Bệnh vi khuẩn mới nổi nguy hiểm ở cá hồi vân và nghiên cứu ứng dụng liệu pháp thực khuẩn thể trong phòng trị bệnh
Số trang: 12
Loại file: pdf
Dung lượng: 1,019.45 KB
Lượt xem: 1
Lượt tải: 0
Xem trước 2 trang đầu tiên của tài liệu này:
Thông tin tài liệu:
Bài viết tiến hành để phân lập và xác định tác nhân gây bệnh, tìm kiếm và thử nghiệm liệu pháp thực khuẩn thể để thay thế kháng sinh trong phòng trị bệnh cho cá hồi vân (rainbow trout). 36 chủng vi khuẩn đã được phân lập từ cá hồi vân bị bệnh trên cơ sở chẩn đoán khẳng định bằng phản ứng sinh hóa, 16S rRNA và PCR.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bệnh vi khuẩn mới nổi nguy hiểm ở cá hồi vân và nghiên cứu ứng dụng liệu pháp thực khuẩn thể trong phòng trị bệnh KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ 2 - 2019 BEÄNH VI KHUAÅN MÔÙI NOÅI NGUY HIEÅM ÔÛ CAÙ HOÀI VAÂN VAØ NGHIEÂN CÖÙU ÖÙNG DUÏNG LIEÄU PHAÙP THÖÏC KHUAÅN THEÅ TRONG PHOØNG TRÒ BEÄNH Trương Đình Hoài1,3, Nguyễn Văn Tuyến1,3, Nguyễn Thị Hương Giang2, Kim Văn Vạn1 TÓM TẮT Nghiên cứu này đã được tiến hành để phân lập và xác định tác nhân gây bệnh, tìm kiếm và thửnghiệm liệu pháp thực khuẩn thể để thay thế kháng sinh trong phòng trị bệnh cho cá hồi vân (rainbowtrout). 36 chủng vi khuẩn đã được phân lập từ cá hồi vân bị bệnh trên cơ sở chẩn đoán khẳng địnhbằng phản ứng sinh hóa, 16S rRNA và PCR. Thực khuẩn thể Pwr-1 lần đầu tiên đã được sàng lọcvà phân lập thành công trong nghiên cứu này. Chủng thực khuẩn thể thuộc họ virus Siphoviridae, cóđường kính đầu khoảng 65 nm và đuôi dài 170-180 nm. Thực khuẩn thể xâm nhập và nhân lên trongtế bào vi khuẩn gây bệnh trong thời gian 25 phút và giải phóng 16 thực khuẩn thể mới sau khi tiêudiệt một tế bào vi khuẩn. Chủng thực khuẩn thể tồn tại tốt ở khoảng pH rộng và nhiệt độ tương đốicao. Liệu pháp thực khuẩn thể đã được sử dụng để điều trị bệnh trong điều kiện in vitro cho thấy thựckhuẩn thể có thể diệt 100% (36/36) chủng vi khuẩn gây bệnh, với tốc độ rất nhanh và mạnh. Kết quảnghiên cứu mở ra hướng điều trị mới thay thế kháng sinh nhằm giảm thiểu tình trạng kháng khángsinh, nâng cao chất lượng và an toàn sinh học cho loài cá nuôi có giá trị kinh tế cao này. Từ khóa: Weissellosis, bệnh mới, chẩn đoán, cá hồi, liệu pháp thực khuẩn thể. A newly emerging bacterial pathogen caused outbreaks of rainbow trout worldwide and phage therapy Truong Dinh Hoai, Nguyen Van Tuyen, Nguyen Thi Huong Giang, Kim Van Van SUMMARY This study was conducted to isolate the pathogens and to screen the bacteriophage (phage)for therapeutic application. A total of 36 W. ceti strains were isolated successfully from thediseased fish and confirmed by biochemical tests, 16S rRNA and PCR assay. Herein, in thefirst time, the Pwr-1 phase was screened and isolated successfully, which is a novel virulentbacteriophage pathogen as a good candidate for therapeutic application. The phage belongedto the family of Siphoviridae, possessed an isometric head approximately 65nm in diameter anda flexible, non-contractile tail of 170-180 nm in length. Latent time and burst size of phage wasabout 25 min and 16 PFU/ infected cell, respectively. Phage exhibited to be relatively stablewith wide range of pH and temperature. Phage had wide host range, lysed all 36/36 tested W.ceti strains. This is the first study to investigate a virulent bacteriophage of newly emergingpathogen infecting rainbow trout with various features making it become a highly potential agentfor the therapeutic application in the future alternatives for antibiotic uses. Keywords: Weissellosis, emerging disease, diagnosis, Rainbow trout, phage therapy.I. ĐẶT VẤN ĐỀ xuất hiện và gây ra bởi vi khuẩn Weissella ceti trên cá hồi vân (Oncorhynchus mykiss), chúng Weissellosis là một bệnh nguy hiểm, mới đã được báo cáo ở Trung Quốc, Brazil, Hoa Kỳ1. Khoa Thủy sản, Học viện Nông nghiệp Việt Nam và Nhật Bản (Liu, Li et al., 2009; Figueiredo et2. Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam3. Khoa Nông nghiệp, Đại học Miyazaki, Nhật Bản 49KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ 2 - 2019al., 2012; Welch và Good, 2013; Mitomi et al., II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP2018). Sự xuất hiện của W. ceti trên 3 lục địa NGHIÊN CỨUkhác nhau cho thấy rằng W. ceti là một tác nhân 2.1. Phân lập, nuôi cấy và định danh vi khuẩngây bệnh nguy hiểm mới, cần phải tập trung vàoviệc ngăn chặn sự lây lan của nó để phát triển Các mẫu cá hồi bệnh được phân lập từ cácbền vững ngành công nghiệp nuôi cá hồi. trại cá hồi từ năm 2012 đến năm 2016 tại các trang trại khu vực Kyushu, Nhật Bản. Các thông Bệnh Weissellosis chủ yếu ảnh hưởng đến cá tin liên quan về trọng lượng cá, các biểu hiệntrưởng thành (0,5 - 1,0 kg) và tỷ lệ tử vong của bệnh tích bên ngoài và bên trong cơ thể cá bệnhcá nhiễm bệnh tăng cao hơn khi lượng cơ thể cá cũng như các điều kiện môi trường tại thời điểmtăng. Cá bị nhiễm bệnh thường có dấu hiệu: lồi thu mẫu được ghi chép. Vi khuẩn gây bệnh đượcmắt, xuất huyết ở mắt, mang và xương nắp mang, phân lập từ thận của cá bệnh, sau đó nuôi cấymiệng, hậu môn, đường ruột, xoang bụng và trên thạch ToddHewitt (Difco) bổ sung 5% máugan (Figueiredo et al., 2012; Welch et al., 2013; cừu (thạch máu THA). Các chủng vi khuẩn sauWelch và Good, 2013). Do đó bệnh Weissellosis khi phân lập được bảo quản đông lạnh ở nhiệtgây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng cho người nuôi độ -80°C. Tổng cộng có 36 chủng vi khuẩn cá hồi vân ở nhiều nước. Các chủng phân lập từ phân lập đã được sử dụng trong nghiên cứu này.các quốc gia khác nhau có sự tương đồng cao về Ngoài ra, 1 chủng vi khẩn W. ceti (CECT7719) trình tự gen 16S rRNA và bệnh này được dự đoán phân lập được từ cá ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bệnh vi khuẩn mới nổi nguy hiểm ở cá hồi vân và nghiên cứu ứng dụng liệu pháp thực khuẩn thể trong phòng trị bệnh KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ 2 - 2019 BEÄNH VI KHUAÅN MÔÙI NOÅI NGUY HIEÅM ÔÛ CAÙ HOÀI VAÂN VAØ NGHIEÂN CÖÙU ÖÙNG DUÏNG LIEÄU PHAÙP THÖÏC KHUAÅN THEÅ TRONG PHOØNG TRÒ BEÄNH Trương Đình Hoài1,3, Nguyễn Văn Tuyến1,3, Nguyễn Thị Hương Giang2, Kim Văn Vạn1 TÓM TẮT Nghiên cứu này đã được tiến hành để phân lập và xác định tác nhân gây bệnh, tìm kiếm và thửnghiệm liệu pháp thực khuẩn thể để thay thế kháng sinh trong phòng trị bệnh cho cá hồi vân (rainbowtrout). 36 chủng vi khuẩn đã được phân lập từ cá hồi vân bị bệnh trên cơ sở chẩn đoán khẳng địnhbằng phản ứng sinh hóa, 16S rRNA và PCR. Thực khuẩn thể Pwr-1 lần đầu tiên đã được sàng lọcvà phân lập thành công trong nghiên cứu này. Chủng thực khuẩn thể thuộc họ virus Siphoviridae, cóđường kính đầu khoảng 65 nm và đuôi dài 170-180 nm. Thực khuẩn thể xâm nhập và nhân lên trongtế bào vi khuẩn gây bệnh trong thời gian 25 phút và giải phóng 16 thực khuẩn thể mới sau khi tiêudiệt một tế bào vi khuẩn. Chủng thực khuẩn thể tồn tại tốt ở khoảng pH rộng và nhiệt độ tương đốicao. Liệu pháp thực khuẩn thể đã được sử dụng để điều trị bệnh trong điều kiện in vitro cho thấy thựckhuẩn thể có thể diệt 100% (36/36) chủng vi khuẩn gây bệnh, với tốc độ rất nhanh và mạnh. Kết quảnghiên cứu mở ra hướng điều trị mới thay thế kháng sinh nhằm giảm thiểu tình trạng kháng khángsinh, nâng cao chất lượng và an toàn sinh học cho loài cá nuôi có giá trị kinh tế cao này. Từ khóa: Weissellosis, bệnh mới, chẩn đoán, cá hồi, liệu pháp thực khuẩn thể. A newly emerging bacterial pathogen caused outbreaks of rainbow trout worldwide and phage therapy Truong Dinh Hoai, Nguyen Van Tuyen, Nguyen Thi Huong Giang, Kim Van Van SUMMARY This study was conducted to isolate the pathogens and to screen the bacteriophage (phage)for therapeutic application. A total of 36 W. ceti strains were isolated successfully from thediseased fish and confirmed by biochemical tests, 16S rRNA and PCR assay. Herein, in thefirst time, the Pwr-1 phase was screened and isolated successfully, which is a novel virulentbacteriophage pathogen as a good candidate for therapeutic application. The phage belongedto the family of Siphoviridae, possessed an isometric head approximately 65nm in diameter anda flexible, non-contractile tail of 170-180 nm in length. Latent time and burst size of phage wasabout 25 min and 16 PFU/ infected cell, respectively. Phage exhibited to be relatively stablewith wide range of pH and temperature. Phage had wide host range, lysed all 36/36 tested W.ceti strains. This is the first study to investigate a virulent bacteriophage of newly emergingpathogen infecting rainbow trout with various features making it become a highly potential agentfor the therapeutic application in the future alternatives for antibiotic uses. Keywords: Weissellosis, emerging disease, diagnosis, Rainbow trout, phage therapy.I. ĐẶT VẤN ĐỀ xuất hiện và gây ra bởi vi khuẩn Weissella ceti trên cá hồi vân (Oncorhynchus mykiss), chúng Weissellosis là một bệnh nguy hiểm, mới đã được báo cáo ở Trung Quốc, Brazil, Hoa Kỳ1. Khoa Thủy sản, Học viện Nông nghiệp Việt Nam và Nhật Bản (Liu, Li et al., 2009; Figueiredo et2. Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam3. Khoa Nông nghiệp, Đại học Miyazaki, Nhật Bản 49KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ 2 - 2019al., 2012; Welch và Good, 2013; Mitomi et al., II. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP2018). Sự xuất hiện của W. ceti trên 3 lục địa NGHIÊN CỨUkhác nhau cho thấy rằng W. ceti là một tác nhân 2.1. Phân lập, nuôi cấy và định danh vi khuẩngây bệnh nguy hiểm mới, cần phải tập trung vàoviệc ngăn chặn sự lây lan của nó để phát triển Các mẫu cá hồi bệnh được phân lập từ cácbền vững ngành công nghiệp nuôi cá hồi. trại cá hồi từ năm 2012 đến năm 2016 tại các trang trại khu vực Kyushu, Nhật Bản. Các thông Bệnh Weissellosis chủ yếu ảnh hưởng đến cá tin liên quan về trọng lượng cá, các biểu hiệntrưởng thành (0,5 - 1,0 kg) và tỷ lệ tử vong của bệnh tích bên ngoài và bên trong cơ thể cá bệnhcá nhiễm bệnh tăng cao hơn khi lượng cơ thể cá cũng như các điều kiện môi trường tại thời điểmtăng. Cá bị nhiễm bệnh thường có dấu hiệu: lồi thu mẫu được ghi chép. Vi khuẩn gây bệnh đượcmắt, xuất huyết ở mắt, mang và xương nắp mang, phân lập từ thận của cá bệnh, sau đó nuôi cấymiệng, hậu môn, đường ruột, xoang bụng và trên thạch ToddHewitt (Difco) bổ sung 5% máugan (Figueiredo et al., 2012; Welch et al., 2013; cừu (thạch máu THA). Các chủng vi khuẩn sauWelch và Good, 2013). Do đó bệnh Weissellosis khi phân lập được bảo quản đông lạnh ở nhiệtgây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng cho người nuôi độ -80°C. Tổng cộng có 36 chủng vi khuẩn cá hồi vân ở nhiều nước. Các chủng phân lập từ phân lập đã được sử dụng trong nghiên cứu này.các quốc gia khác nhau có sự tương đồng cao về Ngoài ra, 1 chủng vi khẩn W. ceti (CECT7719) trình tự gen 16S rRNA và bệnh này được dự đoán phân lập được từ cá ...
Tìm kiếm theo từ khóa liên quan:
Bệnh vi khuẩn mới ở cá hồi vân Cá hồi vân Phòng trị bệnh ở cá hồi vân Vi khuẩn phân lập từ cá hồi vân Nuôi trồng thủy sảnGợi ý tài liệu liên quan:
-
78 trang 341 2 0
-
Tổng quan về việc sử dụng Astaxanthin trong nuôi trồng thủy sản
10 trang 222 0 0 -
Thông tư số 08/2019/TT-BNNPTNT
7 trang 220 0 0 -
225 trang 214 0 0
-
Tìm hiểu các kỹ thuật nuôi trồng thuỷ sản (Tập 1): Phần 1
66 trang 189 0 0 -
13 trang 180 0 0
-
2 trang 179 0 0
-
Triển khai chương trình phát triển bền vững quốc gia trong ngành thủy sản
7 trang 177 0 0 -
91 trang 171 0 0
-
8 trang 151 0 0