Xác định hàm lượng axit shikimic trong hồi Việt Nam

Shikimic acid is an important product in the synthesis of the anti-influenza drug osseltamivir phosphate. LC-MS method was applied for the determination and quantification of shikimic acid from Vietnamese star anis (Illicium verum Hook.f.). Using the instrument system LC/MSD Agilent series 1110, separation was performed on a Zorbax SB-C18 RP (3.0x150 mm) column with water containing 0.1% formic acid and methanol as mobile phase. Analytes were detected both by DAD at 210 nm and by MS detectors. Analytical results showed the percentige of shikimic acid in dried Vietnamese star anis obtains from 5.78 to 8.17%.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định hàm lượng axit shikimic trong hồi Việt NamT¹p chÝ Hãa häc, T. 45 (6A), Tr. 199 - 204, 2007 X¸c ®Þnh hµm l îng axit shikimic trong håi viÖt nam §Õn Tßa so¹n 15-11-2007 §o n ThÞ Mai H ¬ng, NguyÔn QuyÕt ChiÕn, NguyÔn ThÞ Hång H¹nh, NguyÔn V¨n Hïng ViÖn Hãa häc, ViÖn Khoa häc v& C«ng nghÖ ViÖt Nam SUMMARY Shikimic acid is an important product in the synthesis of the anti-influenza drug osseltamivir phosphate. LC-MS method was applied for the determination and quantification of shikimic acid from Vietnamese star anis (Illicium verum Hook.f.). Using the instrument system LC/MSD Agilent series 1110, separation was performed on a Zorbax SB-C18 RP (3.0x150 mm) column with water containing 0.1% formic acid and methanol as mobile phase. Analytes were detected both by DAD at 210 nm and by MS detectors. Analytical results showed the percentige of shikimic acid in dried Vietnamese star anis obtains from 5.78 to 8.17%. I - Më ®Çu HO COOH Axit shikimic (3,4,5-trihydroxy-1-cyclohexene-1-carboxylic acid) (1) ®#îc t¸ch ra HOlÇn ®Çu tiªn tõ qu¶ cña mét lo.i Håi cã ®éc tÝnh, OHgäi l. Håi NhËt b¶n Illicium anisatum n¨m 1885 1: Axit shikimic[1] d#íi d¹ng tinh thÓ m.u tr¾ng. Axit shikimicl. nguyªn liÖu ban ®Çu quan träng ®Ó tæng hîp II - NGUY£N LiÖu v ph ¬ng ph¸pra thuèc Tamiflu ch÷a bÖnh cóm gia cÇm [2 - 5]. nghiªn cøuTrong khu«n khæ ®Ò t.i ®éc lËp cÊp nh. n#íc vÒnghiªn cøu thuèc ch÷a bÖnh cóm gia cÇm, ®Ó 1. Nguyªn liÖuphôc vô cho viÖc nghiªn cøu chiÕt xuÊt axit Qu¶ håi (Illicium verum Hook.f., häshikimic tõ qu¶ håi cña ViÖt Nam tr#íc ®©y Illiciaceae), ®#îc PGS. L#u §.m C# - ViÖn Sinhchóng t«i ®R x©y dùng ph#¬ng ph¸p ®Þnh l#îng th¸i v. T.i nguyªn Sinh vËt, ViÖn Khoa häc v.axit shikimic b»ng m¸y s¾c ký láng cao ¸p kÕt C«ng nghÖ ViÖt Nam x¸c ®Þnh v. thu h¸i ë c¸cnèi víi m¸y ®o phæ khèi l#îng (ph#¬ng ph¸p huyÖn V¨n LRng (VL), V©n Méng (VM), B¾cLC-MS) [6]. TiÕp tôc c¸c nghiªn cøu trong S¬n (BS) v. B×nh Gia (BG), tØnh L¹ng S¬n v.okhu«n khæ ®Ò t.i, trong b.i b¸o n.y chóng t«i th¸ng 9/2006. MÉu tiªu b¶n ®#îc l#u gi÷ t¹itr×nh b.y c¸c kÕt qu¶ kh¶o s¸t chÊt l#îng d#îc ViÖn Sinh th¸i v. T.i nguyªn Sinh vËt.liÖu v. ph#¬ng ph¸p chiÕt xuÊt axit shikimic tõ Axit shikimic chuÈn cã ®é s¹ch 99% muaqu¶ håi ë c¸c vïng nguyªn liÖu kh¸c nhau. cña hRng Aldrich. 199 C¸c dung m«i, hãa chÊt ®¹t tiªu chuÈn dïng Dynode 7,0 kV.cho HPLC mua cña hRng Merck. C¸c dung dÞch axit shikimic chuÈn cã nång1. M¸y mãc thiÕt bÞ ®é 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25; 0,3; 0,35; 0,4; 0,45 v. 0,5 mg/ml MeOH ®R ®#îc ®o lÆp l¹i 3 lÇn C¸c mÉu ®#îc ®o trªn hÖ thèng m¸y s¾c ký b»ng LC/MS.láng cao ¸p kÕt nèi víi m¸y ®o phæ khèi l#îngLC/MSD Agilent series 1100 cña ViÖn Ho¸ häc, ChuÈn bÞ mÉu chuÈn v. tiÕn h.nh ®o: AxitViÖn KH&CN ViÖt Nam. shikimic chuÈn ®#îc c©n chÝnh x¸c 50 mg cho v.o b×nh ®Þnh møc (50 ml) sau ®ã thªm MeOH2. ChuÈn bÞ mÉu v ®iÒu kiÖn ®o LC-MS cho ®Õn v¹ch ta ®#îc dung dÞch gèc. Pha loRngChuÈn bÞ mÉu ®Ó kh¶o s¸t ®iÒu kiÖn chiÕt dung dÞch gèc th.nh c¸c dung dÞch cã nång ®é 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25; 0,3; 0,35; 0,4; 0,45 v. *Ng©m ChiÕt 0,5 mg/ml, sau ®ã ch¹y lÇn l#ît c¸c dung dÞch - 30 g bét qu¶ håi kh« nghiÒn nhá cña huyÖn cã nång ®é trªn qua hÖ thèng LC/MS víi cétB×nh Gia ®#îc ng©m chiÕt 4 lÇn x 6h trong b×nh ph©n tÝch: Zorbax SB -C18 RP (3,0 × 150 mm),nãn 250 ml víi c¸c lo¹i dung m«i kh¸c nhau ë DAD v. MS. Thêi gian ch¹y 35 phót/phÐp ®o.50oC. Sau khi läc, dung m«i ®#îc cÊt lo¹i trªn §#êng chuÈn ®#îc x©y dùng b»ng ph#¬ng ph¸pbé quay cÊt ch©n kh«ng d#íi ¸p suÊt gi¶m thu håi qui tuyÕn tÝnh.®#îc c¸c cÆn dÞch chiÕt. ChuÈn bÞ mÉu ph©n tÝch: C¸c dÞch chiÕt C¸c hÖ dung m«i ®#îc kh¶o s¸t l.: axeton, (chiÕt xuÊt tõ qu¶ håi nh# m« t¶ ë b¶ng 1 v.EtOAc/EtOH (50/50), EtOH/Axeton (50/50), b¶ng 3) ®#îc pha trong metanol víi nång ®é 0,5EtOH/H2O (50/50), H2O, MeOH, EtOH. Qu¸ mg cÆn dÞch chiÕt/ml MeOH.tr×nh chiÕt víi EtOH ®#îc thùc hiÖn ë 50oC v.nhiÖt ®é phßng (xem chi tiÕt ë b¶ng 1). III - KÕt qu¶ v th¶o luËn *ChiÕt Soxhlet ...