Dùng Bacteriophage Để Làm KIT Thử Nhanh Khuẩn MRSA

Thuật ngữ: - bacteriophage: vi-rut tiêu vi khuẩn - MRSA (Methìcillin-Resistant Staph. aureus) cầu khuẩn Staph. Aureus kháng methicillin - MSSA (Methicillin-Sensitive Staph. aureus) cầu khuẩn Staph. aureus nhạy cảm với methicillin - PCR (Polymerase Chain Reaction) phản ứng chuỗi polymerase Cách đây mấy năm, một tường trình của ngành xét nghiệm ở Hà-nội cho biết các bác sĩ điều trị tại Việt-nam không muốn cho thử vi sinh vì thời gian chờ đợi quá lâu. Nhưng nếu chửa theo kinh nghiệm nhiều khi dùng kháng sinh không cần thiết, có thể làm cho vi trùng lờn thuốc. ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Dùng Bacteriophage Để Làm KIT Thử Nhanh Khuẩn MRSA Dùng Bacteriophage Để Làm KIT Thử Nhanh Khuẩn MRSA Thuật ngữ: - bacteriophage: vi-rut tiêu vi khuẩn - MRSA (Methìcillin-Resistant Staph. aureus) cầu khuẩn Staph.Aureus kháng methicillin - MSSA (Methicillin-Sensitive Staph. aureus) cầu khuẩn Staph. aureusnhạy cảm với methicillin - PCR (Polymerase Chain Reaction) phản ứng chuỗi polymerase Cách đây mấy năm, một tường trình của ngành xét nghiệm ở Hà-nộicho biết các bác sĩ điều trị tại Việt-nam không muốn cho thử vi sinh vì thờigian chờ đợi quá lâu. Nhưng nếu chửa theo kinh nghiệm nhiều khi dùngkháng sinh không cần thiết, có thể làm cho vi trùng lờn thuốc. Giải pháp lýtưởng là làm sao thử cho kết quả nhanh để bác sĩ có thể điều chỉnh thuốchiệu nghiệm với vi trùng gây bệnh. Giải pháp này đã thực hiện tại Âu Mỹnhưng chi phí quá cao, nên ngày nào ngành công nghệ vi sinh của Việt-namphát triển, thì mới hy vọng có thuốc thử nhanh tại bệnh viện. Chúng tôi xin đưa ra một thí dụ dùng kỹ thuật khuếch đạibacteriophage để dò tìm khuẩn Staphylococcus aureus và xem thử vi khuẩnnày nhạy cảm hay đề kháng với methicillin. Bộ thử nghiệm này do công ty Microphage sản xuất và đang chờ đợiFDA chấp thuận, dựa trên nguyên tắc dò tìm protein sản xuất bởi siêu viđược chọn lọc để khuếch đại khi đáp ứng với Staphylococcus aure us. Mẫucấy máu được trộn đều trong 2 ống tách rời và đặt trong lò ủ 5 giờ. Sau đólấy 2 ống nghiệm này ra và lấy mỗi ống 6 giọt nhỏ vào giấy thử giống nhưkhi thử thai. Một ống tìm xem có khuẩn Staph. aureus không, ống kia xem vikhuẩn nhạy cảm hay đề kháng với kháng sinh. Trong 1 dàn 120 chủng Staph. aureus cô lập từ lâm sàng và 120 mẫukhác cầu khuẩn Staphylo. coagulase âm tính không gây bệnh, thử nghiệmnhận diện Staph. aureus có độ nhạy 93% và tính đặc thù 96%. Trong sốnhững chủng dò tìm được, thử nghiệm chủng nhạy cảm methicillin có độnhạy 99% và đặc thù 99%. Chỉ 1.8% mẫu nhận diện sai là Staph. aureus đềkháng methicillin và không có mẫu nào nhận sai là nhạy cảm với methicillin. Kỹ thuật PCR hiện nay cho phép tìm nhanh MRSA nhưng khôngquyết định chính xác mức nhạy cảm kháng sinh. Với thử nghiệmbacteriophage, kết quả xác nhận MSSA cho phép chuyển điều trị theo kinhnghiệm vancomycin sang nafcillin hay những kháng sinh β-lactam quy ước,như vậy sẽ chống Staph. aureushiệu nghiệm hơn vancomycin và giảm tửsuất 30-50% nếu vi khuẩn gây bệnh nhạy cảm với thuốc. Thử nghiệm PCRcũng cho nhiều kết quả dương tính giả với MSSA. Kỹ thuật khuếch đại bacteriophage cũng có thể dùng cho sàng lọc viễntưởng người mang mầm bệnh MRSA. Trong một nghiên cứu khác, người ta dùng mẫu cấy lấy ở mũi (nơiMRSA thường hiện diện) ở bệnh nhân trước khi mổ và trong trại ICU, quétlên dĩa th1ch để tìm MRSA. Mẫu cấy được chuyển qua ống Microphage, ủtrong 7-24 giờ, và đọc như thể xét nghiệm tìm vi trùng trong máu. Lần này,32 mẫu đọc lúc 7 giờ và 24 giờ và 77 mẫu đọc lúc 12-18 giờ và lúc 18-24giờ (cần nhiều thời gian hơn cho mẫu cấy ở mũi so với mẫu máu vì ít vitrùng hiện diện hơn) Độ nhạy dò tìm MRSA ở người mang mầm bệnh ở mũi chỉ 33% lúc 7giờ, nhưng lên đến 92% lúc 12-18 giờ và 100% lúc 18-24 giờ. Chỉ cần huấn luyện cho nhân viên phòng xét nghiệm khoảng 1 giờ làlàm được xét nghiệm này, không cần phải có trang bị đặc biệt hay chuyênngành, Bộ thử nghiệm này sẽ thử nghiệm lâm sàng đầu năm 2009 và hyvọng có giấy phép của FDA cuối năm 2009 hay đầu năm 2010. Sau đây là giải thích của tiến sĩ Lâm-Kim-Cương, giáo sư khoa sinhhọc phân tử đại học Rogers ở New Jersey về kỹ thuật d ùng bacteriophagenày: Đây là trường hợp dùng siêu vi trùng Phage (Bacteriophage) mà trướcđây tôi đã trình bày trong phương pháp trị liệu bằng phage. Phage (hay bacteriophage) là những loại virus chuyên biệt chỉ xâmnhập vào vi-trùng và dùng các chất của vi-trùng để tăng trưởng và sinh sảnra một số lượng thật nhiều đến mức làm nổ tung vi-trùng và phóng thíchphage con ra bên ngoài (pro-phage). Những prophages này lại tiếp tục xâmnhập vào các vi-trùng còn sống rồi tiếp tục sinh sản cho dến khi tiêu diệt hếtcác vi-trùng. Khi không còn vi-trùng sống thì phage sẽ không thế nào sinhsản được. Hãng MicroPhage lợi dụng cách này để làm tăng số lượng phage(bacteriophage amplification) trong thí nghiệm của họ. Tôi cũng đã trình bàytrước đây là trong khi kháng sinh có thể giết chết vi-trùng thi ngược lạikháng sinh không có tác dụng trên phage (Vì vậy mà mình có thể dùngphage để trị các bệnh trong trường hợp vi-trùng kháng thuốc, một phươngpháp rẻ tiền và hiệu nghiệm). Trong nguyên tắc thử nghiệm của hãng MicroPhage để tìm xem có vi-trùng Staphylococcus. aureus hay không thì họ dùng vài giọt mẩu (sample)máu hoặc đàm của bệnh nhận bị nghi là bị nhiễm trùng Staph. với dung dịchcấy (culture media) ...