Xây dựng qui trình định lượng clonidin trong huyết tương thỏ bằng phương pháp HPLC với đầu dò PDA

Tại Việt Nam, thuốc dán thấm qua da clonidin 2,5 và 7,5 mg đã được khoa dược, Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh bào chế thành công. Bước tiếp theo của đề tài là tiến hành xác định sinh khả dụng của thuốc. Vì vậy đề tài “Xây dựng qui trình định lượng clonidin trong huyết tương thỏ bằng phương pháp HPLC với đầu dò PDA” đã được thực hiện.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng qui trình định lượng clonidin trong huyết tương thỏ bằng phương pháp HPLC với đầu dò PDANghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014XÂY DỰNG QUI TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG CLONIDINTRONG HUYẾT TƯƠNG THỎ BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLCVỚI ĐẦU DÒ PDATrần Quốc Thanh*, Lê Quan Nghiệm*, Huỳnh Văn Hóa*, Lê Hậu*, Trương Quốc Kỳ*, Nguyễn Đức Tuấn*TÓM TẮTĐặt vấn đề - Mục tiêu nghiên cứu: Dạng thuốc dán hấp thu qua da với dược chất clonidin đã được pháttriển với tên thương mại là Catapres. Cho đến nay, chuyên luận thuốc dán clonidin chỉ có trong Dược điển Mỹ.Trên thế giới chỉ có một vài công trình công bố qui trình định lượng clonidin được phóng thích từ thuốc dánCatapres trong huyết tương thỏ bằng phương pháp LC-MS. Tại Việt Nam, thuốc dán thấm qua da clonidin 2,5 và7,5 mg đã được Khoa Dược, Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh bào chế thành công. Bước tiếp theo của đềtài là tiến hành xác định sinh khả dụng của thuốc. Vì vậy đề tài “Xây dựng qui trình định lượng clonidin tronghuyết tương thỏ bằng phương pháp HPLC với đầu dò PDA” đã được thực hiện.Đối tượng - Phương pháp nghiên cứu: Thăm dò điều kiện chiết clonidin từ huyết tương thêm clonidinchuẩn bằng phương pháp tủa protein và chiết pha rắn. Thăm dò các điều kiện sắc ký về pha động: không có dungdịch đệm, sử dụng dung dịch đệm, thêm vào một tác nhân tạo cặp ion.Kết quả: Đã xác định được điều kiện thích hợp để chiết clonidin từ huyết tương thêm clonidin chuẩn vớihiệu suất chiết khoảng 70% và có độ lặp lại cao. Đã xác định được điều kiện sắc ký thích hợp để định lượngclonidin trong huyết tương thỏ. Qui trình định lượng đã được thẩm định đạt yêu cầu theo hướng dẫn của FDAHoa Kỳ. Cuối cùng, qui trình đã được ứng dụng để định lượng clonidin trong một số mẫu huyết tương thỏ saukhi được dán thuốc thử nghiệm.Kết luận: Đề tài đã xây dựng thành công qui trình HPLC-PDA định lượng clonidin trong huyết tương thỏ.Qui trình có thể được tiếp tục ứng dụng để đánh giá sinh khả dụng in vivo của thuốc trên huyết tương thỏ.Từ khóa: Clonidin, huyết tương thỏ, sắc ký lỏng hiệu năng cao.ABSTRACTQUANTITATIVE DETERMINATION OF CLONIDINE IN RABBIT PLASMA BY HIGHPERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY WITH PHOTO DIODE ARRAY DETECTORTran Quoc Thanh, Le Quan Nghiem, Huynh Van Hoa, Le Hau, Truong Quoc Ky, Nguyen Duc Tuan* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 - Supplement of No 2 - 2014: 14 - 20Introduction - Aims: Transdermal patches containing clonidine have been launched into global marketunder trade name Catapres–TTS (Transdermal Therapeutic System) for a long time. So far, there’s only TTSmonograph clonidine in USP. Liquid chromatography coupled with mass spectrometry has recently been appliedfor measurement of clonidine in rabbit plasma. In Vietnam, transdermal therapeutic system of clonidine 2.5 mgand 7.5 mg has been successfully prepared by Faculty of Pharmacy, University of Medicine and Pharmacy at HoChi Minh City. Therefore, the aim of this study was to develop a simple HPLC-PDA method for quantitativedetermination of clonidine in rabbit plasma.Subjects and Methods: Protein precipitation and solid phase extraction were applied for clonidineextraction from rabbit plasma. Several chromatographic conditions such as mobile phase including buffer, without* Khoa Dược, Đại học Y Dược TP. Hồ Chí MinhTác giả liên lạc: ThS. Trần Quốc Thanh - ĐT: 0903 389 214 - Email: tranquocthanhdhyd@yahoo.com14Chuyên Đề Dược HọcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014Nghiên cứu Y họcbuffer, or added to one ion pair agent, were investigated.Results: The protein precipitation was successfully applied for clonidine extraction from rabbit plasma withrecovery of 70% and high repeatability. The appropriate chromatographic conditions were found out forquantitative determination of clonidine from rabbit plasma. The liquid chromatographic method was validated andsatisfied all requirements under the guidance of US FDA. Finally, the validated method could be a reliablestatement concerning quantitative determination of clonidine in rabbit plasma.Conclusion: A simple HPLC-PDA method was successfully developed for quantitative determination ofclonidine in rabbit plasma. The method can be further applied for clonidine quantitation in in vivo bioavailabilitystudy of transdermal patches.Key words: Clonidine, rabbit plasma, HPLC.ĐẶT VẤN ĐỀDạng thuốc dán hấp thu qua da(Transdermal Therapeutic System – TTS) ngàycàng được quan tâm phát triển rộng rãi do có rấtnhiều ưu điểm so với thuốc viên. Thuốc dánđiều trị tăng huyết áp đầu tiên ra đời là chếphẩm Catapres – TTS chứa dược chất clonidin.Cho đến nay, chuyên luận thuốc dán clonidinchỉ có trong Dược điển Mỹ(3). Trên thế giới chỉ cómột công trình công bố qui trình định lượngclonidin được phóng thích từ thuốc dánCatapres trong huyết tương thỏ bằng phươngpháp LC-MS(2). Tại Việt Nam, thuốc dán thấmqua da clonidin 2,5 và 7,5mg đã được KhoaDược, Đại h ...