Bước đầu nghiên cứu nhân giống in vitro một số giống hồ tiêu (Piper Nigrum L.) sạch virut

Bài viết nghiên cứu khả năng loại bỏ mầm bệnh nội sinh trong mẫu cấy hồ tiêu bởi sử dụng một số chất kháng sinh, ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật với đến sự hình thành chồi, tái sinh chồi, cây từ mô sẹo ở các đốt cấy cũng như sử dụng kỹ thuật Elisa để xác định giống sạch virut trong nhân giống in vitro một số giống hồ tiêu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bước đầu nghiên cứu nhân giống in vitro một số giống hồ tiêu (Piper Nigrum L.) sạch virut27(3): 39-45 T¹p chÝ Sinh häc 9-2005 B−íc ®Çu nghiªn cøu nh©n gièng in vitro mét sè gièng Hå tiªu (Piper nigrum L.) s¹ch virut §OµN THÞ ¸I THUYÒN, TH¸I XU¢N DU, §ç §¡NG GI¸P ViÖn Sinh häc nhiÖt ®íi NGUYÔN T¡NG T¤N ViÖn Khoa häc Kü thuËt N«ng nghiÖp miÒn Nam Trong nh÷ng n¨m gÇn ®©y, viÖc t¨ng diÖn gièng ®−îc trång phæ biÕn t¹i c¸c tØnh miÒntÝch trång hå tiªu å ¹t ® dÉn tíi t×nh tr¹ng c©y §«ng Nam Bé do ViÖn Khoa häc Kü thuËthå tiªu bÞ bÖnh, trong ®ã cã bÖnh do virut g©y N«ng nghiÖp miÒn Nam cung cÊp, gåm c¸cra. KÕt qu¶ ®iÒu tra t×nh h×nh bÖnh virut ë hå gièng: Vinh Linh (ViÖt Nam); Ladatiªu t¹i mét sè tØnh miÒn §«ng Nam Bé cho Belangtoeng (In®«nªxia); Karimunda (Ên §é).thÊy cã 42-93% v−ên hå tiªu cã triÖu chøng C©y hå tiªu ®−îc trång trong bÇu ®Êt t¹inhiÔm virut biÓu hiÖn trªn l¸ vµ c©y nh− ®èm v−ên −¬m cña ViÖn Sinh häc nhiÖt ®íi. Sau 2-3hoa l¸, nh¨n phiÕn l¸, xo¨n mÐp l¸, tãp ngän, tuÇn, c©y ra chåi non. C¾t c¸c chåi cã chiÒu dµic©y lïn dÞ d¹ng,… [3, 6]. Virut ®−îc ph¸t hiÖn tõ 2-3cm vµ c¸c cµnh cã tõ 5-6 ®èt. C¸c chåitrong mÉu l¸ hå tiªu lµ c¸c virut ToMV ®−îc röa s¹ch vµ s¸t trïng b»ng cån 700. MÉu(tobacco mosaic virus), PVX (potato virus X), cÊy ®−îc khö trïng bÒ mÆt b»ng dung dÞch tÈyPVY (potato virus Y) vµ CMV (cucumber javel kho¶ng 30-40 phót hoÆc 0,1% HgCl2-10mosaic virus) [2, 3]. phót hoÆc kÕt hîp víi sö dông chÊt kh¸ng sinh § cã mét sè c«ng tr×nh nghiªn cøu nh©n 0,5% xªfotaxin tõ 1-24 giê.gièng c©y hå tiªu kh¸ng bÖnh Phytophthora C¸c chåi non v« trïng ®−îc nu«i cÊy trªnb»ng kü thuËt t¸i sinh chåi tõ nu«i cÊy rÔ, m«i tr−êng Murashige and Skoog, 1962 (MS)®o¹n th©n, cuèng vµ m¶nh l¸ cña c©y Piper cã bæ sung 6-benzylaminopurin-BA (0-5,0columbrinum L.; hoÆc t¸i sinh c©y tõ ph«i mg/l), indole-3-butyric axit-IBA (0-1,0 mg/l)s«ma, ®Ønh sinh tr−ëng cña Piper nigrum cv. hoÆc thidiazuron-TDZ (0-0,22 mg/l) ®Ó t¹oKarimunda, Panniyur-1; hoÆc tõ nu«i cÊy m« chåi. §Ó nghiªn cøu sù t¸i sinh chåi tõ m« sÑo,sÑo cña Piper longum L. [1, 4, 5, 7] nh−ng chóng t«i bæ sung BA (0-10 mg/l), IBA (0,5ch−a cã c«ng tr×nh nghiªn cøu ë ViÖt Nam vÒ mg/l) vµ kinetin (0,5 mg/l) vµo m«i tr−êng nu«inh©n gièng c©y hå tiªu s¹ch virut. cÊy. Néi dung chÝnh cña bµi b¸o nµy lµ nghiªn §èi víi m«i tr−êng t¹o rÔ, chóng t«i sö dôngcøu kh¶ n¨ng lo¹i bá mÇm bÖnh néi sinh trong c¸c chåi lín dµi 3-4cm cã tõ 2-3 cÆp l¸ cÊy trªnmÉu cÊy hå tiªu bëi sö dông mét sè chÊt m«i tr−êng MS cã kho¸ng ®a l−îng gi¶m métkh¸ng sinh; ¶nh h−ëng cña c¸c chÊt ®iÒu hßa nöa vµ bæ sung axit-1-napthalen axªtic NAAsinh tr−ëng thùc vËt ®Õn sù h×nh thµnh chåi, (0,2-0,5 mg/l) hoÆc than ho¹t tÝnh.t¸i sinh chåi, c©y tõ m« sÑo ë c¸c ®èt cÊycòng nh− sö dông kü thuËt ELISA ®Ó x¸c ®Þnh TÊt c¶ c¸c mÉu cÊy ®−îc ®Æt trong ®iÒu kiÖngièng s¹ch virut trong nh©n gièng in vitro mét phßng nu«i cÊy ë nhiÖt ®é 27oC-29oC, c−êng ®é chiÕu s¸ng 2000 lux, thêi gian chiÕu s¸ng: 12-14sè gièng hå tiªu (Piper nigrum L.) ®−îc trång giê/ngµy.ë c¸c tØnh miÒn Nam ViÖt Nam. §Ó kiÓm tra mÉu s¹ch virut, c¸c gièng hå I. PH¦¥NG PH¸p nghiªn cøu tiªu ®−îc gi¸m ®Þnh b»ng kü thuËt ELISA tr−íc vµ sau khi nu«i cÊy in vitro ®èi víi c¸c lo¹i C¸c gièng hå tiªu ®−îc nghiªn cøu lµ c¸c virut ToMV, PVX, PVY vµ CMV. 39 ii. kÕt qu¶ vµ th¶o luËn t«i cã thÓ nhËn ®−îc 25-30% sè mÉu s¹ch hoµn toµn mÇm bÖnh néi sinh.1. Sö dông chÊt kh¸ng sinh trong qu¸ tr×nh 2. ¶nh h−ëng cña vÞ trÝ ®èt cÊy vµ c¸c chÊt khö trïng mÉu cÊy ®iÒu hoµ sinh tr−ëng thùc vËt (§HSTTV) Hå tiªu lµ mét c©y l©u n¨m, cã nhiÒu mÇm lªn kh¶ n¨ng h×nh thµnh chåi hå tiªubÖnh néi sinh nh− nÊm, khuÈ ...