Tạo dòng và biểu hiện protein koja dung hợp với SUMO trên Escherichia coli

Bài viết Tạo dòng và biểu hiện protein koja dung hợp với SUMO trên Escherichia coli nghiên cứu dự đoán độ tan của KojA trước đây cho thấy đây là một protein khó tan do đó nhóm nghiên cứu đã thiết kế vector biểu hiện gen kojA có gắn His-SUMO tag và sử dụng tối ưu hóa codon cho biểu hiện trên E. coli.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tạo dòng và biểu hiện protein koja dung hợp với SUMO trên Escherichia coli TẠP CHÍ Y häc viÖt nam tẬP 526 - th¸ng 5 - sè 2 - 2023 phòng phẫu thuật – Kháng sinh trị liệu trong thực 7. Nguyễn Quốc Anh (2008). Nghiên cứu một số hành lâm sàng, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội, tr. yếu tố nguy cơ nhiễm khuẩn vết mổ tại bệnh viện 330-341. Bạch Mai, Luận án tiến sỹ Y học, Hà Nội, tr. 40-56.6. CDC Guideline (1999). Guideline for Prevention 8. WHO (2012). The evolving threat of of Surgical Site Infection, American Journal of antimicrobial resistance: Options for action. WHO Infection Control, 27(2), pg. 247-260. Press, Geneva. TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN PROTEIN KOJA DUNG HỢP VỚI SUMO TRÊN ESCHERICHIA COLI Nguyễn Quốc Thái1, Dương Mai Hồng1, Vũ Thanh Thảo1, Trương Phương1TÓM TẮT the expression of KojA protein with SUMO tag. KojA as inclusion bodies was dissolved and purified by IMAC. 90 Đặt vấn đề: Acid kojic là một tác nhân làm trắng Results: The transformed bacteria can express KojAda được sử dụng phổ biến trong mỹ phẩm. Acid kojic with high yield, nevertheless as inclusion bodies (TBđược sản xuất bằng phương pháp lên men từ nấm, medium, 0.1 mM IPTG at 25°C). Inclusion bodiesquá trình này tốn nhiều thời gian và giá sản phẩm tạo could be dissolved in buffer containing 6 M urea, pHra khá cao. Nghiên cứu gần đây trên Aspergillus 12 at 25°C and purified by IMAC with the final yield oforyzae đã chỉ ra sản phẩm mã hoá từ gen kojA có liên 37 mg/L culture. Conclusions: In this study, we havequan đến phản ứng tổng hợp acid kojic từ glucose. successfully transformed E. coli BL21(DE3) with theMục đích: tạo được protein KojA tái tổ hợp dạng recombinant plasmid pET-SUMO-kojA. The bacteriadung hợp với SUMO trên Escherichia coli. Phương expressed KojA with high amount in inclusion bodies.pháp: Tạo dòng chủng E. coli BL21(DE3) mang The insoluble protein could be completely dissolvedplasmid tái tổ hợp pET-SUMO-kojA có khả năng biểu and the pure protein obtained by 1-step purificationhiện protein KojA ở dạng dung hợp với SUMO. Hòa tan using Ni-Sepharose column.thể vùi KojA và tinh chế thu nhận KojA bằng IMAC. Keywords: kojic acid, kojA gene, pET-SUMO,Kết quả: Chủng E. coli BL21(DE3) mang plasmid tái recombinant proteintổ hợp pET-SUMO-kojA có khả năng tạo KojA với hiệusuất cao ở dạng thể vùi (môi trường TB, thêm 0,1 mM I. ĐẶT VẤN ĐỀIPTG ở 25°C). Thể vùi có khả năng hòa tan trongdung dịch urê 6 M, pH 12 ở 25°C và được tinh chế Cùng với sự phát triển của xã hội, nhu cầubằng IMAC với hiệu suất 37 mg/L dịch nuôi cấy. Kết về làm đẹp ngày càng được quan tâm, đặc biệtluận: Nghiên cứu đã tạo dòng thành công chủng E. là các sản phẩm làm đẹp và trắng da. Trong cáccoli BL21(DE3) mang plasmid tái tổ hợp pET-SUMO- thành phần làm trắng da có nguồn gốc tự nhiên,kojA có khả năng tạo KojA với hiệu suất cao ở dạng không thể không kể đến acid kojic—một chấtthể vùi. Tinh chế protein KojA thành công bằng cột chuyển hóa thứ cấp, sinh ra bởi các loài nấmsắc ký ái lực trên cột Ni Sepharose. Từ khoá: acid kojic, gen kojA, pET-SUMO, thuộc chi Aspergillus. Tác dụng làm trắng da củaprotein tái tổ hợp acid kojic là do ức chế tyrosinase, một enzym then chốt trong quá trình hình thành sắc tố daSUMMARY melanin. Hiện nay acid kojic chủ yếu được tổng EXPRESSION OF PROTEIN KOJA FUSED hợp bằng phương pháp lên men với chủng nấm WITH SUMO IN ESCHER ...