THỰC HÀNH PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨM

(NB) Coliforms là những trực khuẩn gram âm không sinh bào tử,hiếu khí hoặc kỵ khí tùy ý, có khả năng lên men lactose sinh acid vàsinh hơi ở 370C trong 24 – 48 giờ. Coliforms được xem là nhóm visinh vật chỉ thị: số lượng hiện diện của chúng trong thực phẩm, nướchay các loại mẫu môi trường được dùng để chỉ thị khả năng hiệndiện của các loại vi sinh vật khác.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
THỰC HÀNH PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨMTrường Đại học Công nghiệp thực phẩm TP.HCM 2010THỰC HÀNH PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨM ThS. Lê Thùy Linh 0 Lưu hành nội bộ Trường Đại học Công nghiệp thực phẩm TP.HCMNỘI DUNG TrangBài 1: Định lượng Coliforms và E. coli 2 1.1. Tóm tắt kiến thức cơ bản 2 1.2. Quy trình định lượng Coliforms và E. coli bằng phương pháp MPN 3 1.3. Cách tiến hành thí nghiệm 4 1.4. Cách tính kết quả 10Bài 2. Định lượng Staphylococcus aureus 10 2.1. Tóm tắt kiến thức cơ bản 10 2.2. Quy trình định lượng Staphylococcus aureus bằng phương pháp MPN 10 2.3. Cách tiến hành và cách tính kết quả 11Bài 3. Định tính Salmonella 14 3.1. Tóm tắt kiến thức cơ bản 14 3.2. Qui trình định tính Salmonella trong thực phẩm 14Bài 4. Định lượng Bacillus cereus 20 4.1. Tóm tắt kiến thức cơ bản 20 4.2. Quy trình định lượng Bacillus cereus bằng phương pháp đếm khuẩn lạc 20Bài 5. Định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí và tổng nấm men-nấm mốc 24 5.1. Tóm tắt kiến thức cơ bản 24 5.2. Quy trình phân tích 26Tài liệu tham khảo 1. Trần Linh Thước, Phương pháp phân tích vi sinh vật trong nước, thực phẩm và mĩ phẩm, NXB Giáo dục, 2006 2. http://www.microbelibrary.org 3. http://www.chromagar.com 4. http://www.rapidmicrobiology.com 5. http://www.marietta.eduBiên soạn: Lê Thùy Linh Page | 1Homepage: http://lethuylinh.weebly.com Trường Đại học Công nghiệp thực phẩm TP.HCM Bài 1: Định lượng Coliforms và E. coli1.1 Tóm tắt kiến thức cơ bản Hình 1: phát hiện Coliforms và E. coli trong thực phẩm hay nước bằng1.1.1 Định nghĩa môi trường CHROMagar ECC Coliforms là những trực khuẩn gram âm không sinh bào tử,hiếu khí hoặc kỵ khí tùy ý, có khả năng lên men lactose sinh acid vàsinh hơi ở 370C trong 24 – 48 giờ. Coliforms được xem là nhóm visinh vật chỉ thị: số lượng hiện diện của chúng trong thực phẩm, nướchay các loại mẫu môi trường được dùng để chỉ thị khả năng hiệndiện của các loại vi sinh vật khác. Nhóm Coliforms gồm 4 giống là:E. coli, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter. Tính chất sinh hóađặc trưng của nhóm này được thể hiện qua các thử nghiệm Indol (I),Methyl Red (MR), Voges-Proskauer (VP) và Citrate (iC) thường được gọi là IMViC. Coliforms chịu nhiệt là những Coliforms có khả năng lên men lactose sinh hơitrong khoảng 24h khi ủ ở 440C trong môi trường canh EC. Coliforms phân (Faecal Coliforms) là Coliforms chịu nhiệt có khả năng sinhindole khi ủ khoảng 24h ở 440C trong canh Trypton. E. coli là Coliforms phân cho kếtquả thử nghiệm IMViC là ++-- (Indol +, Methyl Red +, Voges-Proskauer -, Citrate -)1.1.2 Phương pháp Most Probable Number (MPN) Đây là phương pháp định lượng dựa trên kết quả định tính của một loạt thí nghiệmđược lặp lại ở một số độ pha loãng khác nhau. Thông thường, việc định lượng này đượcthực hiện lặp lại 3 lần ở 3 độ pha loãng bậc 10 liên tiếp, tổng cộng 3 x 3 = 9 ống nghiệm. Quy trình thực hiện như sau: Pha loãng mẫu phân tích ở 3 nồng độ pha loãng bậc 10 liên tiếp. Ủ ở nhiệt độ và thời gian thích hợp Kết quả biểu kiến chứng minh sự tăng trưởng của vi sinh vật cần kiểm định Ghi nhận số lượng ống nghiệm dương tính ở từng độ pha loãng. Tra bảng Mac Crady Mật độ vi sinh vật MPN/100 ml hay MPN/1g mẫuBiên soạn: Lê Thùy Linh Page | 2Homepage: http://lethuylinh.weebly.com Trường Đại học Công nghiệp thực phẩm TP.HCMChú ý: Đa số các bảng MPN cung cấp số liệu ở dạng số MPN trong 100ml dung dịchđược sử dụng để phân tích ở c ...