Tối ưu quá trình nuôi cấy thu sinh khối Lactobacillus Casei trên môi trường MRS cải biên

Trong nghiên cứu này, quá trình nuôi cấy Lactobacillus Casei được tối ưu trên môi trường MRS, với glucose được thay thế bằng dịch chiết dứa như một nguồn cung cấp cacbon đồng thời bổ sung các vitamin, muối khoáng cần thiết cho vi sinh vật phát triển để thu nhận sinh khối và loại bỏ đi các thành phần cũng như yếu tố không ảnh hưởng nhiều đến lượng sinh hối để tiết kiệm hóa chất, thời gian.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tối ưu quá trình nuôi cấy thu sinh khối Lactobacillus Casei trên môi trường MRS cải biênJournal of Thu Dau Mot University, No 5 (24) – 2015 TỐI ƯU QUÁ TRÌNH NUÔI CẤY THU SINH KHỐI LACTOBACILLUS CASEI TRÊN MÔI TRƯỜNG MRS CẢI BIÊN Đào Thị Mỹ Linh – Nguyễn Hải Nam – Nguyễn Thị Quỳnh Mai Trường Đại học Công nghiệp thực phẩm TP.HCM TÓM TẮT Lactobacillus casei là lợi khuẩn được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực, vì vậy nhu cầu sửdụng sinh khối của vi khuẩn này là rất lớn. Trong nghiên cứu này, quá trình nuôi cấy thu sinhkhối Lactobacillus casei trên môi trường MRS cải biên được tối ưu bằng phương pháp quyhoạch thực nghiệm. Thành phần glucose trong môi trường MRS được thay thế bằng dịchchiết dứa như một nguồn cung cấp cacbon cùng với một số vitamin và khoáng chất cần thiếtcho vi khuẩn để giảm giá thành sản phẩm. 11 yếu tố ảnh hưởng đến lượng sinh khối đượcsàng lọc bằng phương pháp Plackett – Burman và chọn ra 3 yếu tố có ảnh hưởng nhiều nhất.Bằng phương pháp leo dốc Box – Wilson, điều kiện tối ưu được xác định bao gồm: dịch chiếtdứa 55% (v/v), cao nấm men 47,5 (g/L) và tỷ lệ giống 9,5% (v/v). Kết quả cho thấy mật độ tếbào Lactobacillus casei sau 18h nuôi cấy trong môi trường cải biên tối ưu là 9,280 Log(CFU/mL), so với trong môi trường MRS broth là 9,178 Log (CFU/ml). Từ khóa: Lactobacillus casei, tối ưu hóa, sinh khối, probiotics, MRS, Plackett – Burman.1. MỞ ĐẦU sung lợi khuẩn, thức ăn chăn nuôi có bổ Probiotics là những vi sinh vật sống có sung probiotics nhằm hạn chế việc sử dụngảnh hưởng tốt đến vật chủ bằng cách giúp các chất kháng sinh, giảm tác động đến concân bằng hệ vi sinh vật đường ruột (Michail người. Việc tận dụng các nguyên liệu rẻS, 2005). Phần lớn các chế phẩm probiotics tiền thay thế một phần hay hoàn toàn cholà các vi khuẩn lactic như Lactobacillus môi trường MRS để nuôi cấy thu nhận sinhacidophilus, Lactobacillus casei, Bifido- khối probiotics sẽ góp phần giảm bớt giábacterium longum... Probiotics giúp hoàn thành sản phẩm. Một số nghi n cứu chothiện hệ tiêu hóa, kháng các vi khuẩn gây thấ rằng dịch cà rốt được sử dụng làm cơbệnh thông qua các chất kháng khuẩn (acid, chất hả thi cho sản xuất sinh khối bốnbacteriocins, H2O2...), tăng cường hệ thống chủng vi khuẩn Lactobacillus acidophilus,miễn dịch, giảm cholesterol trong máu, Lactobacillus casei, Lactobacillus delb-khắc phục hiện tượng không dung nạp rueckii, Lactobacillus plantarum (Yoon etlactose, giảm tiêu chảy.... al., 2005); bột chà là được sử dụng tha thế Do những tính năng hữu ích trên nên gluocose trong môi trường MRS như làsinh khối probiotics đã và đang được quan nguồn cacbon rẻ tiền để nuôi cấ thu sinhtâm nghiên cứu để ứng dụng rộng rãi trong hối Lactobacillus casei ATCC 334 nhằmviệc sản xuất các loại sữa lên men có bổ giảm gi thành sản phẩm (A.Shahravy et al., 24 Tạp chí Đại học Thủ Dầu Một, số 5 (24) – 20152012); môi trường dịch chiết dứa được sử Xác định mật tế bào: Tiến hành dựngdụng để nuôi cấ Lactobacillus delbrueckii đường chuẩn thể hiện mối quan hệ tuyếncố định trong hạt canxi alginate để sản xuất tính giữa mật độ tế bào và giá trị D600nmacid lactic (Dr Roslina Rashid, 2008). (Michail S, 2005). Vi sinh vật được tăng Một quá trình nuôi cấy thường bị ảnh sinh trong môi trường MRS broth, sau đóhưởng bởi nhiều yếu tố h c nhau như c c được pha loãng ở các nồng độ và thời gianđiều kiện nuôi cấy và thành phần dinh khác nhau, tiến hành đo OD600nm (A) bằngdưỡng của môi trường. Việc tối ưu c c ếu máy SP-3000 nano và trải đĩa tr n môitố sẽ gi p tăng năng suất sản phẩm (Lim, trường MRS agar ủ ở 37oC, 48 giờ sau đóC.H et al., 2007). C ch đơn giản để thực tiến hành đếm khuẩn lạc (CFU). Sử dụnghiện việc tối ưu là tối ưu từng yếu tố trong phần mềm Excel của Microsoft để xử lý sốkhi giữ nguyên các yếu tố khác, tuy nhiên liệu, kết quả đường chuẩn:cách thực hiện này tốn thời gian và không  CFU x c định được sự t c động đồng thời giữa Log    1.9791  8.2389  ml các yếu tố, do đó phương ph p quy hoạch Ở các thí nghiệm x c định mật độ tếthực nghiệm được áp dụng cho việc tối ưu. bào, tiến hành đo OD sau hi ết thúc thời Trong nghiên cứu này, quá trình nuôi gian nuôi ...