XÂY DỰNG MÔ HÌNH GÂY NHIỄM CANDIDA ALBICANSÂM ĐẠO CHUỘT NHẮT TRẮNG

Mục tiêu: xây dựng mô hình gây bệnh Candida albicans âm đạo ở chuột nhắt trắng và áp dụng được mô hình vào nghiên cứu tác dụng của các chất kháng nấm ở in vivo.Phương pháp: chuột nhắt trắng cái, cân nặng khoảng 18 -22g, chưa sinh sản, được gây nhiễm vi nấm Candida albicans ATCC 10231 vào âm đạo sau khi làm suy yếu hệ miễn dịch bằng Estradiol valerat (EV) và gây rối loạn vi khuẩn chí trong âm đạo với Cloramphenicol theo 5 mô hình khác nhau về liều lượng và thời gian. Các lô chuột bị...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
XÂY DỰNG MÔ HÌNH GÂY NHIỄM CANDIDA ALBICANSÂM ĐẠO CHUỘT NHẮT TRẮNG XÂY DỰNG MÔ HÌNH GÂY NHIỄM CANDIDA ALBICANS ÂM ĐẠO CHUỘT NHẮT TRẮNG TÓM TẮT Mục tiêu: xây dựng mô hình gây bệnh Candida albicans âm đạo ở chuộtnhắt trắng và áp dụng được mô hình vào nghiên cứu tác dụng của các chất khángnấm ở in vivo. Phương pháp: chuột nhắt trắng cái, cân nặng khoảng 18 -22g, chưa sinhsản, được gây nhiễm vi nấm Candida albicans ATCC 10231 vào âm đạo sau khilàm suy yếu hệ miễn dịch bằng Estradiol valerat (EV) và gây rối loạn vi khuẩn chítrong âm đạo với Cloramphenicol theo 5 mô h ình khác nhau về liều lượng và thờigian. Các lô chuột bị viêm âm đạo do Candida gây nhiễm sẽ được điều trị bằngclotrimazol để khảo sát các tiêu chuẩn đánh giá mức độ bệnh của chuột sau gâynhiễm. Kết quả: có thể gây nhiễm C. albicans âm đạo chuột để thử tác dụng củacác chất kháng nấm in vivo bằng mô hình: cloramphenicol 1%, tiêm 2ml/ngày x 7ngày trước gây nhiễm, Estradiol valerat 0,05mg/100ml tiêm dưới da trong 3 ngàytrước gây nhiễm, 3 ngày trong gây nhiễm và 2 ngày sau gây nhiễm, tiêm 20ml C.albicans 106 CFU/ml. Kết luận: một số điều kiện gây suy giảm miễn dịch và rối loạn cân bằng visinh ở âm đạo chuột nhắt trắng đã được dò tìm để đưa ra mô hình gây nhiễm bệnhthực nghiệm C. albicans âm đạo trên chuột nhắt trắng. Mô hình này có thể áp dụngđể thử tác dụng kháng C. albicans của các chất kháng nấm in vivo. ABSTRACT Objectives: Desining a protocol for the infection by Candida albicans at thevagina of the white mouse. Applying this protocol to test in vivo the action ofantifungus substances. Methods: Test animals were young female white mice, of 18- 22g weigh,and no previous birth experience. Estradiol valerat (EV) treatment had weakenedtheir immunity system, and 5 different treaments of Cloramphenicol on quantityand time had disturbed the micro flora of their vagina. The micro-organism strainwas Candida albicans ATCC 10231. Clotrimazol will treat samples of mic that gotvagina inflamation by Candida infection. Hence their sicness degree will beevaluated and will constitute criteria for clinical examination. Results: the C. albicans infection of the mouse vagina was done by thisprescription: Cloramphenicol 1% injection 2µl/day, on 7 days beforecontamination; Estradol valerate 0.05 mg/100ml under -skininjection on 3 daysbefore contamination, on 3 days during contamination and on 2 days aftercontamination. Contamination by injection of 20µl C. albicans 10 6 CFU/ml. Conclusions: Determining the conditions of weakening the immune systemof the mouse, disturbing the balance of micro flora in the vagina o f white mouse,and the protocol for experimental infection of C. albicans vagina. This protocolcan be used in the test in vivo of antifungus action on C. albicans. ĐẶT VẤN ĐỀ Candida albicans là vi nấm sống hoại sinh ở da và niêm mạc, có thể gâybệnh khi gặp cơ hội, hiện nay bệnh do Candida rất thường gặp ở người suy giảmmiễn dịch. Ngoài việc thường gây bệnh, kháng thuốc còn là vấn đề được đặt ra gầnđây với nhóm nấm này. Vì vậy, việc sử dụng kháng sinh kháng nấm hợp lý trongđiều trị cũng như tìm thêm thuốc mới kháng Candida được xem là vấn đề cấpthiết. Từ yêu cầu trên, chuẩn hóa mô hình xác định hoạt lực kháng sinh kháng nấmin vitro và in vivo đang được quan tâm. Hiện nay để xác định hoạt lực các chấtkháng nấm in vitro trên nấm men, NCCLS đã đưa ra qui trình thử nghiệm chuẩnM27- A2, bên cạnh đó một số mô hình xác định mức độ tác dụng của thuốc khángnấm in vivo trên C. albicans cũng đã được đề nghị. Tuy nhiên mô hình gây nhiễmbệnh Candida âm đạo ở thú chỉ mới được thực bước đầu trên chuột cống (1) (3). Vìvậy, mục tiêu của đề tài này nhằm xây dựng được mô hình gây bệnh Candidaalbicans âm đạo ở chuột nhắt trắng, dễ tìm hơn chuột cống trắng, và áp dụng đượcmô hình này trong nghiên cứu tác dụng của các chất kháng nấm ở in vivo. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Nguyên liệu Chuột nhắt trắng cái, trong lượng từ 18-22 g, chưa sinh sản. Vi nấm Candida albicans ATCC 10231 Estradiol valerat (EV), Cloramphenicol Môi trường Sabouraud, thạch bột ngô. Phương pháp Nguyên tắc xây dựng mô hình: bệnh Candida không phải là bệnh tự nhiên ởchuột, vì vậy để gây được bệnh cho chuột cần thiết phải gây suy giảm miễn dịchvà xáo trộn cân bằng tự nhiên ở âm đạo chuột bằng cách sử dụng estradiol valerat(3) (4) và cloramphenicol theo sơ đồ sau: Chuột nuôi quen chuồng Estradiol valerat/cloramphenicol Gây nhiễm Cấy + phết ướt Thời gian (ngày) Sơ đồ 1. Các bước thực hiện mô hình gây nhiễm Candida âm đạo chuộtnhắt trắng Chi tiết tr ...