human IL-33 fused with SUMO inphần mềm OptimumGeneTM Optimization Analysis của Escherichia coli. Methods: codons from human il33công ty GeneScript. Plasmid pET-SUMO-il33 được biến gene was optimized for the expression in E. coli usingnạp vào E. coli BL21(DE3) bằng phương pháp sốc OptimumGeneTM Optimization Analysis (GeneScript).nhiệt. Kết quả: Plasmid tái tổ hợp chứa gen il33 được The recombinant plasmid pET-SUMO-il33 wasthiết kế gắn tag gồm 8×His và SUMO tag ở đầu N tận transformed into chemically compentent E. coli BL21với gen il33 được tối ưu hoá codon cho biểu hiện ...