Chương 9. Phương pháp sắc ký

Nguyên lý hoạt động của sắc ký như quá trình chiết nhưng một pha được giữ cố định và một pha động di chuyển qua pha cố định này.Chất lỏng đi vào cột gọi là dung môi rửa giải. Chất lỏng đi ra khỏi cột gọi là dung môi giải hấp. Quá trình mà chất khí hay chất lỏng đi qua cột sắc ký gọi là quá trình rửa giải. Cột sắc ký được nhồi với các hạt có kích thước nhỏ như được chỉ ra ở hình vẽ 9-1....
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Chương 9. Phương pháp sắc ký Nội dungChương 9. Phương pháp sắc ký .............................................................................................................. 1 9.1. Định nghĩa .................................................................................................................................... 1 9.2. Phân loại sắc ký ............................................................................................................................ 2 9.3. Các đại lượng đặc trưng của sắc ký ............................................................................................. 4 9.3.1. Sắc ký đồ ............................................................................................................................... 4 9.3.2. Mối quan hệ giữa thời gian lưu và hệ số phân bố ................................................................ 6 9.4. Hiệu quả tách ............................................................................................................................... 6 9.4.1. Độ phân giải .......................................................................................................................... 6 9.4.2. Sự khuếch tán ....................................................................................................................... 8 9.4.3. Chiều cao đĩa ....................................................................................................................... 10 9.4.4. Phương trình chiều cao đĩa ................................................................................................. 11 9.5. Ứng dụng phương pháp sắc ký .................................................................................................. 12 9.5.1. Phân tích định tính .............................................................................................................. 12 9.5.2. Phân tích định lượng ........................................................................................................... 13 9.6. Câu hỏi ôn tập ............................................................................................................................ 14 Chương 9. Phương pháp sắc ký9.1. Định nghĩaNguyên lý hoạt động của sắc ký như quá trình chiết nhưng một pha được giữ cố định vàmột pha động di chuyển qua pha cố định này. Dung môi rửa giải CỘT SẮC KÝ Dung môi giải hấpChất lỏng đi vào cột gọi là dung môi rửa giải. Chất lỏng đi ra khỏi cột gọi là dung môigiải hấp. Quá trình mà chất khí hay chất lỏng đi qua cột sắc ký gọi là quá trình rửagiải. Cột sắc ký được nhồi với các hạt có kích thước nhỏ như được chỉ ra ở hình vẽ 9-1. 1 Hình 9-1. Ý tưởng đằng sau sắc ký: chất tan A có độ hấp phụ lớn hơn đối với pha tĩnh so với chất tan B, lưu lại trên cột lâu hơn.9.2. Phân loại sắc kýTrên cơ sở sự tương tác giữa chất tan và pha tĩnh người ta chia sắc ký ra làm các loại sauđây:- Sắc ký hấp phụ: Pha tĩnh là chất rắn, pha động là chất lỏng hay khí. Chất tan được hấpphụ trên bề mặt của các hạt rắn. Các chất tan được hấp phụ càng mạnh thì nó càng dichuyển chậm ở trong cột (hình 9-2). Hình 9-2. Sắc ký hấp phụ và sắc ký phân bố 2 Hình 9-3. Sắc ký trao đổi ion và sắc ký loại cỡ phân tử Hình 9-4. Sắc ký ái lực- Sắc ký phân bố: Pha tĩnh là chất lỏng được liên kết với bề mặt rắn, thường là SiO2. Phatĩnh thường là chất khí. Cân bằng của chất tan giữa với pha tĩnh và pha lỏng được thiếtlập trong sắc ký khí (hình 9-2).- Sắc ký trao đổi ion: Các loại nhựa trao đổi ion, ví dụ nhựa trao đổi anion - haynhựa trao đổi cation – được liên kết với pha tĩnh bằng liên kết cộng hóa trị. Phađộng là các chất lỏng chứa các ion chất tan có điện tích trái dấu được liên kết với phatĩnh bởi lực tĩnh điện (hình 9-3).- Sắc ký loại cỡ phân tử: còn được gọi là sắc ký lọc gel hay sắc ký thẩm thấu gel. Kỹthuật sắc ký này cho phép tách các phân tử dựa trên kích thước của nó. Các chất tan có 3kích thước lớn hơn sẽ đi qua cột nhanh chóng. Trong trường hợp lý tưởng của sắc kýloại cỡ phân tử, sẽ không có tương tác giữa pha động và chất tan. Pha động là chất khíhay lỏng sẽ đi qua gel xốp. Các lỗ xốp là đủ nhỏ để loại các phân tử chất tan có kích thướclớn. Các phân tử lớn không cần thâm nhập vào các lỗ xốp. Do vậy, các phân tử nhỏ sẽ cầnnhiều thời gian hơn để đi qua cột (hình 9-3).- Sắc ký ái lực: Đây là loại sắc ký có độ chọn lọc cao nhất ...