Ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng bố, mẹ phục vụ công tác chọn tạo giống lúa lai 2 dòng kháng bệnh bạc lá

Bệnh cháy lá do vi khuẩn Xanthomonas oryzea pv. oryzea là một trong nhữngbệnh nghiêm trọng nhất trong khu vực trồng lúa của Việt Nam. Để ngăn chặn căn bệnh này, việc sử dụnggiống kháng cung cấp hiệu quả kinh tế nhất. Để nuôi kháng haidòng giống lúa lai, các dòng bố mẹ có chứa gen kháng đóng rấtvai trò quan trọng. Trong nghiên cứu này, đánh dấu D A? Được sử dụng cho các gen kháng sàng lọc đểcháy lá vi khuẩn trong dòng lúa mẹ. ? pb 181, RG556, P3 và pT818 đánh dấu được sử dụngđể chọn...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng bố, mẹ phục vụ công tác chọn tạo giống lúa lai 2 dòng kháng bệnh bạc lá NG D NG CH TH PHÂN T DNA CH N L C GEN KHÁNG B NH B C LÁ CÁC DÒNG B , M PH C V CÔNGTÁC CH N T O GI NG LÚA LAI 2 DÒNG KHÁNG B NH B C LÁ Phan H u Tôn1, T ng Văn H i1, guy n Văn Giang1, H H u h 2, guy n Trí Hoàn2 SUMMARY Application of D A marker for screening resistance gen to bacterial leaf bligh in parents lines of hybrid rice Bacterial leaf blight disease caused by Xanthomonas oryzea pv. oryzea is one of themost serious diseases in rice -cultivating areas of Vietnam. To prevent this disease, the useof resistant varieties offers the most economic efficiency. In order to breed resistant twoline hybrid rice varieties, the parental lines containing resistance genes plays a veryimportant role. In this study, D A markers were used for screening resistance gene tobacterial leaf blight in parent rice lines. pb 181, RG556, P3 and pT818 marker were usedto select Xa4, Xa5 Xa7 and Xa21 respective. The results shown that, the resisitance geneshomozygote types were selected in 11 mother and 14 father populations. Three strains ofbacterial leaf blight were used innoculation on the individuals that contain resistancegenes homozygotes were resistant. Keywords: D A marker, resistance gene, Bacterial leaf blight, Hybrid rice. gi ng nh p n i t Trung Qu c. Hư ng ch nI. §ÆT VÊN §Ò t o gi ng kháng b nh ư c coi là có hi u M t trong nh ng hư ng tăng năng qu nhi u m t, v a gi m chi phí, b o vsu t lúa g o là s d ng ưu th lai. Hi n nay môi trư ng l i t o ra s n phNm s ch.chúng ta ang s d ng hai h th ng: H i v i lúa lai 2 dòng, ch n t o ra tth ng lúa lai 1 i; 2 Vi n Khoa h c N ông nghi p Vi t N amhai dòng và Trư ng i h c N ông nghi p Hà Nlúa lai ba h p có kh năng kháng b nh b c lá ch c ndòng, trong ó lúa lai hai dòng vư t tr i và m t trong hai b m ph i ch a gen khángchi m ưu th hơn h n. n u ó là gen tr i, ho c c b m u ch a Theo sè liÖu th ng kê hàng năm năng gen n u ó là gen l n. Các t¸c gi cũng ãsu t lúa toàn th gi i ư c tính gi m t 10- xác nh ư c gen Xa4, Xa5, Xa7 và Xa2120% vì các b nh vi khuNn, trong ó có t i kháng ư c h u h t các ch ng b nh b c lá ë50% là do b nh b c lá gây nên. mi n B c mi n B c Vi t N am (Bïi Träng Thuû v cs,Vi t N am b nh tr nên nghiêm tr ng và phá 2007). ưa gen kháng h u hi u vào m tho i n ng c hai v , c bi t ®èi víi các gi ng, phương pháp truy n th ng là laiBackcross, ch n cây có gen kháng lai l i Ch th N pb181 phát hi n gen Xa4v i gi ng lúa t t ho c tr ng F2 sau ó ch n (Yoshimura et al., 1992) v i primer F5’-cá th ch a gen. ATC-GAT-CGA-TCT-TCA-CGA-GG- N gày nay v i s phát tri n c a công 3’vàR5’-GTG-CTA-TAA-AAG-GCA- TTC-GGG-3’,ch th RG556 ch n l c genngh sinh h c, k thu t di truy n phân t kháng Xa5 (McCough et al., 1991) v íngư i ta ã nh v ư c chính xác các gen trình t m i R5’-AAT-ATT-TCA-GTG-v chØ thÞ liên k t v i chóng. ây các tác TGC-ATC-TC-3’ và F5’-TAG-CTG-CTG-gi ã xác nh gen Xa4 liên k t v i RFLP CCG-TGC-TGT-GC-3’,ch th P3 ch n locus XN pb181 và XN pb78 trên N ST s l c gen kháng Xa7 (Taura et al.,) v i m i11, v i kho ng cách liên k t u là 1,7 cM R5’-CAT-CAC-GGT-CAC-CGC-CAT-(Yoshimura et al., 1992); Gen Xa5 liên k t ATC-GGA-3’ và F5’-CAG-CAA-TTC-v i ch th RZ390, RG556 và RG207 trên ACT-GGA-GTA-GTG-GTT-3’v ch thN ST s 5, v i kho ng cách liên k t 0-1 cM pTA818 ch n l c gen kháng Xa21 (Ronald(Mc Couch et al., 1991); Gen Xa7 n m trên et al., 1992) v i trình t m i F5’ ATA GCAN ST s 6 liên k t v i ch th Mp3 v i ACT GAT TGC TTT GC 3’ và R5’ CGAkho ng cách di truy n 2,5 cM; Gen Xa21 TCG GTA TAA CAG CAA AAC 3’.liên k t v i ch th pTA818 và pTA248 v ikho ng cách di truy n 0-1cM (Ronal et al., 2. Phương pháp nghiên c u1992)... Quy trình chi t tách DNA theo N hư v y ch c n dùng k thu t PCR N. Furuya và c ng s , 2003: M u lá cñachúng ta có th phát hi n ư c s hi n di n dßng bè,mÑ ®−îc lÊy ngÉu nhiªn 10 c¸ thÓc a các gen kháng bÖnh b¹c l¸ trong các th ư c c t và nghi n nh trong 800 l dungh phân ly nhÊt l các dòng có ch a gen d ch chi t tách DNA ( ...