Tính đa hình A4889G của gen CYP1A1 trên bệnh nhân ung thư phổi

Đa hình A4889G trên gen CYP1A1 được chỉ ra là yếu tố nguy cơ cao gây ung thư phổi trên người Châu Á. Nghiên cứu được thực hiện nhằm xác định tính đa hình A4889G của gen CYP1A1 ở nhóm bệnh nhânung thư phổi so với nhóm đối chứng. 220 mẫu bệnh nhân ung thư phổi và 200 người không mắc bệnh ung thư được lựa chọn vào nghiên cứu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tính đa hình A4889G của gen CYP1A1 trên bệnh nhân ung thư phổiTẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌCTÍNH ĐA HÌNH A4889G CỦA GEN CYP1A1TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ PHỔILê Hồng Công, Trần Huy Thịnh, Tạ Thành VănTrường Đại học Y Hà NộiĐa hình A4889G trên gen CYP1A1 được chỉ ra là yếu tố nguy cơ cao gây ung thư phổi trên người ChâuÁ. Nghiên cứu được thực hiện nhằm xác định tính đa hình A4889G của gen CYP1A1 ở nhóm bệnh nhânung thư phổi so với nhóm đối chứng. 220 mẫu bệnh nhân ung thư phổi và 200 người không mắc bệnh ungthư được lựa chọn vào nghiên cứu. Kỹ thuật PCR - RFLP (PCR - Restriction fragment length polymorphism)được lựa chọn để xác định tính đa hình A4889G. Kết quả cho thấy, tần số alen A và G ở nhóm bệnh nhânung thư phổi chưa có sự khác biệt so với tần số alen A và G của nhóm đối chứng với p > 0,05. Tuy nhiên,kết quả cho thấy rõ mối liên hệ giữa kiểu gen AG, GG so với kiểu gen AA với yếu tố nguy cơ là hút thuốc lávà có ý nghĩa thống kê với tỷ suất chênh OR = 2,208; 95% CI = 1,127 - 4,326 p < 0,02. Bước đầu thấy đượcsự tương quan giữa đa hình thái A4889G của gen CYP1A1 ở bệnh nhân ung thư phổi với yếu tố nguy cơ hútthuốc lá ở người Việt Nam.Từ khóa: Ung thư phổi, đa hình A4889G, gen CYP1A1I. ĐẶT VẤN ĐỀUng thư phổi là loại ung thư thường gặpnghề nghiệp và các đột biến gen di truyền quanhững thế hệ khác nhau.nhất và là nguyên nhân gây tử vong hàng đầuCytochrome P450 (CYPs) là một liên họở nhiều nước trên Thế giới [1]. Hút thuốc lálớn chứa các hemoprotein xúc tác rất nhiềuđược cho là nguyên nhân chính gây ung thưphản ứng enzym khác nhau để chuyển hóaphổi, 85 - 90% bệnh nhân ung thư phổi là docác chất nội sinh và ngoại sinh. Trong hệhút thuốc lá. Tuy nhiên chỉ dưới 20% số ngườithống cytochrome P450, cytochrome P450hút thuốc lá bị ung thư phổi, điều này cho thấy1A1 (CYP1A1) là enzym chính hoạt hóa cáccác yếu tố khác bao gồm các biến thể dichất và là chìa khóa để kích hoạt quá trìnhtruyền đóng một vai trò quan trọng trong cơtrao đổi chất giữa các hydrocarbons có nhânchế gây bệnh ung thư phổi [2]. Sự phát sinh,thơm, các amin dị vòng dẫn đến hình thànhphát triển bệnh ung thư phổi diễn ra qua nhiềucác phân tử DNA bất thường từ đó khởi đầugiai đoạn dưới tác động của các yếu tố nguycho quá trình ung thư [3]. Kết quả của cáccơ, sự mẫn cảm của gen và quá trình tích lũynghiên mới được công bố gần đây cho thấyđột biến xảy ra trên các gen gây ung thư. Cáccó mối liên quan chặt chẽ giữa ung thư phổiyếu tố nguy cơ bao gồm hút thuốc lá, nhiễmvới đa hình gen CYP1A1; trong đó, đa hìnhvirus human papillomavirus (HPV), môi trường,A4889G của gen CYP1A1 được chỉ ra là yếutố nguy cơ cao gây bệnh ung thư phổi trêncác đối tượng người Châu Á [4 - 7].Địa chỉ liên hệ: Trần Huy Thịnh, Bộ môn Hóa sinh, TrườngĐại học Y Hà NộiĐể góp phần hiểu rõ hơn về mối liên quanEmail: tranhuythinh@hmu.edu.vngiữa đa hình A4889G của gen CYP1A1 vớiNgày nhận: 15/12/2016nguy cơ ung thư phổi, nghiên cứu được thựcNgày được chấp thuận: 26/2/2017hiện nhằm:48TCNCYH 106 (1) - 2017TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC1. Xác định tính đa hình A4889G của genCYP1A1 ở bệnh nhân ung thư phổi và ngườibình thường.2. Đánh giá mối tương quan giữa tính đahình A4889G của gen CYP1A1 ở bệnh nhânung thư phổi và người bình thường.II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP+ Thành phần phản ứng PCR (thể tích10,2μl) gồm: 4,7 μl Taq polymerase; 0,3μl mồixuôi; 0,3μl mồi ngược; 1,2μl DNA và 3,7μlH2O.+ Chu trình nhiệt của phản ứng PCR:o94 C/5 phút, 35 chu kỳ [94oC/40 giây, 54oC/30giây, 72oC/45 giây], 72oC/7 phút. Bảo quảnmẫu ở 15oC. Sản phẩm PCR được điện ditrên gel agarose 1,5%, với điện thế 95V, trong1. Đối tượng25 phút.Nhóm bệnh lý: gồm 220 bệnh nhân ungthư phổi được điều trị ở Bệnh viện Bạch MaiXác định đa hình A4889G của genCYP1A1 bằng kỹ thuật cắt enzym giới hạn:trong đó có 165 nam và 55 nữ với tuổi trung+ Thành phần phản ứng: 5μl H20; 1,5μlbình 60 ± 9,1. Bệnh nhân ung thư phổi đượcBuffer 10x; 0,5μl enzym MspI, 8μl sản phẩmthăm khám lâm sàng, làm các xét nghiệm cậnPCR. Phản ứng cắt được ủ ở nhiệt độ 37oclâm sàng và làm xét nghiệm giải phẫu bệnh đểqua đêm, sau đó điện di trên gel agarosechẩn đoán xác định ung thư phổi.2,5% với điện thế 80V, trong 90 phút và chụpNhóm chứng: 200 người trong chươngảnh bằng hệ thống máy EC3 Imaging system.trình quản lý tăng huyết áp và đái tháo đường,Khi enzym MspI cắt đoạn gen sẽ tạo ra cácgồm 129 nam và 71 nữ, tuổi trung bình 66 ±đoạn DNA có kích thước 204 bp (kiểu gen9,4. Được kiểm tra định kỳ bằng X-quang đểGG); 149 bp và 55 bp (kiểu gen AA); 204bp,loại trừ ung thư phổi.149 bp và 55 bp (kiểu gen AG).Bệnh nhân ung thư phổi và nhóm chứngđược lấy 2ml máu chống đông trong EDTA.2. Phương pháp- Phân tích số liệuSử dụng phần mềm thống kê SPSS 16.0để phân tích số liệu. Dùng kiểm định χ2 để sosánh tỷ lệ kiểu gen của hai nhóm ung thư vàTách chiết DNADNA tổng số được tách ...