Gắn kết streptavidin lên hạt nano Fe3O4

Streptavidin (SA) có giá thành thấp và có khả năng liên kết đặc hiệu với biotin. Do đó, SA được nghiên cứu về khả năng gắn kết với các hạt nano Fe3O4. Bài viết tổng hợp hạt nano Fe3O4 để gắn kết SA và khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất gắn kết của SA với hạt nano.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Gắn kết streptavidin lên hạt nano Fe3O4Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Phụ bản của Số 1 * 2016 Nghiên cứu Y học GẮN KẾT STREPTAVIDIN LÊN HẠT NANO Fe3O4 Bùi Trung Thành*, Phạm Hùng Vân*, Trần Thị Kiều**, Trần Hoàng Hải***TÓM TẮT Mở đầu: Streptavidin (SA) có giá thành thấp và có khả năng liên kết đặc hiệu với biotin. Do đó, SA đượcnghiên cứu về khả năng gắn kết với các hạt nano Fe3O4. Qua đó, hạt nano có thể gắn kết với kháng thể được biotinhóa, được ứng dụng để làm giàu kháng nguyên đặc hiệu sẽ giúp chẩn đoán sớm. Mục tiêu: Tổng hợp hạt nano Fe3O4 để gắn kết SA và khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất gắnkết của SA với hạt nano. Đối tượng - Phương pháp: Hạt nano Fe3O4 được tổng hợp bằng phương pháp solvothermal và được xử lýđể hình thành cấu trúc Fe3O4/SiO2/NH2/CHO để gắn kết SA thông qua liên kết cộng hóa trị. Ảnh hiển vi điện tửtruyền qua (TEM), phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (FTIR), từ kế mẫu rung (VSM), giản đồ nhiễu xạ tia X(XRD), phổ UV-Vis, ảnh hiển vi huỳnh quang và phương pháp Bradford tất cả được sử dụng để xác định hìnhdạng, kích thước, tính chất của các hạt nano và sự gắn kết của các hạt nano với SA. Kết quả: Tổng hợp được các hạt nano Fe3O4 có kích thước 35 và 95 nm, hiệu suất gắn kết SA với các hạtnano ấy lần lượt là 75,57, 58,06 %. Và, độ pH phù hợp với cấu trúc này có giá trị 7-8. Kết luận: Hạt nano Fe3O4 sau khi được chức năng hóa đã gắn kết được với SA. Từ khóa: Gắn kết, streptavidin, hạt nano Fe3O4.ABSTRACT IMMOBILIZATION OF STREPTAVIDIN ONTO THE MAGNETITE NANOPARTICLES Bui Trung Thanh, Pham Hung Van, Tran Thi Kieu, Tran Hoang Hai * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 20 - Supplement of No 1 - 2016: 1 - 8 Background: Streptavidin (SA) has low cost and with the ability to conjugate of biotin. So, SA was used tostudy the ability to bind to the magnetite nanoparticles (MNPs). Thereby, the MNPs can bind with biotinylatedantibodies, which can be applied to enrich the specific antigens for the early diagnosis. Objectives: To Synthesize the MNPs to bind to SA and to study the influence of some factors on the bindingefficiency of the MNPs with SA. Methods: MNPs were synthesized by solvothermal method and treated to obtain the structureFe3O4/SiO2/NH2/CHO to bind with SA by covalent bonds. The transmission electron microscopy (TEM), Fouriertransform infrared spectroscopy (FTIR), vibrating sample magnetometer (VSM), X-ray diffraction (XRD),ultraviolet–vis spectroscopy (UV-Vis), fluorescencemicroscope and the Bradford method were carried out toinvestigate the morphology, properties of the MNPs and the binding of SA to the MNPs. Results: The MNPs were synthesized with sizes of 35 and 95 nm, the SA binding efficiency of the MNPswas respectively 75.57, 58.06 %. And, the suitable pH values of this structure are 7-8. Conclusion: SA was successfully immobilized on the functionalized MNPs. Key words: immobilization, streptavidin, magnetite nanoparticles * Đại học Y Dược Tp. Hồ Chí Minh ** Nam Khoa Biotek Co ***Viện Vật lý Tp. Hồ Chí Minh Địa chỉ liên hệ : ThS. Bùi Trung Thành ĐT: 0938795801 Email: btrthanh@yahoo.comKhoa học Cơ bản 1Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Phụ bản của Số 1 * 2016MỞ ĐẦU ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Hạt nano Fe3O4 với thuộc tính siêu thuận từ, Đối tượng nghiên cứuđộ từ hóa cao, không độc, và khả năng phân tán Sự gắn kết SA với hạt nano Fe3O4 được chứctốt trong nước, làm chúng trở thành vật liệu đầy năng hóa.hứa hẹn và tiềm năng với các ứng dụng như dẫntruyền thuốc, tách chiết trong y sinh, chất tương Vật liệuphản trong kỹ thuật ảnh cộng hưởng từ hạt Ferric chloride hexahydrate (FeCl3.6H2O),nhân(9). Có nhiều phương pháp tổng hợp hạt ammonium hydroxide (NH3.H2O, 25%, w/w),nano Fe3O4, nhưng phương pháp solvothermal ethylene glycol (EG, C2H6O2), sodium acetatetạo các hạt Fe3O4 siêu thuận từ, kích thước từ vài trihydrate (NaAc, CH3COONa.3H2O), 2-chục đến vài trăm nm, và độ từ hóa cao hơn(11). propanol (C3H8O) do Merck sản xuất. TetraethylSau khi được tạo, các hạt nano Fe3O4 có xu orthosilicate (TEOS, Si(OC2H5)4), 3-hướng kết tụ thành từng đám do tương tác Aminopropyltriethoxysilane (APTES,lưỡng cực và lực van der Waals(11). Do vậy, để C9H23NO3Si), glutaraldehyde (GA,ngăn ngừa kết tụ cũng như tránh bị oxi hóa, CH2(CH2CHO)2, 25% v/v), bovine serumchúng thường được phủ bởi các chất silane(1, ...