Ứng dụng kỹ thuật PCR phát hiện sự hiện diện của gen sry trong chẩn đoán trước sinh các bệnh lý di truyền

Nghiên cứu nhằm mục tiêu trình bày ứng dụng quy trình PCR chẩn đoán sự hiện diện của gen SRY nằm trên nhiễm sắc thể Y. Nghiên cứu tiến hành DNA của 5 thai nhi được tách chiết từ các mẫu dịch ối của 5 thai phụ có tuổi lớn hơn 40. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ứng dụng kỹ thuật PCR phát hiện sự hiện diện của gen sry trong chẩn đoán trước sinh các bệnh lý di truyềnNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 1 * 2013ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR PHÁT HIỆN SỰ HIỆN DIỆNCỦA GEN SRY TRONG CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINHCÁC BỆNH LÝ DI TRUYỀNNguyễn Thị Băng Sương*TÓMTẮTMở đầu: Việc điều trị các bệnh lý di truyền vẫn còn là vấn đề thách thức đối với nền y học, do vậy việcphòng bệnh bằng chẩn đoán trước sinh là biện pháp cần thiết và có hiệu quả cao. Đối với bệnh di truyền liên kếtvới giới tính, chẩn đoán giới tính thai nhi đóng vai trò quan trọng trong quá trình chẩn đoán trước sinh.Mục tiêu: Ứng dụng quy trình PCR chẩn đoán sự hiện diện của gen SRY nằm trên nhiễm sắc thể Y.Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: DNA của 5 thai nhi được tách chiết từ các mẫu dịch ối của 5 thaiphụ có tuổi > 40. Các mẫu dịch ối này đã được xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ để chẩn đoán thai nhi có mắc hộichứng Down hay không. Tiến hành kỹ thuật PCR khuếch đại đoạn gen SRY nằm trên nhiễm sắc thể Y bằng cặpmồi đặc hiệu. Sau đó điện di trên gel agarose 1,5% để xác định giới tính của thai nhi. So sánh với kết quả giới tínhđược xác định bằng nhiễm sắc thể đồ.Kết quả: Phát hiện được 2 thai nhi có giới tính nam và 3 thai nhi có giới tính nữ. Kết quả này phù hợp vớiphân tích bằng nhiễm sắc thể đồ.Kết luận: Nghiên cứu đã ứng dụng thành công kỹ thuật PCR giúp xác định giới tính của thai nhi, điều nàycó ý nghĩa thực tiễn trong chẩn đoán trước sinh các bệnh lý di truyền trên nhiễm sắc thể giới tính.Từ khoá: chẩn đoán trước sinh, gen SRY, nhiễm sắc thể Y.ABSTRACTAPPLICATION OF PCR TECHNIQUE FOR IDENTIFICATION OF SRY GENE IN PRENATALDIAGNOSIS OF GENETIC DISEASESNguyen Thi Bang Suong * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 - No 1 - 2013: 38 - 43Introduction: The treatment of genetic diseases is still a challenge in medicine, then prevention by prenataldiagnosis is necessary and effective. For disorders are sex-linked genetic disease, detection of fetal gender is veryimportant in prenatal diagnosis.Objective: Application of PCR technique for detection the presence of SRY gene located on Y chromosome.Patients and Methods: DNA was extracted from five amniotic fluid samples of five women with age > 40.The amniotic fluid samples were tested to diagnose Down syndrome before by karyotype. The SRY gene wasamplified with a pair of specific primer. After that, PCR products were electrophoresis on agarose gel to determinethe sex of fetus.Results: 2 fetus are male and the other fetus are female, this result is suitable for the sex of fetus analyzed bykaryotype.Conclusion: This study applied successfully PCR techniques to determine the sex of fetus, this process isvery important in prenatal diagnosis of sex-linked disorders.* Bộ môn Hóa Sinh, Trung Tâm Sinh Học Phân Tử, Khoa Y - Đại học Y Dược TPHCMTác giả liên lạc: TS. BS. Nguyễn Thị Băng SươngĐT: 0914007038Email: suongnguyenmd@gmail.com38Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 1 * 2013Nghiên cứu Y họcKeywords: prenatal diagnosis, SRY gene, Y chromosome.nhiều tác giả sử dụng(1). Chúng tôi tiến hành đềĐẶTVẤNĐỀtài này với mục tiêu: “Ứng dụng quy trình PCRCác bệnh lý di truyền chiếm một tỷ lệ kháchẩn đoán sự hiện diện của gen SRY nằm trêncao và đây là nguyên nhân gây tử vong chínhnhiễm sắc thể Y”.trong thời kỳ sơ sinh. Một số bệnh ở trạng thái dịĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨUhợp tử có biểu hiện hoàn toàn bình thường,người mang gen có thể kết hôn và khả năngĐối tượng nghiên cứutruyền gen bệnh cho thế hệ sau với tỷ lệ cao.- 20 người bình thường gồm 10 người namTrường hợp bệnh thuộc dạng di truyền liên kếtvà 10 người nữ dùng làm mẫu đối chứng nam vàgiới tính X (như hemophilia A, hemophilia B,nữ để chuẩn hóa quy trình. Mỗi người được lấyloạn dưỡng cơ Duchenne,…) thì tỷ lệ mắc bệnh ở2 ml máu tĩnh mạch chống đông bằng EDTA.trẻ nam tương đối cao hơn so với nữ do chỉ cần- 5 mẫu dịch ối của năm thai phụ có độ tuổinhận 1 nhiễm sắc thể X bị đột biến từ người mẹtrên 40, chọc ối để làm nhiễm sắc thể đồ giúpthì sẽ biểu hiện bệnh, trong trường hợp này nếuchẩn đoán thai nhi có bị hội chứng Down hayngười mẹ có kiểu gen dị hợp tử thì khả năngkhông. Kết quả nhiễm sắc thể đồ xác định có 2truyền gen bệnh cho con trai là 50%(8). Việc điềuthai nam và 3 thai nữ.trị các bệnh lý di truyền vẫn còn là một tháchPhương pháp nghiên cứuthức lớn đối với nền y học. Phần lớn bệnh nhânvẫn tử vong, để lại hậu quả nặng nề cho gia đìnhKỹ thuật tách chiết ADN từ máu ngoại vi vàvà xã hội. Hiện nay, nhờ sự tiến bộ của ngànhtừ dịch ốisinh học phân tử, một số bệnh lý di truyền có thể- Ly trích DNA từ máu ngoại vi: Máu tươiđược điều trị khả quan hơn. Tuy nhiên, trước khiđược chống đông bằng EDTA, được tách trongcó những phương pháp điều trị triệt để các bệnhvòng 24 giờ. Quy trình tách chiết DNA từ 200 μllý di truyền bằng liệu pháp gen thì việc chẩnmáu ngoại vi được tiến hành theo QiAgen Kit.đoán trước ...