Tiểu luận: Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa

Năm 1996 xuất hiện một bệnh truyền nhiễm mới trên heo với tác nhân gây bệnh chuyên biệt (specific-pathogen-free) được phát hiện và thông báo tại miền tây Canada. PMWS (Post - Weaning Multisystemic Wasting Syndrome) đã trở thành một vấn đề nhận được nhiều sự quan tâm trên thế giới trong những năm qua, đặc biệt là tại Canada, Mỹ, Châu Âu và Viễn Đông.   Phân bố PMWS trên thế giới   Căn bệnh xảy ra được biểu thị rõ ràng như tên gọi của nó. Đó là triệu chứng còi cọc ở heo cai sữa ở 5-6 tuần tuổi đến...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tiểu luận: Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa   Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa    Đại Học Nông Lâm TP.HCM Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học Bài tiểu luận: GVHD: TS. Nguyễn Ngọc Hải SV: Nguyễn Thị Kim Ngân MSSV: 06126088 10-2009 Chuẩn đoán bệnh  Page 1    Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa    I. Đặt vấn đề: Năm 1996 xuất hiện một bệnh truyền nhiễm mới trên heo với tác nhân gây bệnh chuyên biệt (specific-pathogen-free) được phát hiện và thông báo tại miền tây Canada. PMWS (Post - Weaning Multisystemic Wasting Syndrome) đã trở thành một vấn đề nhận được nhiều sự quan tâm trên thế giới trong những năm qua, đặc biệt là tại Canada, Mỹ, Châu Âu và Viễn Đông.     Phân bố PMWS trên thế giới Căn bệnh xảy ra được biểu thị rõ ràng như tên gọi của nó. Đó là triệu chứng còi cọc ở heo cai sữa ở 5-6 tuần tuổi đến khoảng 12 tuần tuổi và hiện nay được xem như một bệnh hàng đầu. Chuẩn đoán bệnh  Page 2    Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa    Mặc dù căn bệnh diễn biến chậm nhưng tăng dần lên với mức độ nguy hại cao. Sau khi đàn heo nhiễm bệnh thì tỷ lệ chết có khi lên đến 90%. Hội chứng suy nhược, còi cọc trên heo sau cai sữa xảy ra với tỷ lệ chết cao và thiệt hại nặng nề về kinh tế cho nhà chăn nuôi. Mặt khác, khi đàn heo bị nhiễm thì tất cả các biện pháp điều trị đều không có kết quả. Hiện nay, vấn đề cấp thiết là làm sao để đàn gia súc và gia cầm của chúng ta không bị nhiễm trong khi vaccin phòng bệnh vẫn đang được các nhà khoa học nghiên cứu và chưa có kết quả. Có nhiều phương pháp chuẩn đoán bệnh hiệu quả như PCR, hóa mô miễn dịch, in situ hybridization, nuôi cấy tế bào, chuẩn đoán huyết thanh học…. trong bài tiểu luận này giới thiệu về phương pháp ELISA để xét nghiệm kháng thể kháng PCV2, phục vụ cho các nghiên cứu điều tra dịch tễ và đáp ứng miễn dịch của PCV2. II. Tổng quan: 1. Khái niệm: PMWS là một bệnh truyền nhiễm do virus (porcine virus type 2 thuộc họ Circoviridae) gây ra trên heo cai sữa với biểu hiện đặc trưng là sự sụt giảm cân rất nhanh, kèm theo các biểu hiện hô hấp và da nhợt nhạt. Heo bệnh thường hạch hẹn bị sưng to và có thể sử dụng làm dấu hiệu nghi ngờ trong chuẩn đoán PMWS. Bệnh gây chết chủ yếu ở heo lứa tuổi từ 5-12 tuần tuổi. PMWS hiện tại đang hiện diện ở nhiều quốc gia và là một trong những nguyên nhân quan trọng gây tổn thất treo heo. 2. Tác nhân gây bệnh: − Virus PMWS là một DNA mạch vòng, sợ đơn bao gồm 1759 bases, kích thước 17 nm, thuộc họ Circoviridae, giống Circovirus thường được gọi là porcine circovirus (PVC). Gồm có 2 serotype được tìm thấy ở heo, bao gồm type 1 (PVC1) và type 2 (PVC2). PVC1 và PVC2 với bộ nhiễm sắc thể tương đồng khoảng 68-76%, trong đó ORF1 tương đồng khoảng 83% về trình tự nucleotide và 86% acid amin, ORF2 chỉ tương đồng khoảng 67% về trình tự nucleotide và 65% acid amin. − Bộ gen của PVC gồm có sáu khung đọc mở (open reading frames-ORFs). ORF aa 1 51-992 2 671-360 3 565-389 4 553-729 5 1016-1174 6 1735-1037 Chuẩn đoán bệnh  Page 3    Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa    − ORF1 mã hóa cho protein tham gia vào quá trình nhân lên của virus và ORF2 mã hóa cho protein cấu trúc của virus. Chuẩn đoán bệnh  Page 4    Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa    − Là loại virus nhỏ nhất được biết đến và có khả năng sống sót cao trong môi trường. − PCV có khả năng đề kháng với môi trường acid (pH=3), chloroform hay nhiệt độ cao 56-70oC (virus chịu được 70oC trong 15 phút). − PCV tồn tại lâu dài trong sản phẩm thịt heo, quần áo và những vật liệu tiếp xúc với heo bị nhiễm virus này. − PCV1 được xem như là virus nhiễm thường xuyên và tự nhiên trên các tế bào thận heo PK15 và là virus không gây bệnh. Ngược lại PCV2 được xem là tác nhân gây PMWS. a. Circovirus type 1 (PVC-1): − Năm 1974, các nhà khoa học đã phân lập được Circovirus type 1 từ tế bào thận heo PK15. − Hiện nay, chúng không gây bệnh cho heo. b. Circovirus type 2 (PVC-2): porcine circovirus type 2 − Được ghi nhận đầu tiên vào 1991 tại Tây Canada, phát hiện ở vết thương Chuẩn đoán bệnh  Page 5    Chuẩn đoán PMWS bằng Elisa    − Bao gồm nhiều chủng khác nhau (kiểu sinh học và kiểu gen). Kháng thể trên PVC-2 đã được phát hiện ở huyết thanh heo nuôi tại Bỉ năm 1985. − Từ những kinh nghiệm nghiên cứu ban đầu cho thấy, khi gây nhiễm virus type ...