Xây dựng quy trình định lượng apigenin trong dược liệu bán chi liên (scutellaria barbata D.don) bằng phương pháp điện di mao quản (CE)

Mục tiêu nghiên cứu nhằm xây dựng quy trình định lượng apigenin trong dược liệu Bán chi liên bằng phương pháp điện di mao quản CE. Nghiên cứu được thực hiện trên 5 mẫu Bán chi liên thu mua tại Hà Nội, Nghệ An, Bình Định, Đắc Lắc và Thành phố Hồ Chí Minh.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng quy trình định lượng apigenin trong dược liệu bán chi liên (scutellaria barbata D.don) bằng phương pháp điện di mao quản (CE) Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014 XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG APIGENIN TRONG DƯỢC LIỆU BÁN CHI LIÊN (SCUTELLARIA BARBATA D.DON) BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI MAO QUẢN (CE) Ngô Thị Thanh Diệp*, Nguyễn Thị Huyền Thương* TÓM TẮT Mục tiêu: Xây dựng quy trình định lượng apigenin trong dược liệu Bán chi liên bằng phương pháp điện di mao quản CE. Đối tượng và phương pháp: Đối tượng nghiên cứu là apigenin có trong dược liệu Bán chi liên. Nghiên cứu được thực hiện trên 5 mẫu Bán chi liên thu mua tại Hà Nội, Nghệ An, Bình Định, Đắc Lắc và Thành phố Hồ Chí Minh. Tiến hành khảo sát các thông số cho quy trình định lượng. Từ đó, xây dựng và thẩm định quy trình định lượng apigenin và áp dụng quy trình này để xác định hàm lượng apigenin trong các mẫu thu thập được. Kết quả: Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng apigenin bằng phương pháp điện di mao quản với các thông số: Bước sóng phát hiện268 nm, Dung dịch đệm borat kiềm pH = 8,8, nồng độ đệm 40 mM, điện thế 15 kV, thời gian tiêm mẫu 2 s, nhiệt độ cột mao quản 25 0C, thời gian điện di 15 phút. Quy trình định lượng đạt tính đặc hiệu, tính phù hợp của hệ thống với RSD của mẫu chuẩn và mẫu thử sau 6 lần tiêm mẫu lần lượt là 3,11% và 2,96%, khoảng tuyến tính của apigenin ở nồng độ 20 – 150 μg/ml (R2 = 0,9995), độ lặp lại của phương pháp với RSD = 3,71%, độ đúng với tỷ lệ phục hồi cao. Sử dụng quy trình đã xây dựng xác định hàm lượng apigenin trong 5 mẫu dược liệu được thu mua tại Hà Nội, Nghệ An, Bình Định, Đắc Lắc và Thành phố Hồ Chí Minh thu được kết quả lần lượt là 1,82 mg/g, 0,60 mg/g, 2,74 mg/g, 3,07 mg/g, 2,85 mg/g. Kết luận Hàm lượng apigenin trong các mẫu Bán chi liên khá cao khoảng từ 1,80 – 3,10 mg/g, trong đó đặc biệt thấp ở mẫu Nghệ An (chỉ khoảng 0,60 mg/g). Từ khóa: Bán chi liên, apigenin, điện di mao quản. ABSTRACT QUANTITATIVE DETERMINATION OF APIGENIN IN THE HERBAL BAN CHI LIEN (SCUTELLARIA BARBATA D. DON) BY CAPILLARY ELECTROPHORESIS Ngo Thi Thanh Diep, Nguyen Thi Huyen Thuong * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 - Supplement of No 2 - 2014: 144 - 149 Objective: Quantitative procedure of apigenin by capillary electrophoresis method Materials and methods: Object in the study is apigenin in the herbal Ban chi lien. The study was made on 5 Ban chi lien samples purchased in Hanoi city, Nghe An, Binh Dinh, Dak Lak province and Ho Chi Minh city. Since then, development and evaluation of quantitative procedure apigenin is conducted by capillary electrophoresis methods. Using established and evaluated method for determination quantitative of apigenin in collected Ban chi lien samples. Results: Developed and evaluated the quantitative procedure of apigenin by capillary electrophoresis methods with parameters: wavelength detection 268 nm, buffer solution alkaline borate pH = 8.8, buffer concentration 40 mM, voltage 15 kV, sample injection time 2 s, capillary column temperature 25 0C, developed time 15 minutes. Quantitative procedure has specificity,compatibility of CE system with RSD of the standard * Khoa Dược, Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: DS.Ngô Thị Thanh Diệp ĐT: 01226671588 144 Email: thanhdiep73@yahoo.com Chuyên Đề Dược Học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 2 * 2014 Nghiên cứu Y học sample and samples are respectively 3.110% and 2.957%, linearity of apigenin is 20 –150 μg/ml (R2 = 0.9995), repeatability of the parameters of the method with RSD = 3.71%, the recovery rate was good. Applying the developed procedure to determine apigenin in 5 samples purchased at Hanoi City, Nghe An, Binh Dinh, Dak Lak province and Ho Chi Minh City, obtained results are respectively 1.82 mg/g, 0.60 mg/g, 2.74 mg/g, 3.07 mg/g, 2.85 mg/g. Conclusion: Apigenin concentrations in the samples Ban chi lien are quite high in range from 1.80 to 3.10 mg/g, but the one in Nghe An province is specially low (only about 0.60 mg/g). Keywords: Scutellaria barbata D. Don, apigenin, capillary electrophoresis. ĐẶT VẤN ĐỀ: Bán chi liên Scutellaria barbata D. Don là một loại cây thân thảo thuộc họ Hoa môi (Lamiaceae). Cây thuốc này có mặt trong nhiều bài thuốc dân gian với tác dụng thanh nhiệt giải độc, lợi tiểu tiêu sưng, giảm đau và chống khối u tân sinh. Các nghiên cứu về thành phần hóa học cho thấy sự có mặt của flavon apigenin – một flavon có tính kháng khuẩn, kháng viêm, chống ôxy hoá cao trong dược liệu Bán chi liên với hàm lượng đáng kể. Ở nước ta, Bán chi liên được nhân dân sử dụng nhiều nhưng nguồn dược liệu này chủ yếu vẫn nhập từ Trung Quốc, chưa có tiêu chuẩn kiểm tra chất lượng cho dược liệu.Vì vậy, mục tiêu của đề tài này là xây dựng quy trình định lượng apigenin trong dược liệu Bán chi liên để góp phần tiêu chuẩn hóa, kiểm soát chất lượng dược liệu này. Phương pháp điện di mao quản được lựa chọn do có tính chọn lọc cao cho phép xác đị ...