Đánh giá ảnh hưởng của interferon alpha đến đáp ứng miễn dịch của lợn được tiêm kháng nguyên GP5 tái tổ hợp của virus tai xanh

Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn (PRRS, bệnh tai xanh) là một trong những bệnh quan trọng nhất, gây thiệt hại kinh tế cho ngành chăn nuôi lợn trên phạm vi toàn cầu. Mặc dù đã có nhiều loại vacxin được sản xuất và sử dụng ở nhiều quốc gia với hy vọng sẽ khống chế và ngăn chặn được dịch bệnh này, nhưng cho đến nay hiệu lực bảo hộ của các vacxin PRRS vẫn chưa đạt được kết quả như mong muốn.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đánh giá ảnh hưởng của interferon alpha đến đáp ứng miễn dịch của lợn được tiêm kháng nguyên GP5 tái tổ hợp của virus tai xanh KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXIV SỐ 1 - 2017 ÑAÙNH GIAÙ AÛNH HÖÔÛNG TIEÀM NAÊNG CUÛA INTERFERON ALPHA TRONG ÑAÙP ÖÙNG MIEÃN DÒCH CUÛA LÔÏN ÑÖÔÏC TIEÂM KHAÙNG NGUYEÂN GP5 TAÙI TOÅ HÔÏP CUÛA VIRUS TAI XANH Trần Thị Thanh Hà1, Lý Đức Việt1, Nguyễn Thị Huyền1, Nguyễn Thị Lương , Đặng Thị Kiều Anh1, Đặng Vũ Hoàng1 và Takehiro KOKUHO2 1 TÓM TẮT Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn (PRRS, bệnh tai xanh) là một trong những bệnh quan trọng nhất, gây thiệt hại kinh tế cho ngành chăn nuôi lợn trên phạm vi toàn cầu. Mặc dù đã có nhiều loại vacxin được sản xuất và sử dụng ở nhiều quốc gia với hy vọng sẽ khống chế và ngăn chặn được dịch bệnh này, nhưng cho đến nay hiệu lực bảo hộ của các vacxin PRRS vẫn chưa đạt được kết qủa như mong muốn. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã ứng dụng hệ thống biểu hiện baculovirus để sản xuất protein GP5 của virus PRRS phân lập tại Việt Nam. Kết quả nghiên cứu cho thấy protein GP5 tái tổ hợp được sản xuất bằng hệ thống baculovirus mang hoạt tính sinh học và hoạt tính miễn dịch. Đồng thời việc kết hợp protein GP5 tái tổ hợp và interferon alpha đã làm tăng đáp ứng kháng thể đặc hiệu với virus PRRS, điều này được xác nhận bởi kết quả IDEXX ELISA và trung hòa virus. Kết quả nghiên cứu này cho thấy tiềm năng phát triển vacxin tái tổ hợp GP5 bằng hệ thống baculovirus tại Việt Nam Từ khóa: Bệnh tai xanh, Khung đọc mở 5 (GP5), Protein tái tổ hợp, Hệ thống biểu hiện baculovirus Evaluation on influence of interferon alpha in swine immune response induced by recombinant GP5 protein of PRRSV Tran Thi Thanh Ha, Ly Duc Viet, Nguyen Thi Huyen, Nguyen Thi Luong, Dang Thi Kieu Anh, Dang Vu Hoang, Takehiro Kokuho SUMMARY Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome (PRRS) is one of the most important diseases causing economic loss in the global pig raising industry. In spite of having many vaccine kinds were developed and used to prevent this disease in several countries, but up to date the protective efficacy of the current PRRS vaccines was limited. In this study, the baculovirus expression system was used to produce recombinant GP5 protein from PRRS strain which was isolated in Viet Nam. The studied results indicated that recombinant GP5 protein producing from Baculovirus system possessed both bioactive and immunity properties. Also, the combination of recombinant GP5 protein and interferon alpha enhanced the specific antibody response with PRRSV (this was determined by IDEXX ELISA and VN Test). The result of this study indicated the potential for development of GP5 recombinant vaccine by using baculovirus system in Viet Nam Keywords: PRRS, Open reading frame 5 (GP5), Recombinant protein, Baculovirus expression system 1. Bộ môn Hóa sinh Miễn dịch - Viện Thú y 2. Viện Thú y Nhật Bản 5 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXIV SỐ 1 - 2017 I. ĐẶT VẤN ĐỀ nghiên cứu gần đây (Du Y và cs., 2012). Virus PRRS là một virus RNA sợi đơn dương Với mục đích nghiên cứu ảnh hưởng của được xếp vào loài Nidovirales, họ Arteriviridae, cytokine trong đáp ứng miễn dịch trung hòa của giống Arterivirus, gần giống với virus gây viêm lợn đối với virus PRRS, chúng tôi thực hiện đề tài khớp ở ngựa (Equine arthritis virus - EAV), virus nghiên cứu “Đánh giá ảnh hưởng của interferon Lactic Dehydrogenase của chuột (LDV) và virus alpha đến đáp ứng miễn dịch của lợn được tiêm gây sốt xuất huyết trên khỉ (Simian Haemorrhagic kháng nguyên GP5 tái tổ hợp của virus PRRS. Fever Virus- SHFV) (Thiel và cs.; 1993). Đây là virus có vỏ bọc, hình cầu, đường kính từ 50-70 nm II. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG và chứa nhân nucleocapsid 25-35 nm. Trên bề mặt PHÁP NGHIÊN CỨU có những gai nhô ra rất rõ. Sự sinh sôi của virus bị 2.1. Nguyên liệu dừng lại khi dùng chloroform hay ether, chứng tỏ vỏ có chứa lipid. Virus có khả năng sinh sản trên Tế bào côn trùng SF21AE và High Five từ tế bào đơn nhân và tế bào đại thực bào, đồng thời Trung tâm Phòng và Kiểm soát dịch bệnh động nó có khả năng truyền qua nhau thai, gây bệnh cho vật, Viện thú y Nhât bản. Interferon alpha từ bào thai. Virus có bộ gen dễ bị thay đổi dẫn đến công ty Nanogen, Việt Nam. những thay đổi về tính kháng nguyên và có khả 2.2 Phương pháp nghiên cứu năng trốn tránh hệ thống miễn dịch do con vật sinh ra nên nó có thể tồn tại rất lâu trong cơ thể vật bị - Biểu hiện protein tái tổ hợp bằng hệ thống nhiễm (P.L.Delputte và cs., 2004). baculovirus: Bac-to-Bac baculovirus expression system của hãng invitrogen theo hướng dẫn của Virus PRRS có thể xâm nhập và nhân lên nhà sản xuất trong các đại thực bào (các tế bào có tác dụng bắt và tiêu diệt các tác nhân gây bệnh). Khi hình - Phát hiện nhanh baculovirus tái tổ hợp: thành các virion, virus phá hủy các đại thực bào. bằng phương pháp PCR theo công bố của Barbara Virus PRRS có 3 protein cấu trúc chính, đó là: Malitscheck và cs., 1999 (1) nucleocapsid protein (N, ORF 7), (2) protein ...