Ứng dụng RT-PCR để chẩn đoán sớm virus dengue ở bệnh nhi sốt xuất huyết tại Cần Thơ

Nghiên cứu được tiến hành với mục tiêu nhằm trình bày về việc ứng dụng kỹ thuật RT-PCR phát hiện sớm và chính xác vi-rút dengue trong máu bệnh nhi sốt xuất huyết giúp bác sĩ lâm sàng xác định sớm SXH-D. Đây là một nghiên cứu áp dụng kỷ thuật RT-PCR để xác định virus Dengue trong máu bệnh nhi đang bị bệnh sốt xuất huyết dengue trong vòng 3 ngày đầu tiên mắc bệnh.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ứng dụng RT-PCR để chẩn đoán sớm virus dengue ở bệnh nhi sốt xuất huyết tại Cần ThơY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ bản của Số 4 * 2008Nghiên cứu Y họcỨNG DỤNG RT-PCR ĐỂ CHẨN ĐOÁN SỚM VIRUS DENGUEỞ BỆNH NHI SỐT XUẤT HUYẾT TẠI CẦN THƠPhạm Hùng Lực*TÓM TẮTĐặt vấn đề: Vấn đề chẩn đoán sốt xuất huyết trong thời kỳ đầu của bệnh là khó, lâm sàng chưa rõ ràng, đòihỏi cận lâm sàng như Mac-ELISA, kỹ thuật RT-PCR (reverse transcription–polymerase chain reaction) sẽ chẩnđoán nhanh, nhạy và đặc hiệu SXH-D, phân loại vi-rút dengue.Mục tiêu nghiên cứu: Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR phát hiện sớm và chính xác vi-rút dengue trong máubệnh nhi sốt xuất huyết giúp bác sĩ lâm sàng xác định sớm SXH-D.Phương pháp nghiên cứu: Đây là một nghiên cứu áp dụng kỷ thuật RT-PCR để xác định virus Denguetrong máu bệnh nhi đang bị bệnh sốt xuất huyết dengue trong vòng 3 ngày đầu tiên mắc bệnh. 30 ca trẻ bệnh Sốtxuất huyết Dengue đang nằm theo dõi điều trị trong bệnh viện Nhi đồng Cần thơ đã được chọn v ào nghiên cứu,năm 2006. Số liệu được phân tích bởi chương trình SPSS để đo lường xác xuất các biến số.Kết quả nghiên cứu: đã chỉ rõ Kỷ thuật RT-PCR có khả năng xác định 80% virus sốt xuất huyết trongvòng 3 ngày đầu mắc bệnh sốt xuất huyết.- RT-PCR có thể định rõ các typ virus DenI, DenII, DenIII tại Cần Thơ trong năm 2006.- RT-PCR có giá trị chẩn đoán nhanh và chính xác Virus Dengue trong sốt xuất huyết.Kết luận: Kỷ thuật RT-PCR có khả năng xác định 80% virus sốt xuất huyết trong vòng 3 ngày đầu mắcbệnh sốt xuất huyết.Do đó có thể dùng phổ cập trên lâm sàng.ABSTRACTUSING RT-PCR TEST TO IDENTIFY DENGUE VIRUS IN CHILDREN OF CASES DENGUEHEMORRHAGIC FEVER DURING EARLY DAYS IN CANTHOPham Hung Luc * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 12 - Supplement of No 4 - 2008: 263 - 267Background: The diagnosis of Dengue fever during early days is dificulty, clinical symtoms are not clear, Itis required doing some specicial tests to confirm virus Dengue. As Elisa test,RT-PCR test are necessary.Objective: To use RT-PCR test to identify Dengue virus in the blood of patients.Method: This study is applied RT-PCR technic to identify virus Dengue in blood of the cases Denguehemorrhagic fever durring the first 3 day of disease. 30 children of cases Dengue hemorrhagic fever in theChildren hospital of Cantho to be selected in research, in the year 2006. Data was analized by SPSS pragramme tomeasure the frequency of variables.Rresult: This study was showed that RT-PCR technic is capable to determine 80% of cases Dengue FeverVirus durring the first 3 day of disease.- RT-PCR can identify Dengue type I, type II, Type III at Cantho in the year 2006.- RT-PCR is a value test to diagnosis Virus Dengue in case of hemorrhagic fever dengue.aegypti(6,16,26). Theo báo cáo năm 1999 của Bộ Y tế,ĐẶT VẤN ĐỀSXH-D ở nước ta có tỷ lệ chết/mắc trung bình làSốt xuất huyết Dengue (SXH-D) do vi-rút0,23%. Bệnh có nhiều thể lâm sàng, thể nhẹ códengue thuộc 4 týp (DEN-1, DEN-2, DEN-3 vàsốt phát ban đến thể nặng có xuất huyết dễ dẫnDEN-4) và lây truyền qua muỗi Aedes*Trường Đại học Y Dược Cần Thơ262Chuyên Đề Y Tế Công Cộng và Y Học Dự PhòngY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 12 * Phụ bản của Số 4 * 2008Nghiên cứu Y họcđến tử vong nếu không được xử trí tích cực kịpthời.tiêu chuẩn Tổ chức Y tế Thế giới trong việc chẩnđoán sớm bệnh sốt xuất huyết.Về điều trị, chủ yếu là bồi hoàn dịch mộtcách thận trọng, đủ và đúng. Vì vậy, việc chẩnđoán sớm và nhanh có ý nghĩa rất lớn với kếtquả điều trị và diễn tiến của bệnh. Vấn đề lànhững ngày đầu của bệnh khó chẩn đoán là dosốt xuất huyết, lâm sàng chưa rõ ràng, đòi hỏicận lâm sàng như Mac-ELISA, sắc ký miễn dịch,kỹ thuật RT-PCR (reverse transcription–polymerase chain reaction) sẽ chẩn đoán nhanh,nhạy và đặc hiệu SXH-D, có khả năng phân loạivi-rút dengue. Nghiên cứu này ứng dụng kỹthuật RT-PCR phát hiện sớm và chính xác vi-rútdengue trong máu bệnh nhi sốt xuất huyết giúpbác sĩ lâm sàng xác định sớm SXH-D.ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUMục tiêu nghiên cứu1. Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để phát hiệnsớm vi-rút dengue ở bệnh nhi sốt xuất.2. Xác định týp vi-rút dengue bằng kỹ thuậtRT-PCR.3. Xác định giá trị của RT-PCR với xétnghiệm chẩn đoán nhanh và chẩn đoán dựa theoCác bệnh nhi theo dõi SXH-D vào điều trị tạikhoa Sốt xuất huyết Bệnh viện Nhi đồng CầnThơ từ 01/10/2006 đến 31/12/2006.* Tiêu chuẩn chọn bệnh: Tuổi ≤ 15h, Sốt cao( ≥ 390C) từ ngày thứ 1 đến ngày thứ 3 của bệnhkhông có tiêu điểm nhiễm trùng. Có dấu dâythắt dương tính hoặc biểu hiện những dấu xuấthuyết.* Tiêu chuẩn loại trừ: + Những bệnh nhi mắccác bệnh khác như xuất huyết giảm tiểu cầu,thiếu máu tán, huyết tự miễn, viêm đa khớpdạng thấp, lupus, suy tủy, leucemie,hemophilie,..+ Sốt ≥ 4 ngày kèm hay không kèm dấu xuấthuyết.Nghiên cứu mô tả cắt ngang. Tuy nhiên dokinh phí có hạn không cho phép nghiên cứumẫu lớn cho nên chúng tôi chọn cỡ mẫu 30 là cỡmẫu nhỏ nhất nhưng vẫn đáp ứn ...