Đặc điểm týp huyết thanh của virut dengue gây sốt xuất huyết dengue trên địa bàn Thành phố Hà Nội 2011
Số trang: 5
Loại file: pdf
Dung lượng: 333.20 KB
Lượt xem: 8
Lượt tải: 0
Xem trước 2 trang đầu tiên của tài liệu này:
Thông tin tài liệu:
Bài viết nghiên cứu sử dụng phương pháp mPCR nhằm Phát hiện các type huyết thanh của virut dengue ở bệnh nhân sốt xuất huyết trên địa bàn Thành phố Hà nội. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của tài liệu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đặc điểm týp huyết thanh của virut dengue gây sốt xuất huyết dengue trên địa bàn Thành phố Hà Nội 2011TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ KC.10 NĂM 2012ĐẶC ĐIỂM TÝP HUYẾT THANH CỦA VIRUT DENGUE GÂY SỐTXUẤT HUYẾT DENGUE TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ HÀ NỘI 2011Nguyễn Khắc Lực*; Vũ Xuân Nghĩa*TÓM TẮTVirut dengue (DENV) là nguyên nhân gây sốt dengue, sốt xuất huyết dengue (SXHD) và hộichứng sốc dengue. Hiện nay, DENV được xác định có 4 týp huyết thanh là DENV-1, DENV-2,DENV-3 và DENV-4. Trong dịch SXHD 2011, phân tích týp huyÕt thanh của 34 bệnh nhân (BN)SXHD. Kết quả cho thấy, dengue týp 1 chiếm 18% (6/34 BN), dengue týp 2 chiếm 36% (12/34 BN)và đồng nhiễm týp 1/týp 2 là 46% (16/34 BN).* Từ khóa: Sốt dengue; Sốt xuất huyết; Týp huyÕt thanh dengue.CHARACTERISTICS OF SEROTYPE FROM DENGUE VIRUSIN 2011 DENGUE FEVER OUTBREAK IN HANOISUMMARYDengue virus cause dengue fever (DF), dengue hemorrhagic fever (DHF) and dengue shocksyndrome (DSS). DENV was grouped in four serotypes: DENV-1, DENV-2, DENV-3 and DENV-4. In2011 dengue fever outbreak, 34 patients with dengue hemorrhagic fever were analyzed for serotype.Results showed that dengue type 1 accounted for 18% (6/34), dengue type 2 accounting for 36%(12/34) and co-infection type1/type2 was 46% (16/34).* Key words: Dengue fever, Dengue hemorrhagic fever; Serotype dengue.ĐẶT VẤN ĐỀSốt xuất huyết dengue là bệnh lây truyềnqua động vật chân đốt (muỗi Aedes sp.)do một trong 4 týp huyÕt thanh của virutdengue (DEN-1, DEN-2, DEN-3, DEN-4).Tỷ lệ nhiễm virut dengue ngày càng tăng.Người ta ước tính khoảng 50 - 100 triệungười nhiễm virut hàng năm ở hơn 100quốc gia nhiệt đới và cận nhiệt đới trên thếgiới [3]. DENV có biểu hiện từ mức nhẹ nhưkhông triệu chứng đến mức độ vừa, nặngvà rất nặng. Tùy thuộc vào từng týp huyÕtthanh, tình trạng nhiễm hay đồng nhiễm cáctýp huyÕt thanh mà BN có biểu hiện lâmsàng ở những mức độ khác nhau [4].Để chẩn đoán phát hiện DENV hoặc cáctýp huyÕt thanh của DEN, hiện nay có 3phương pháp được thực hiện thường quy ởlabo: phân lập virut, phát hiện virut bằngkháng thể đặc hiệu và phát hiện virut ở mứcđộ gen bằng các kỹ thuật khuếch đại chuỗiaxít nucleic: RT-PCR, mPCR và Realtime PCR.Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụngphương pháp mPCR để: Phát hiện các týphuyÕt thanh của DENV ở BN SXHD trên địabàn Thành phố Hà nội.* Học viện Quân yChịu trách nhiệm nội dung khoa học: PGS. TS. Trịnh Thị Xuân Hòa170TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ KC.10 NĂM 2012ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Đối tượng nghiên cứu.34 mẫu huyết tương của BN nghi ngờSXHD ở giai đoạn cấp trong vụ dịch sốtxuất huyết 2011 ở Hà Nội. BN nhập việnvới biểu hiện sốt cao, phát ban và xuấthuyết. Nhóm người khỏe mạnh (n = 10)được sử dụng là nhóm chứng âm trongnghiên cứu.* Chứng dương:Chứng dương của DENV1, 2, 3, 4 vàchứng đối là virut Chikungunya do Trungtâm Y Dược học Quân sự, Học viện Quân ycung cấp.Chuẩn hóa kỹ thuật và đánh giá kết quả.DEN-1, 2, 3, 4 do Trung tâm Y Dược họcQuân sự, Học viện Quân y cung cấp.* Thời gian nghiên cứu: từ 04 - 2011 đến04 - 2011.KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀBÀN LUẬN1. Chuẩn hóa serotýp của virut DEN.Tối ưu hóa phương pháp mPCR với cặpmồi đặc hiệu của từng týp huyÕt thanh đểphát hiện nhanh, chính xác týp huyÕt thanhcủa virut DEN. Kết quả: týp huyÕt thanh củavirut DEN đều cho sản phẩm PCR đặc hiệuvới từng týp huyÕt thanh (hình 1).2. Phương pháp nghiên cứu.- Mô tả cắt ngang và ứng dụng labo.* Các quy trình kỹ thuật sử dụng trongnghiên cứu:- Tách chiết ARN:Tách ARN của virut từ 150 µl huyết tươngbằng Qiagen RNA Blood mini kit theo quitrình chuẩn (Qiagen, Đức) và cất giữ ở -800Cđến khi sử dụng.- Qui trình m-PCR:Thực hiện quy trình có thay đổi để tối ưuhóa phương pháp. Thành phần tham giaphản ứng bao gồm: 5 x Qiagen OnestepRT-PCR buffer, dNTP 10 mM, cặp mồi pháthiện DENV 20 pmol, enzym Mix 2,5 đơn vị,ARN của virut và nước cất vừa đủ 50 µl.Chu trình nhiệt 45°C/45 phút; 95°C/2 phútvà 40 chu kỳ ở 94°C/30 giây; 55°C/1 phút;72°C/1 phút; 72°C/10 phút. Sản phẩm PCRđược chạy trên agarose gel 1,2% ở điện áp100 V và chụp trên hệ thống máy đọc gel.PCR vòng II với các thành phần tương tựvà cặp mồi đặc hiệu cho týp huyÕt thanhcủa virut dengue.* Chứng dương:Hình 1: Sản phẩm PCR của týp huyÕt thanhvirut DEN; M: ADN maker 50 bp; Đường 1, 2, 3:týp huyÕt thanh của DENV; 4: chứng âm.Hiện nay, trên thế giới và trong nước sửdụng nhiều phương pháp sinh học phân tửđể phát hiện các mầm bệnh sinh học [5].Các phương pháp ứng dụng PCR có thểxác định týp huyÕt thanh của DENV trongmẫu bệnh phẩm khi tập trung vào nhữngđoạn gen đặc hiệu của virut [1, 5]. Phươngpháp mPCR được sử dụng trong nghiêncứu này đã cho thấy tính vượt trội so vớinhững phương pháp khác. Sử dụng mPCRđể phát hiện sớm virut DENV, mở hướng đimới trong công tác phòng và chống bệnhsốt xuất huyết ở nước ta [3].173TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ KC.10 NĂM 2012 ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đặc điểm týp huyết thanh của virut dengue gây sốt xuất huyết dengue trên địa bàn Thành phố Hà Nội 2011TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ KC.10 NĂM 2012ĐẶC ĐIỂM TÝP HUYẾT THANH CỦA VIRUT DENGUE GÂY SỐTXUẤT HUYẾT DENGUE TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ HÀ NỘI 2011Nguyễn Khắc Lực*; Vũ Xuân Nghĩa*TÓM TẮTVirut dengue (DENV) là nguyên nhân gây sốt dengue, sốt xuất huyết dengue (SXHD) và hộichứng sốc dengue. Hiện nay, DENV được xác định có 4 týp huyết thanh là DENV-1, DENV-2,DENV-3 và DENV-4. Trong dịch SXHD 2011, phân tích týp huyÕt thanh của 34 bệnh nhân (BN)SXHD. Kết quả cho thấy, dengue týp 1 chiếm 18% (6/34 BN), dengue týp 2 chiếm 36% (12/34 BN)và đồng nhiễm týp 1/týp 2 là 46% (16/34 BN).* Từ khóa: Sốt dengue; Sốt xuất huyết; Týp huyÕt thanh dengue.CHARACTERISTICS OF SEROTYPE FROM DENGUE VIRUSIN 2011 DENGUE FEVER OUTBREAK IN HANOISUMMARYDengue virus cause dengue fever (DF), dengue hemorrhagic fever (DHF) and dengue shocksyndrome (DSS). DENV was grouped in four serotypes: DENV-1, DENV-2, DENV-3 and DENV-4. In2011 dengue fever outbreak, 34 patients with dengue hemorrhagic fever were analyzed for serotype.Results showed that dengue type 1 accounted for 18% (6/34), dengue type 2 accounting for 36%(12/34) and co-infection type1/type2 was 46% (16/34).* Key words: Dengue fever, Dengue hemorrhagic fever; Serotype dengue.ĐẶT VẤN ĐỀSốt xuất huyết dengue là bệnh lây truyềnqua động vật chân đốt (muỗi Aedes sp.)do một trong 4 týp huyÕt thanh của virutdengue (DEN-1, DEN-2, DEN-3, DEN-4).Tỷ lệ nhiễm virut dengue ngày càng tăng.Người ta ước tính khoảng 50 - 100 triệungười nhiễm virut hàng năm ở hơn 100quốc gia nhiệt đới và cận nhiệt đới trên thếgiới [3]. DENV có biểu hiện từ mức nhẹ nhưkhông triệu chứng đến mức độ vừa, nặngvà rất nặng. Tùy thuộc vào từng týp huyÕtthanh, tình trạng nhiễm hay đồng nhiễm cáctýp huyÕt thanh mà BN có biểu hiện lâmsàng ở những mức độ khác nhau [4].Để chẩn đoán phát hiện DENV hoặc cáctýp huyÕt thanh của DEN, hiện nay có 3phương pháp được thực hiện thường quy ởlabo: phân lập virut, phát hiện virut bằngkháng thể đặc hiệu và phát hiện virut ở mứcđộ gen bằng các kỹ thuật khuếch đại chuỗiaxít nucleic: RT-PCR, mPCR và Realtime PCR.Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụngphương pháp mPCR để: Phát hiện các týphuyÕt thanh của DENV ở BN SXHD trên địabàn Thành phố Hà nội.* Học viện Quân yChịu trách nhiệm nội dung khoa học: PGS. TS. Trịnh Thị Xuân Hòa170TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ KC.10 NĂM 2012ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Đối tượng nghiên cứu.34 mẫu huyết tương của BN nghi ngờSXHD ở giai đoạn cấp trong vụ dịch sốtxuất huyết 2011 ở Hà Nội. BN nhập việnvới biểu hiện sốt cao, phát ban và xuấthuyết. Nhóm người khỏe mạnh (n = 10)được sử dụng là nhóm chứng âm trongnghiên cứu.* Chứng dương:Chứng dương của DENV1, 2, 3, 4 vàchứng đối là virut Chikungunya do Trungtâm Y Dược học Quân sự, Học viện Quân ycung cấp.Chuẩn hóa kỹ thuật và đánh giá kết quả.DEN-1, 2, 3, 4 do Trung tâm Y Dược họcQuân sự, Học viện Quân y cung cấp.* Thời gian nghiên cứu: từ 04 - 2011 đến04 - 2011.KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀBÀN LUẬN1. Chuẩn hóa serotýp của virut DEN.Tối ưu hóa phương pháp mPCR với cặpmồi đặc hiệu của từng týp huyÕt thanh đểphát hiện nhanh, chính xác týp huyÕt thanhcủa virut DEN. Kết quả: týp huyÕt thanh củavirut DEN đều cho sản phẩm PCR đặc hiệuvới từng týp huyÕt thanh (hình 1).2. Phương pháp nghiên cứu.- Mô tả cắt ngang và ứng dụng labo.* Các quy trình kỹ thuật sử dụng trongnghiên cứu:- Tách chiết ARN:Tách ARN của virut từ 150 µl huyết tươngbằng Qiagen RNA Blood mini kit theo quitrình chuẩn (Qiagen, Đức) và cất giữ ở -800Cđến khi sử dụng.- Qui trình m-PCR:Thực hiện quy trình có thay đổi để tối ưuhóa phương pháp. Thành phần tham giaphản ứng bao gồm: 5 x Qiagen OnestepRT-PCR buffer, dNTP 10 mM, cặp mồi pháthiện DENV 20 pmol, enzym Mix 2,5 đơn vị,ARN của virut và nước cất vừa đủ 50 µl.Chu trình nhiệt 45°C/45 phút; 95°C/2 phútvà 40 chu kỳ ở 94°C/30 giây; 55°C/1 phút;72°C/1 phút; 72°C/10 phút. Sản phẩm PCRđược chạy trên agarose gel 1,2% ở điện áp100 V và chụp trên hệ thống máy đọc gel.PCR vòng II với các thành phần tương tựvà cặp mồi đặc hiệu cho týp huyÕt thanhcủa virut dengue.* Chứng dương:Hình 1: Sản phẩm PCR của týp huyÕt thanhvirut DEN; M: ADN maker 50 bp; Đường 1, 2, 3:týp huyÕt thanh của DENV; 4: chứng âm.Hiện nay, trên thế giới và trong nước sửdụng nhiều phương pháp sinh học phân tửđể phát hiện các mầm bệnh sinh học [5].Các phương pháp ứng dụng PCR có thểxác định týp huyÕt thanh của DENV trongmẫu bệnh phẩm khi tập trung vào nhữngđoạn gen đặc hiệu của virut [1, 5]. Phươngpháp mPCR được sử dụng trong nghiêncứu này đã cho thấy tính vượt trội so vớinhững phương pháp khác. Sử dụng mPCRđể phát hiện sớm virut DENV, mở hướng đimới trong công tác phòng và chống bệnhsốt xuất huyết ở nước ta [3].173TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ KC.10 NĂM 2012 ...
Tìm kiếm theo từ khóa liên quan:
Tạp chí khoa học Tạp chí y dược Y dược quân sự Sốt xuất huyết Týp huyết thanh dengue Bệnh lây truyền qua động vật chân đốtTài liệu liên quan:
-
6 trang 300 0 0
-
Thống kê tiền tệ theo tiêu chuẩn quốc tế và thực trạng thống kê tiền tệ tại Việt Nam
7 trang 272 0 0 -
5 trang 234 0 0
-
10 trang 215 0 0
-
Khảo sát, đánh giá một số thuật toán xử lý tương tranh cập nhật dữ liệu trong các hệ phân tán
7 trang 210 0 0 -
8 trang 210 0 0
-
Quản lý tài sản cố định trong doanh nghiệp
7 trang 208 0 0 -
6 trang 205 0 0
-
Khách hàng và những vấn đề đặt ra trong câu chuyện số hóa doanh nghiệp
12 trang 203 0 0 -
9 trang 167 0 0