Thăm dò cơ chế hạ Glucose huyết của phân đoạn N-Hexan rễ cây Chóc máu nam trên tế bào cơ vân C2C12

Mục tiêu nghiên cứu của đề tài là thăm dò khả năng gây độc tế bào CaC13 của PĐ; đánh giá tác dụng tăng thu nhận glucose trên tế bào cơ vân CaCl2 của PE; đánh giá tác dụng hoạt hóa AMPK của các chất chiết tách được từ PĐ. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Thăm dò cơ chế hạ Glucose huyết của phân đoạn N-Hexan rễ cây Chóc máu nam trên tế bào cơ vân C2C12 TH M DÒ C ơ CHÉ HẠ GLUCOSE HUYẾT CỦA PHÂN ĐOẠN N-HEXAN RẺ CÂY CHÓC MÁU NAM TRÊN TẾ BÀO c ơ VÂN C2C12 ThS. Trần T h ị T hùy L ỉn h *; ThS. N guyễn Thu Hằng* H ư ớn g dẫn: TS. Trần Thị O anh**TÓM TẮT Đái tháo đường là rối loạn chuyển hóa dẫn đến tăng glucose huyết, nhiều biến chứng và được xem là vấn đề cấpbách của thời đại. Ở Việt Nam, cắn dịch chiết phân đoạn nhexan rễ Salacia cochinchin nsìs Lour, (đặt tến là PĐ) đãbước đầu được nghiên cứu và chứng minh tác đụng hạ glucose huyếí trên động vật thí nghiệm và trên một số đích tácdụng cùa thuốc điều trị ĐTĐ đồng thời cũng đã chiết tách và xác định được cấu trúc của 3 chất có trong pliân đoạn nhexan là friedelan~3Pol (SCC1); Psiíosterol (SCC2) và 21a,30~dihyđroxyfrjedelan3on (SCC3). Mục tiêu nghiên cứu: Thăm dò khả năng gây độc tế bào C2C 12 của PĐ; Đánh giá tác dụng tãng thu nhận glucosetrên íể bào cơ vân C2C 12của PĐ; Đánh giá tác dụng hoạt hóa AMPK của các chất chiết tách được từ PĐ. Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu: Tê bào C2C 2 được ủ với mẫu thử PĐ ở các nồng độ 20,00 50,00 125,00 250,00 (ig/ml trong 48 giờ, xác địnhkhả năng gây chết té bào C2Cí2 cùa PĐ so với lô chứng bằng kỹ thuật định lượng MTT. Đánh giá ảnh hưởng của PĐ ờhai nồng độ 20,00 |Jg/ml và 50,00 |ig/ml đến khả nãng thu nhận glucose vào tế bào bằng cách ủ tế bào và PĐ trong môitrường ủ chứa sẵn 8,0 M glucose, định lượng glucose còn iại trong môi trường bằng phương pháp glucose oxiđase. ủ tếbào vởi SCC1, SCC2 và SCC3 ở hai nồng độ 20,00 |jg/mL và 50,00 |ig/ml, đùng kỹ thuạt lai Western (Western blot)đánh giá khả năng làm tăng mức độ biểu hiện của pAMPK ờ các lô thử so với lô chứng. Kết quả: PĐ ờ nồng độ 125 Mg/ml và 250 Mg/ml gây chết 21,82% và 28,74% íé bào C2C12. PĐ 20,00 Mg/mỉ và 50,00 ng/mlkhông gây chẹt tế bào C2C12, làm tãng thu nhận glucose vào tế bào C2C12 khi không có mặt insulin trong môitrường nuôi cây và không làm tăng thu nhận glucose vào tể bào C2C I2 khi có mặt insulin trong môi trường. Trong 3chất chiết tách từ PĐ chỉ có psitosterol (50,00 ug/ml) có tác dụng hoạt hóa AMPK, friedelan3pol và 21a,30dihydroxyfriedelan3on không có tácdụng này. Kết luận: Kết quả nghiên cứu cho thấy PĐ có thể ảnh hưởng đến khả năng thu nhận glucose vào tế bào cơ vân chủ yếu theo cơchê không phụ thuộc insulin hoặc PĐ có những tác đụng kiểu insulin. Kê£ quả thu được về tác dụng hoạt hóa AMPKcửa các chât hóa học chiết tách được từ PĐ phù hợp với kết quả của các nghiên cứu khác đã được tiến hàiih. Đây sẽ lànhững cơ sở ban đầu của việc đua Chóc máu Nam vào làm thuốc trong điều trị đái tháo đường. * Từ khóa: Rễ cây Chóc máu cam; Hạ glucose huyết; Tế bào vân cơ. Probing the hypoglycemic m echanism o f n-hexane segm ent o f salacm cochinchinensislour, roots xtra c t in C 2C i 2 m u sc l c llsSum m ary Diabetes is a metabolic disorder leading to hyperglycemia and complications. In Vietna, nhexane segment ofSalaciacochinchin nsisLour, roots extract (named PĐ) is studied demonstrating hypoglycaemic effect in rats and onsomq targets of antidiabetic drugs. Do Thi Nguyet Que et al extracted and determined the structures of 3 substancesfrom this segment. They are friedelan3pol (SCC1); psitostero] (SCC2) and 21a,30đihyđroxyfrieđe an3on (SCC3). Objective: Probe the C2C 2 cytotoxicity of PĐ; Evaluate the increasing glucose uptake effect in C2C12 of PĐEvaluate the AMPK activation effect of substances those are extracted from PĐ.* Dại học Dựợc Hà Nội** Cọc Khoa học Công nghệ và Đào tạo 469 Material and methods: C2C 12 muscle cells were incubated with PĐ at various concentrations (20.00 50.00 125.00 250.00 ịig/mL) in 48h,cytotoxicity of PĐ was determined by MTT assay. Effect of PĐ at concentrations of 20.00 |ig/mL and 50.00 (ig/mL onglucose uptaking of CzCiz was determined by incubating the cells with PĐ in environment containing 8,0M glucose,then quantify the amount of glucose remaining in the medium by using glucose oxidase. Incubate the cells with SCC1;SCC2 or SCC3 at concentrations of 20.00 fig/mL and 50.00 fig/mL, evaluate ứie AMPK activation effect of substancesby Western blot method. Results: PĐ at concentrations of 125.00 |ig/mL and 250.00 jig/mL caused 21.82% and 28.74% C2C 12 death, respectively. Theamount of death cells in the lots that incubated with PĐ at concentrations of 20.00 fig/mL and 50.00 jig/mL were notdifferent from stock lot. PĐ at concentrations of 20.00 Mg/mL and 50.0Ố|ig/mL increased the glucose uptaking of C2C 12with insulin absence in medium. In three substances, only SCC2 at concentration of 50,00 |ig/mL effec ...