Tiềm năng ứng dụng của tế bào gốc tủy răng người

Nghiên cứu này tiến hành thu nhận và khử trùng mô tủy răng người. Sau đó, tế bào tủy răng được phân lập và nuôi cấy, sự hiện diện của quần thể tế bào gốc trong hỗn hợp tế bào sau nuôi cấy được xác định bằng phương pháp khảo sát sự tăng sinh và kỹ thuật flow cytometry. Mời các bạn cùng tim hiểu tiềm năng ứng dụng của tế bào gốc tủy răng người.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tiềm năng ứng dụng của tế bào gốc tủy răng ngườiNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Số 1 * 2012TIỀM NĂNG ỨNG DỤNG CỦA TẾ BÀO GỐC TỦY RĂNG NGƯỜITrần Lê Bảo Hà*, Đoàn Nguyên Vũ*, Tô Minh Quân*, Nguyễn Thị Nhật Uyên*, Lê Thị NgọcHương*, Nguyễn Thị Ngọc Mỹ*, Phan Kim Ngọc*, Nguyễn Thị Thư**, Đặng Vũ Ngọc Mai**,Hoàng Đạo Bảo Trâm**, Hoàng Tử Hùng**TÓM TẮTMở đầu: Gần đây, các nhà khoa học đã phát hiện tủy răng là mô có chứa tế bào gốc. Tế bào gốc tủyrăng là một nguồn tế bào dễ thu nhận vì không xâm lấn, có tiềm năng tăng sinh và biệt hóa cao, có thể đượclưu trữ trong nhiều năm, tương tác tốt với nhiều loại vật liệu sinh học.Đối tượng và phương pháp: Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tiến hành thu nhận và khử trùngmô tủy răng người. Sau đó, tế bào tủy răng được phân lập và nuôi cấy. Sự hiện diện của quần thể tế bàogốc trong hỗn hợp tế bào sau nuôi cấy được xác định bằng phương pháp khảo sát sự tăng sinh và kỹ thuậtFlow cytometry. Đồng thời, ngà răng cũng được sử dụng làm khung nâng đỡ cho tế bào gốc tủy răng.Kết quả: Kết quả cho thấy, chúng tôi đã thu nhận và nuôi cấy thành công tế bào gốc tủy răng người.Quần thể tế bào sau nuôi cấy biểu hiện các marker là CD13, CD44, CD90, CD105, CD166. Tế bào gốc tủyrăng có khả năng tăng sinh trên bề mặt ngà đã xử lí bằng hóa chất.Kết luận: Với những kết quả đã đạt được, tế bào gốc tủy răng hứa hẹn sẽ là nguyên liệu quan trọngcho những nghiên cứu trong kỹ nghệ mô cũng như trong lĩnh vực nha khoa tái tạo.Từ khóa: Bề mặt ngà, nuôi cấy sơ cấp, flow cytometry, tế bào gốc, tủy răng người.ABSTRACTAPPLIED POTENTIAL OF HUMAN DENTAL PULP STEM CELLSTran Le Bao Ha, Doan Nguyen Vu, To Minh Quan, Nguyen Thi Nhat Uyen, Le Thi Ngoc Huong,Nguyen Thi Ngoc My, Phan Kim Ngoc, Nguyen Thi Thu, Dang Vu Ngoc Mai,Hoang Dao Bao Tram, Hoang Tu Hung * Y hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 16 – No.1 – 2012: 10 - 17Background: Recently, scientists have found that dental pulp tissue contains stem cells. Dental pulpstem cells as a source of cells are easy to obtain for non-invasive, has the highly potential to grow anddifferentiate, can be stored for many years, interact well with many types of biomaterials.Materials and method: In this research, we performed the experiments to collect and disinfect humandental pulp tissue. Then, dental pulp cells are isolated and cultured. The presence of stem cell populationsin cultured cells is determined by proliferation assay and Flow cytometry. Simultaneously, dentin wasused as a scaffold for the dental pulp stem cells.Results: Results shown that we are successful in collection and culture of human dental pulp stemcells. Populations of cultured cells are positive for expression of CD13, CD44, CD90, CD105, CD166markers. Dental pulp stem cells can proliferate on chemically treated dentin surface.Conclusion: With the results achieved, dental pulp stem cells promises to be an important material forresearch in tissue engineering as well as in dental regeneration.Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia-thành phố Hồ Chí MinhĐại học Y Dược, thành phố Hồ Chí MinhTác giả liên lạc: TS.Trần Lê Bảo Hà ĐT: 0988575507Email: tlbha@hcmus.edu.vn***10Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Số 1 * 2012Nghiên cứu Y họcKeywords: dentin surface, primary culture, flow cytometry, stem cells, human dental pulp.DMEM/F12 (Sigma) bổ sung 10% FBS (huyếtMỞ ĐẦUthanh thai bò-Gibco), 2mM L-glutamin,Trên thế giới, tế bào gốc tủy răng đã được100U/ml penicillin, 100µg/ml streptomycin.nuôi cấy thành công chỉ trong vài năm gầnXác định tính gốc của tế bào tủy răngđây và có khả năng ứng dụng rất cao. Đếnngườinay, đã có rất nhiều nghiên cứu về việc phânlập tế bào tủy răng của nhiều loài khác nhau.Đánh giá sự tăng sinh của tế bào trên bề mặtCác nghiên cứu này đã chứng minh tế bào gốcchai nuôi cấytủy răng có khả năng tăng sinh cao và biệtCác tế bào được cấy chuyền sang đĩa 96hóa thành dạng tế bào khoáng hóa trong môigiếng với mật độ 104 tế bào/cm2. Mật độ tế bàotrường thích hợp (Nakashima, 1991;được xác định mỗi ngày bằng buồng đếm tếNakashima et al., 1994; Kettunen et al., 1998;bào cùng với thuốc nhuộm trypan blue.Buchaille et al., 2000; Yokose et al., 2000). CácPhương pháp Flow cytometrytế bào tủy răng được xác định là có biểu hiệnCác tế bào ở lần cấy chuyền thứ tư đượcmột số marker của tế bào gốc như STRO-1thu nhận bằng trypsin/EDTA 0,25%, điều(Shi, Gronthos, 2003; Shi et al., 2005), CD146chỉnh mật độ tế bào đạt 106 tế bào/ml. Huyền(Gronthos et al., 2003; Miura et al., 2004) vàphù tế bào trong 1ml Facs Flow và nhuộm vớiOct4 (Huang et al., 2006). Bên cạnh những10µl kháng thể trong 30 phút ở nhiệt độnghiên cứu phân lập và nuôi cấy tế bào gốcphòng (CD13-PE, CD44-PE, CD90-FITC,tủy răng, các khung nâng đỡ ba chiều nhưCD105-PE, CD166-PE, CD34-FITC, CD45-FITC,alginate, collagen, polymer, sứ… cũng đượcBD Sciences, San Jose, CA). Làm lạnh mẫuphát triển nhằm ứng dụng trong nha khoa t ...