Xác định độ tinh khiết quang học của dẫn chất Cis-N-benzyl và Cis-N-heptyl tetrahydro phthalazinon bằng phương pháp HPLC sử dụng pha tĩnh bất đối

Đề tài nhằm đóng góp vào công cuộc tìm kiếm nguồn nguyên liệu làm thuốc mới, cho đến nay, ở Việt Nam, nhóm nghiên cứu của chúng tôi đã bước đầu tổng hợp thành công các dẫn chất cis-N-alkyl phthalazinon có tác dụng ức chế chọn lọc phosphodiesterase IV và tác dụng kháng viêm mạnh hơn các dẫn chất trans và hỗn hợp racemic....
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định độ tinh khiết quang học của dẫn chất Cis-N-benzyl và Cis-N-heptyl tetrahydro phthalazinon bằng phương pháp HPLC sử dụng pha tĩnh bất đốiNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014XÁC ĐỊNH ĐỘ TINH KHIẾT QUANG HỌC CỦA DẪN CHẤTCis-N-BENZYL VÀ Cis-N-HEPTYL TETRAHYDRO PHTHALAZINONBẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC SỬ DỤNG PHA TĨNH BẤT ĐỐIChương Ngọc Nãi*, Trần Quốc Duy**, Đặng Văn Tịnh**, Nguyễn Đức Tuấn**TÓM TẮTMục tiêu: Nhằm đóng góp vào công cuộc tìm kiếm nguồn nguyên liệu làm thuốc mới, cho đến nay, ở ViệtNam, nhóm nghiên cứu của chúng tôi đã bước đầu tổng hợp thành công các dẫn chất cis-N-alkyl phthalazinon cótác dụng ức chế chọn lọc phosphodiesterase IV và tác dụng kháng viêm mạnh hơn các dẫn chất trans và hỗn hợpracemic. Đối với các dẫn chất cis-N-heptyl tetrahydro phthalazinon (N1) và cis-N-benzyl tetrahydro phthalazinon(N2) mới được tổng hợp, hiện nay chưa có quy trình cụ thể để xác định độ tinh khiết quang học.Vì vậy, mộtphương pháp tách được các đồng phân đối quang riêng lẻ này mang tính cấp thiết.Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Xác định độ tinh khiết quang học của các dẫn chất quang hoạt N1và N2 đãđược tổng hợp bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao dùng pha tĩnh bất đối là dẫn xuất tris (3,5dimethylphenyl carbamat) cellulose.Kết quả: Đã xác định được điều kiện sắc ký thích hợp để xác định độ tinh khiết quang học của các dẫn chấtquang hoạt N1 và N2, sử dụng pha tĩnh bất đối là dẫn xuất tris (3,5-dimethylphenyl carbamat) cellulose (cột Luxcellulose-1: 250 x 4,6 mm; 5 μm) với pha động n-hexan chứa triethylamin 0,2% và isopropanol chứa triethylamin0,2% (90:10), nhiệt độ cột 30oC, tốc độ dòng 1,5 ml/phút đối với hợp chất N1 và 2 ml/phút đối với hợp chất N2,bước sóng phát hiện 317 nm. Kết quả thẩm định cho thấy quy trình có khoảng tuyến tính rộng với hệ số tươngquan cao vàđộ chính xác RSD < 2%.Độ tinh khiết quang học đối quang (ee) của các dẫn chất (−)N1, (+)N1, (−)N2và (+)N2 lần lượt là 90,90%; 91,36%; 93,40% và 93,42%.Kết luận: Đề tài đã xây dựng thành công quy trình HPLC xác định độ tinh khiết quang học của các dẫn chấtcis-N-heptyl tetrahydro phthalazinon và cis-N-benzyl tetrahydro phthalazinon. Quy trìnhcó thể được áp dụng đểxác định độ tinh khiết quang học của các dẫn chất cis-N-alkyl-tetrahydro phthalazinon đã được tổng hợp.Từ khóa: cis-N-heptyl tetrahydro phthalazinon, cis-N-benzyl tetrahydro phthalazinon, độ tinh khiết quanghọc, pha tĩnh bất đối tris (3,5-dimethylphenyl carbamat) cellulose.ABSTRACTCHROMATOGRAPHIC ANALYSIS OF ENANTIOMERS OF SYNTHESIZED NEW CHIRALCis-N-HEPTYL AND Cis-N-BENZYL TETRAHYDRO PHTHALAZINONE DERIVATIVESWITH CHIRAL STATIONARY PHASEChuong Ngoc Nai, Tran Quoc Duy, Dang Van Tinh, Nguyen Duc Tuan* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 - Supplement of No 2 - 2014: 128 - 133Objective: In order to search for new sources of bulk drugs, so far, in Vietnam, our study group wassuccessfully synthesized new chiral cis-N-alkyl phthalazinone derivatives with selective phosphodiesterase IVinhibitory activity and stronger anti-inflammatory activity than that of trans derivatives and racemic mixture.For synthesized new chiral cis-N-heptyl tetrahydrophthalazinone (N1) andcis-N-benzyl tetrahydrophthalazinone(N2) derivatives, there is not a specific proceduretodetermine their enantiomeric purity, so far. Therefore,* Viện Kiểm nghiệm thuốc Thành phố Hồ Chí MinhTác giả liên lạc: Chương Ngọc Nãi ĐT: 0913799068128** Khoa Dược, Đại học Y Dược TP. Hồ Chí MinhEmail: diemnhim@yahoo.comChuyên Đề Dược HọcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014Nghiên cứu Y họcseparation of these chiral compounds is necessary.Subjects and Methods: A high performance liquid chromatographic method using derivatized cellulose tris(3,5-dimethylphenyl carbamate) chiral stationary phase was developed for separation of the enantiomers ofsynthesized new chiral N1 and N2 derivatives.Results: The appropriate chromatographic conditions were found out for complete separation of theenantiomers, using a cellulose tris-3,5-dimethylphenyl carbamate chiral stationary phase (Lux cellulose-1 column:250 x 4.6 mm; 5 μm), thermostated at 30oC, mixture of n-hexan containing 0.2% triethylamine and isopropanolcontaining 0.2% triethylamine (90:10, v/v) as eluent in isocratic mode, flow rate of 1.5 ml/min for N1 compound,of 2 ml/min for N2 compound, and detection wavelength of 317 nm. The method was validated and shown widelinearity range with high correlation coefficient and the precision with RSD < 2%. The enantiomeric purity of thesynthesized enantiomers is 90.90%, 91.36%, 93.40% and 93.42% (ee) for (−)N1, (+)N1, (−)N2 and (+)N2,respectively.Conclusion: A liquid chromatographic method was successfully developed for separation of the enantiomersof synthesized new chiral cis-N-heptyl and cis-N-benzyl tetrahydro phthalazinone derivatives. The validatedmethod could be applied for determination ...