Bài giảng Vi sinh vật học đại cương: Chương 6 - ThS. Trịnh Ngọc Nam

Chương 6 đề cập đến những vấn đề kỹ thuật và phương pháp tạo giống vi sinh vật. Thông qua chương này người học sẽ biết được các yêu cầu về chất lượng giống; biết được phương pháp tạo giống – phương pháp phân lập, phương pháp tạo giống – đột biến và biết được phương pháp giữ giống vi sinh vật.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Vi sinh vật học đại cương: Chương 6 - ThS. Trịnh Ngọc Nam ChươngVI:NHỮNGVẤNĐỀKỸTHUẬT VÀPHƯƠNGPHÁPTẠO GIỐNGVISINHVẬTI.YÊUCẦUCHẤTLƯỢNGGIỐNG Sảnlượngcao,thuầnkhiết,dễtách Sửdụngnguyênliệurẻtiền,dễtìm Thuầnchủng Khỏe,pháttriểnnhanh Cókhảnăngchốngtạpnhiễm Dễbảoquản,ổnđịnh Cókhảnăngcảitạo I.YÊUCẦUCHẤTLƯỢNGGIỐNGCáctrungtâmgiữgiốngvisinhvật •ABBOTT:AbbottLaboratories,NorthChicago,III.60064,USA. •ATCC:AmericanTypeCulturCollection,12301,ParklawnDriveRockvillMd 20852,USA. •CANAD–212:DivisionObioscience,NationalResearchCouncil,Ottawa, Canada. •CC:CRISODivisionofPlantIndustry,CanberraCity,A.C.T.Australia. •FERM:FermentationReseachinstitute,AgencyofIndustrialScienceand Technology,MinistryofIndustrialTradeandindustry,Chiba,Japan. •HIR:FoodandFermentationDivision,HokkaidoProfecturalIndustrialResearch Institute,Sapporo,Japan. •IMASP:MuseumofCulture,InstituteofMicrobiology,AcademyofScienceof RepublicofChinaPeking,China. II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNGPhânlập Độtbiếnnhântạo Laitạogen II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–PHƯƠNGPHÁPPHÂNLẬP II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–PHƯƠNGPHÁPPHÂNLẬPTínhlượngVSVsaukhiphalõang 1.Chọnhộppetrichứa:45colonies(thuộcốngnghiệmth ứ2). 2.Tổngđộphalõangcủaồngnghiệmthứ2là 1/102(99+1)(ốngnghiệm1)x1/10(=10/(10+90)( ốngnghi ệm2)=1/10 3 3.Lượngmẫudùngđểđổđĩalà=0.1ml=1/10. 45colonies VậylượngVSVcótrongmẫulà: 1 1 45 103 4.5 105 450000 / ml 103 10 II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–PHƯƠNGPHÁPPHÂNLẬP Bàitập II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–PHƯƠNGPHÁPPHÂNLẬP Đổđĩa II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–PHƯƠNGPHÁPPHÂNLẬP Cấyria II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–ÐỘTBIẾN Loạiđộtbiến Bảnchấtcácthayđổi Dấuhiệupháthiệnđộtbiến Mấttiênmao,hoặctiênmao Các khuẩn lạc mọc dính vào Khôngdiđộng khônghoạtđộng nhau. Không tạo nha Mất hoặc thay đổi bề mặt Khuẩnlạcbé,xùxìthayvìlớn, bào màngnhầy tròn,bóng. Mất hoặc thay đổi lớp bên Khuẩn lạc nhiều hạt nhỏ, Khuẩnlạcxùxì ngoàilipopolysaccharide khôngđều Mấtmộthoặcnhiềuenzym Không mọc trên môi trường Dinhdưỡng trên con đường sinh tỏng tổnghợptốithiểu hợp Không tạo ra sự biến đổi màu Mất enzym phân giải các Lênmenđường trên môi trường đặc trưng với loạiđường chỉthịmàuđặctrưng.II.PHƯƠNGPHÁPTẠOGIỐNG–ÐỘTBIẾN Loạiđộtbiến Bảnchấtcácthayđổi Dấuhiệupháthiệnđộtbiến Thay đổi khả năng thẩm thầu, Mọc trên môi trường có thuốc ở ngăn cản sự xâm nhập vào tế bào nồng độ mà bình thường có thể Khángthuốc của các loại thuốc, hoặc phá hủy gây ức chế phát triển của vi sinh cácthuốc. vật. Phát triển trên môi trường nuôi Khángvirút Mấtđiểmtiếpnhânvirút cấy khi có mặt virút ở nồng độ cao. Nhạy cảm với Cókhảnăngpháttriển ởnhiệtđộ Thayđổimộtproteinthiếtyếulàm nhiệt độ bình thấp. Nhưng ở nhiệt độ bình tăngsựnhạycảmvớinhiệtđộ thường thườngkhôngpháttriển. Mất các enzym có khả năng tham Khuẩnlạccómàukháchoặcmất Mấtsắctố giatổnghợpsắctố màuII.PHƯƠNGPHÁPGIỮGIỐNGVISINHVẬT Phươngphápcấytruyềnđịnhkỳtrênmôitrườngmới: Sửdụngthạchnghiêng. Nấmmốc:cấytruyềnsau3–6tháng Nấmmen,vikhuẩn:cấytruyềnsau1–2 ...