Xây dựng bộ mẫu huyết thanh có nồng độ vi rút chuẩn cho chẩn đoán vi rút học bệnh sốt dengue sốt xuất huyết dengue

Đề tài "Xây dựng bộ mẫu huyết thanh có nồng độ vi rút chuẩn cho chẩn đoán vi rút học bệnh sốt dengue sốt xuất huyết dengue" với mục tiêu nghiên cứu về việc thiết lập quy trình xây dựng và đánh giá bộ mẫu huyết thanh có nồng độ vi-rút chuẩn cho chẩn đoán virút học bệnh SD/SXHD.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng bộ mẫu huyết thanh có nồng độ vi rút chuẩn cho chẩn đoán vi rút học bệnh sốt dengue sốt xuất huyết dengueY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010Nghiên cứu Y họcXÂY DỰNG BỘ MẪU HUYẾT THANH CÓ NỒNG ĐỘ VI-RÚT CHUẨN CHO CHẨN ĐOÁNVI-RÚT HỌC BỆNH SỐT DENGUE/SỐT XUẤT HUYẾT DENGUEPhan Thị Kim Liên*, Cao Minh Thắng*, Huỳnh Thị Kim Loan*, Hoàng Thị Như Đào*,Huỳnh Phương Thảo*, Nguyễn Thị Công Dung*, Đoàn Thị Minh Tâm*, Vũ Thị Quế Hương*TÓM TẮTĐặt vấn ñề: Bệnh sốt Dengue/sốt xuất huyết Dengue (SD/SXHD) là bệnh cấp tính ở người do vi-rút Dengue (DEN) gây ra vàlan truyền qua muỗi Aedes aegypti. Trong Chương trình Mục tiêu Quốc gia Phòng chống SXHD, giám sát vi-rút học bệnh SD/SXHDchủ yếu ñược tiến hành ở các viện khu vực. Việc chuẩn hóa kết quả xét nghiệm và kiểm tra chất lượng nội bộ dựa trên bộ mẫu huyếtthanh có nồng ñộ vi-rút chuẩn ñang ñược quan tâm giữa các viện.Mục tiêu nghiên cứu: Thiết lập quy trình xây dựng và ñánh giá bộ mẫu huyết thanh có nồng ñộ vi-rút chuẩn cho chẩn ñoán virút học bệnh SD/SXHD.Phương pháp nghiên cứu: Huyết thanh (HT) cấp tính của bệnh nhân SD/SXHD xác ñịnh bằng phân lập vi-rút trên nuôi tế bàomuỗi Aedes albopictus dòng C6/36 và RT-PCR ñược chuẩn ñộ hiệu giá vi-rút ñể thiết lập bộ mẫu HT có nồng ñộ vi-rút chuẩn chophân lập vi-rút và RT-PCR.Kết quả nghiên cứu: Các mẫu HT nghiên cứu có hiệu giá vi-rút DEN-1, -2, -3 là 105,77, 105,68, 105,77TCID50/mL tương ứng vớiCV < 1 % và ± 1 SD. Bộ mẫu HT có nồng ñộ vi-rút chuẩn cho chẩn ñoán vi-rút học bệnh SD/SXHD ñược thiết lập cho từng týp virút DEN riêng biệt với bộ thang nồng ñộ từ 101 ñến 105 TCID50/mL. Bộ mẫu HT chuẩn cho phép phân lập vi-rút DEN trên nuôi cấytế bào C6/36 sau 7 ngày ở nồng ñộ 103-104 TCID50/mL và sau 14 ngày ở nồng ñộ 101– 103 TCID50/mL theo phương pháp cấy, mật ñộtế bào ban ñầu và týp vi-rút DEN tương ứng. Ngoài ra, bộ mẫu HT chuẩn còn ñược phát hiện bằng RT-PCR DEN ở nồng ñộ 102TCID50/mL.Kết luận: Bộ mẫu HT có nồng ñộ vi-rút chuẩn góp phần quan trọng trong công tác kiểm tra chất lượng nội bộ và tiến trìnhchuẩn hóa phòng thí nghiệm ở các viện khu vực, cũng như tăng cường hiệu quả giám sát vi-rút học bệnh SD/SXHD.Từ khóa: Mẫu huyết thanh virus chuẩn, chẩn ñoán vi rút Dengue, vi rút Dengue, bệnh sốt xuất huyết Dengue.ABSTRACTSET-UP OF STANDARD SERUM PANELS WITH VIRUS TITRATIONS FOR VIROLOGICALDIAGNOSIS OF DENGUE FEVER/DENGUE HEMORRHAGIC FEVER.Phan Thi Kim Lien, Cao Minh Thang, Huynh Thi Kim Loan, Hoang Thi Nhu Da,Huynh Phuong Thao, Nguyen Thi Cong Dung, Doan Thi Minh Tam, Vu Thi Que Huong* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 14 - Supplement of No 2 – 2010: 274 - 279Background: Dengue fever/Dengue hemorrhagic fever (DF/DHF) is acute human diseases caused by dengue (DEN) virusestransmitting by Aedes aegypti. In National Program for Dengue control, virological surveillance of DF/DHF is mainly performed inregional institutes. The standardization of test results and internal quality control based on standard serum panels with virustitrations is considering between institutions.Objectives: To establish the procedures for set-up and assessment of standard serum panels with virus titrations using invirological diagnosis of DF/DHF.Method: Acute sera of DF/DHF patients confirmed by virus isolation in C6/36 clone Aedes albopictus mosquito cell cultureand reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) were titrated to establish the standard serum panels with virustitrations for virus isolation and RT-PCR methods.Result: Study acute sera infected DEN-1, -2, -3 virus serotypes having the virus titers of 105,77, 105,68, 105,77TCID50/mL,respectively with Coefficient of Variation (CV) < 1 %, and ± 1 SD (Standard Deviation). The standard serum panels with virustitrations using in DF/DHF virological diagnosis were establish for each DEN virus serotype and virus titrations from 101 to 105TCID50/mL. The standard serum panels can be detected at 103-104 TCID50/mL after 7 infectious days and at 101–103 TCID50/mL after14 infectious days by virus isolation technique using different inoculated methods, primary mosquito cell culture concentrations andDEN virus serotypes, respectively. Moreover, this standard serum panels can also be detected at 102 TCID50/mL by DENRT-PCR.Conclusion: Standard serum panels with virus titrations have an important part in internal quality control and laboratorystandardization process in regional institutions as well as improving the effective virological surveillance of DF/DHF.*Khoa Vi Sinh Miễn Dịch, Viện Pasteur Thành Phố Hồ Chí MinhĐịa chỉ liên lạc:TS. Vũ Thị Quế HươngĐT: 0903 618 809Email: quehuong@pasteur-hcm.org.vnHội nghị Khoa học Kỹ thuật Viện Y Tế Công Cộng năm 2009 - 2010274Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010Nghiên cứu Y họcKeywords: Standard serum panels virus, diagnosis Dengue virus, Dengue virus, Dengue hemorrhagic fever disease.hạn phát hiện vi-rút DEN của ...