Tuyển chọn các chủng Bacillus thuringiensis có khả năng diệt sâu tơ và sâu xanh

Bacillus thuringiensis (Bt) là vi khuẩn gram dương, sinh tinh thể diệt côn trùng trong quá trình hình thành bào tử. Tuy là một loại vi khuẩn được phát hiện khá muộn nhưng Bt đã được nghiên cứu rất kỹ ở nhiều quốc gia khác nhau và chế phẩm Bt được sử dụng thành công nhất trong bảo vệ thực vật (Asano, 1996). Các tinh thể độc của Bt có thể diệt được nhiều loại côn trùng thuộc bộ 2 cánh (Diptera) bộ cánh cứng (Coleoptera) và bộ cánh vẩy (Lepidoptera) và một số loại côn trùng khác. Sâu tơ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tuyển chọn các chủng Bacillus thuringiensis có khả năng diệt sâu tơ và sâu xanhT¹p chÝ KHKT N«ng nghiÖp, TËp 1, sè 4/2003 TuyÓn chän c¸c chñng Bacillus thuringiensis cã kh¶ n¨ng diÖt s©u t¬ vµ s©u xanhSelection of Bacillus thuringiensis strains with insectidal activity against armyworm (Plutella xylostella) and diamondback moth (Heliothis armigera) NguyÔn ThÞ Ho i H 1, Ng« Giang Liªn2 Summary Over 20 species of natunally occurring insect - specific bacteria have been isolated from thesoil, insects and plants, but only a few have been studied intensively. Much attention has beengiven to Bacillus thuringiensis, a species that produces microbial insecticed toxic to specificgroups of insects. Insecticidal activity of four strains of Bacillus thuringiensis from the Museumof the Center of Applied Microbiology has been tested against Plutella xylostella and Heliothisarmigera. Keywords: Bacillus thuringiensis strains, insectidal activity, Plutella xylostella, Heliothisarmigera. .1. Më ®Çu1 2. Nguyªn liÖu v ph−¬ng ph¸p Bacillus thuringiensis (Bt) l vi khuÈn Vi sinh vËt: C¸c chñng Bacillusgram d−¬ng, sinh tinh thÓ diÖt c«n trïng trong thuringiensis ®−îc nhËn tõ B¶o t ng Gièngqu¸ tr×nh h×nh th nh b o tö. Tuy l mét lo¹i vi chuÈn vi sinh vËt, Trung t©m C«ng nghÖ SinhkhuÈn ®−îc ph¸t hiÖn kh¸ muén nh−ng Bt ® häc, §¹i häc Quèc gia H Néi. Bèn chñng®−îc nghiªn cøu rÊt kü ë nhiÒu quèc gia kh¸c Bacillus thuringiensis ký hiÖu l 8-2, AM4, H-nhau v chÕ phÈm Bt ®−îc sö dông th nh c«ng H1 v G3nhÊt trong b¶o vÖ thùc vËt (Asano, 1996). C¸c Bèn chñng vi khuÈn n y ®Òu ch−a cã tinhtinh thÓ ®éc cña Bt cã thÓ diÖt ®−îc nhiÒu lo¹i thÓ h×nh th¸p ®«i v ®−îc nu«i cÊy trªn m«ic«n trïng thuéc bé 2 c¸nh (Diptera) bé c¸nh tr−êng lªn men nªu d−íi ®©y. ë nhiÖt ®é 30oCcøng (Coleoptera) v bé c¸nh vÈy l¾c 220 vßng/phót. Thêi gian nu«i cÊy thÝch(Lepidoptera) v mét sè lo¹i c«n trïng kh¸c. hîp cho tõng chñng biÕn ®éng tõ 30 - 40 giê.S©u t¬ (Plutella xylostella) v s©u xanh M«i tr−êng lªn men (g/l):(Heliothis armigera Hubner) l nh÷ng lo i s©u Bét ®Ëu t−¬ng: 15;g©y h¹i nghiªm träng cho c¸c lo¹i rau trång. Bét ng«: 10;V× vËy trong ph¹m vi b i b¸o n y chóng t«i ®Ò §−êng kÝnh: 20;cËp tíi kh¶ n¨ng sinh tr−ëng, t¹o th nh b o tö Cao nÊm men: 1;còng nh− kh¶ n¨ng diÖt s©u xanh v s©u t¬ cña Mét sè muèi kho¸ng.c¸c chñng Bt ®Ó chän ra c¸c chñng Bt cã kh¶ pH = 7,0.n¨ng diÖt c¸c lo¹i s©u n y. Ph©n tÝch ®Þnh l−îng protein theo ph−¬ng ph¸p Lowry (Lowry v cs, 1951) v ph©n tÝch ®Þnh tÝnh protein theo Laemmili (Laemmili v1 Trung t©m CNSH- §H Quèc gia H Néi2 cs, 1970). Khoa Sinh, §H Khoa häc Tù nhiªn- §HQG260 TuyÓn chän c¸c chñng bacillus Thuringiensis... B¶ng 1. Kh¶ n¨ng diÖt s©u xanh v s©u t¬ cña c¸c chñng Bacillus thuringiensis 8-2, G3, AM4, H-H1 chøa c¸c nhãm gen Cry kh¸c nhau Chñng gièng LC50 sau 4 ng y xö lý SDS-PAGE S¶n phÈm S©u t¬ S©u xanh (kDa) PCR (Plutella xylostella) (Heliothis armigera) CrylA(a), Bacillus thuringiensis 8-2 0,42 1,09 130 CrylA(b) CrylA(a), Bacillus thuringiensis G3 0,.23 2,30 130 CrylA(b) CrylA(a), Bacillus thuringiensis AM4 0,87 3,44 130 CrylA(b) CrylA(a), Bacillus thuringiensis H-H1 0,07 4,15 130 CrylA(b) Sö dông kü thuËt PCR ®Ó nhËn diÖn gen armigera), s©u t¬ (Plutella xylostella) cña c¸cCry cña Bt, sö dông cÆp måi ®Æc hiÖu LepIA, chñng ® tuyÓn chän. C¶ 4 chñng ®Òu cãLepIB v LepIIA, LepIIB b»ng ph−¬ng ph¸p ...