Các phương pháp phát hiện virus gây bệnh cho lan

Hai loại virus chính gây hại nghiêm trọng cho lan là virus CymMV (Cymbidium mosaic virus) và ORSV (Odontoglossum ringspotvirus). Việc phát hiện sớm để ngăn ngừa và kiểm soát virus gây nhiễm là vấn đề then chốt đặt ra cho các nhà nông cũng như là các nhà nghiên cứu nuôi trồng lan.Đối với các nhà vườn lan, thì việc khó khăn và nguy hại nhất là sự gây hại nghiêm trọng của các tác nhân gây bệnh cho cây lan, gồm có côn trùng, nấm, vi khuẩn, virus. Trong đó, mức độ tác hại do virus gây ra...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Các phương pháp phát hiện virus gây bệnh cho lan Các phương pháp phát hiện virus gây bệnh cho lan Hai loại virus chính gây hại nghiêm trọng cho lan là virus CymMV (Cymbidium mosaic virus) và ORSV (Odontoglossum ringspot virus). Việc phát hiện sớm để ngăn ngừa và kiểm soát virus gây nhiễm là vấn đề then chốt đặt ra cho các nhà nông cũng như là các nhà nghiên cứunuôi trồng lan.Đối với các nhà vườn lan, thì việc khó khăn và nguy hại nhất là sự gây hại nghiêmtrọng của các tác nhân gây bệnh cho cây lan, gồm có côn trùng, nấm, vi khuẩn,virus. Trong đó, mức độ tác hại do virus gây ra là nghiêm trọng nhất vì không pháthiện sớm ở giai đoạn đầu và mức độ lây lan cao. Trong đó hai loại virus chính gâyhại nghiêm trọng cho lan là virusCymMV (Cymbidium mosaicvirus) và ORSV (Odontoglossum ringspot virus). Do vậy, việc phát hiện sớm đểngăn ngừa và kiểm soát virus gây nhiễm là vấn đề then chốt đặt ra cho các nh ànông cũng như là các nhà nghiên cứu nuôi trồng lan. Mà đặc biệt là làm sao có thểdễ dàng phát hiện và chẩn đoán sớm 2 loại virus này bằng các kỹ thuật thật đơngiản, ít tốn kém là điều bận tâm rất lớn của các nhà nông. Cũng đã có rất nhiềunghiên cứu tìm phương pháp tối ưu nhất để phát hiện 2 loại virus này, bao gồmcác phương pháp miễn dịch như ELISA, RIPA (rapid immunofilter paper assay);phương pháp PCR; các test nhanh; phương pháp sắc ký;… Hiện nay, cũng cónhiều sản phẩm đang lưu hành trên thị trường dùng để phát hiện 2 loại virus nàynhư: kit DAS-ELISA của hãng DSMZ (D-0187, D-0493, D-0100), các test thửnhanh của Agdia, các kit Monoplex, Multiplex RT-PCR,… I. Phát hiện virus gây hại lan bằng cách test thử nhanh Các loại test thử nhanh này dùng để sàng lọc và phát hiện sớm các mẫu nghingờ bị nhiễm bệnh, nhằm ngăn ngừa và kiểm soát bệnh hiệu quả. Cách sử dụngcác loại test thử này rất đơn giản, nhanh chóng và không cần đầu tư trang thiết bịhiện đại hay kiến thức chuyên sâu như phương pháp chẩn đoán khác ELISA, PCR.Chúng rất tiện lợi khi mang theo và thực hiện ở bất cứ nơi nào trong nhà kính hayvườn nuôi mà không cần gửi mẫu đến phòng thí nghiệm, vì vậy chúng phù hợp vàtiện lợi cho nông dân nuôi trồng lan. Giá thành so với phương pháp ELISA hayPCR cũng ít hơn rất nhiều.Về nguyên tắc của các test này là: dựa vào phản ứng tạo màu khi có sự hiện diệncủa 1 kháng nguyên (protein màng bao của virus), kết hợp chuyên biệt với khángthể tạo phức hợp có màu nhìn thấy được bằng mắt thường.Hiện nay, trên thị trường thế giới có rất nhiều dạng test kit này của các công ty nổitiếng, có uy tín. Ở đây tôi xin giới thiệu 1 số sản phẩm để tham khảo: 1. Kit Agdia Orchid ImmunoStrip® ImmunoStrip ® của thử nhanh Agdia hãng Kit Orchid Agdia(www.agdia.com) là một trong những kít được sử dụng phổ biến nhất để phát hiệnđồng thời 2 loại virus gây bệnh cho thực vật, virus chính gây tác hại nghi êm trọngcho công tác nuôi trồng lan là Cymbidium mosaic virus (CymMV) vàOdontoglossum ringspot virus (ORSV). Kit này rất tiện lợi cho việc phát hiệnđồng thời cả hai loại virus trên chỉ trong vòng ít phút. Kết quả được thể hiện rất rõràng và cách sử dụng đơn giản, tiện lợi khi dùng bất cứ ở đâu trong vườn hay nhàkính. Chỉ cần cho mẫu nghi ngờ vào túi chuyên dụng đã chứa sẵn dung dịch đệmSEB1 của kít và đặt các que thử (strip) vào trong túi. Kết quả dương tính thể hiệnmẫu nhiễm virus khi có sự xuất hiện vạch màu trong vòng 20-30 phút khi so sánhvới mẫu đối chứng: kết quả xuất hiện 3 vạch màu là nhiễm cả 2 loại virus; testxuất hiện 2 vạch nghĩa là chỉ nhiễm 1 loại virus (CymMV hoặc ORSV) và âm tínhkhi chỉ xuất hiện 1 vạch màu (chi tiết ở hình 1): Hình minh họa kết quả phát hiện virus CymMV và ORSV bằng kit Agdia (www.agdia.com) 2. Pocket Diagnostics Orchid virus screen - Cymbidium mosaic virus andOdontoglossum ringspot virusSản phẩm gồm có 1 pack silica chứa 1 test phát hiện CymMV, 1 test phát hiệnORSV, 1 ống chứa dung dịch tách chiết (extraction bottle), 1 pipett nhựa, vài vòngbi thép sạch. sản phẩm của kit Pocket Diagnostics Orchid virus screenCác(http://jwund.homestead.com/pdviruskit.html) Cách thực hiện kit này rất dễ dàng tiện dụng, không cần kinh nghiệm và dễ bảoquản (lưu trữ ở nhiệt độ phòng, khô thoáng): Sử dụng mẫu lá mới nhất ngh ...