Kết quả nhân giống khoai tây bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro

Nội dung bài viết là phân tích và nêu kết quả nhân giống khoai tây bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro. Để hiểu rõ hơn, mời các bạn tham khảo chi tiết nội dung bài viết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Kết quả nhân giống khoai tây bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitroT¹p chÝ Khoa häc & C«ng nghÖ - Sè 3(43)/N¨m 2007KÕt qu¶ nh©n gièng khoai t©y cñ bi b»ng kü thuËt nu«i cÊy in vitroTr−¬ng Quang Vinh - §µo Thu Thñy - NguyÔn ThÞ T©m (Tr−êng §H S− ph¹m - §H Th¸i Nguyªn) Chu Hoµng MËu (§H Th¸i Nguyªn) - §inh Thu HiÒn (ViÖn C«ng nghÖ Sinh häc)I. §Æt vÊn ®ÒKhoai t©y ®−îc lµ mét trong n¨m loµi c©y l−¬ng thùc quan träng (lóa m×, lóa n−íc, ng«, ®¹im¹ch, khoai t©y) [2]. HiÖn nay, khoai t©y ®−îc trång phæ biÕn ë 130 n−íc trªn thÕ giíi. T¹i c¸c n−íc«n ®íi, trång khoai t©y b»ng cñ trong vô xu©n – hÌ thu ho¹ch trong mïa thu vµ cÊt gi÷ qua mïa®«ng nhiÖt ®é thÊp nªn viÖc b¶o qu¶n cñ gièng t−¬ng ®èi ®¬n gi¶n, tû lÖ hao h− cña cñ thÊp. TuyvËy, vÉn cÇn gi÷ gièng víi khèi l−îng lín ®Ó trång trong vô sau. Trång khoai t©y b»ng cñ gièngtruyÒn thèng qua nhiÒu n¨m ®l lµm t¨ng tû lÖ nhiÔm bÖnh, ®Æc biÖt lµ virus, lµm yÕu dÇn tÝnhchèng chÞu cña khoai t©y qua sinh s¶n v« tÝnh [4]. Chi phÝ trong s¶n xuÊt b»ng cñ gièng truyÒnthèng ®l lµm h¹n chÕ ®Õn hiÖu qu¶ kinh tÕ, v× nã lµm tiªu tèn 35% ®Õn 40% tæng gi¸ trÞ s¶nphÈm. Sản xuất củ giống mini sạch bệnh lµ tiÕn bé kü thuËt trong s¶n xuÊt gièng khoai t©y ë ViÖtNam, ®l ®¹t ®−îc nh÷ng kÕt qu¶ nhÊt ®Þnh [6].Cñ gièng khoai t©y nu«i cÊy m« cã ®Çy ®ñ ®Æc tÝnh tèt cña khoai t©y trång b»ng cñ truyÒnthèng lµ ®ång ®Òu, søc sèng tèt, ®Æc biÖt kh«ng lÉn t¹p virus [5], [6]. ViÖc b¶o qu¶n, vËn chuyÓncòng dÔ dµng h¬n c¸c c¸ch trång tõ c¸c cñ gièng lín, c©y bÇu ®Êt hoÆc ®o¹n mÇm, h¹t...V× vËy,viÖc nghiªn cøu s¶n xuÊt gièng khoai t©y cñ bi s¹ch bÖnh b»ng c«ng nghÖ tÕ bµo thùc vËt lµ cÇnthiÕt. Bµi b¸o nµy th«ng b¸o kÕt qu¶ b−íc ®Çu ®¹t ®−îc trong nh©n chåi khoai t©y vµ t¹o cñ bis¹ch bÖnh trong èng nghiÖm. C¸c thÝ nghiÖm ®−îc tiÕn hµnh t¹i Phßng C«ng nghÖ tÕ bµo thùc vËt– ViÖn C«ng nghÖ Sinh häc vµ phßng thÝ nghiÖm C«ng nghÖ tÕ bµo thùc vËt – Khoa Sinh –Tr−êng §¹i häc S− ph¹m - §¹i häc Th¸i Nguyªn.II. VËt liÖu vµ ph−¬ng ph¸p- VËt liÖu: Cñ cña c¸c gièng khoai t©y nhËp néi: Gièng Diamant (Hµ Lan) vµ gièngSolara (§øc) ®−îc Trung t©m nghiªn cøu c©y cã cñ cung cÊp, gièng Nicola ( Hµ Lan) do ViÖn Khoahäc Kü thuËt N«ng nghiÖp ViÖt Nam cung cÊp.- Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøuKhö trïng mÉu: MÇm tõ cñ kÝch th−íc ®ång ®Òu 1,5cm – 2,0cm hoÆc ®o¹n th©n khoai t©ycã kÝch th−íc 2,0cm – 3,0 cm mang chåi n¸ch ®−îc chän lµm vËt liÖu ban ®Çu ®Ó khö trïng. C¸cmÉu ®−îc ng©m trong n−íc xµ phßng tõ 10 - 15 phót, röa s¹ch nhiÒu lÇn d−íi vßi n−íc ch¶y, khötrïng s¬ bé b»ng cån 70% trong thêi gian 1 phót, tiÕp tôc khö trïng b»ng HgCl2 nång ®é tõ0,25% ®Õn 1,50% víi nh÷ng kho¶ng thêi gian kh¸c nhau, sau ®ã röa s¹ch nhiÒu lÇn b»ng n−íccÊt v« trïng. MÇm ®l khö trïng ®−îc cÊy vµo m«i tr−êng MS (Murashige & Skoog, 1962) c¬b¶n, bæ sung agar 1% vµ saccharose 2% [3]. §¸nh gi¸ ¶nh h−ëng cña nång ®é HgCl2 vµ thêi giankhö trïng sau 1 tuÇn nu«i cÊy.Nh©n chåi: MÉu s¹ch thu ®−îc ë trªn ®−îc cÊy vµo m«i tr−êng MS c¬ b¶n, bæ sung agar1%, saccharose 2% vµ α -NAA riªng rÏ nång ®é tõ 0,05mg/l ®Õn 0,40mg/l. C¸c b×nh nu«i cÊy®−îc ®Æt trong phßng c©y víi nhiÖt ®é 250±20C, d−íi ¸nh s¸ng ®Ìn huúnh quang kho¶ng 200020T¹p chÝ Khoa häc & C«ng nghÖ - Sè 3(43)/N¨m 2007lux. Mçi c«ng thøc 30 b×nh (kho¶ng 200 c©y) nh¾c l¹i 3 lÇn. §¸nh gi¸ kh¶ n¨ng nh©n chåi quac¸c kho¶ng thêi gian 1 tuÇn – 2 tuÇn vµ 3 tuÇn nu«i cÊy.T¹o cñ: C©y khoai t©y in vitro cã chiÒu cao tõ 4cm - 7cm víi 5 l¸ - 6 l¸ (saukho¶ng 2 - 3 tuÇn) sÏ ®−îc sö dông ®Ó t¹o cñ. ChÊt c¶m øng t¹o cñ lµ BAP ë c¸c nång ®ékh¸c nhau tõ 7,5; 8,0; 8,5; 9,0; 9,5; 10,0; 10,5 mg/l. Sö dông nÒn m«i tr−êng MS c¬ b¶n,saccharose 2% vµ 15% n−íc dõa. C¸c b×nh sau khi bæ sung chÊt c¶m øng t¹o cñ ®−îc ®Ættrong buång tèi nhiÖt ®é 25 0 ±2 0 C. C¸c thÝ nghiÖm nh¾c l¹i 3 lÇn, mçi c«ng thøc 30 b×nh(kho¶ng 200 c©y).III. KÕt qu¶ nghiªn cøu1. KÕt qu¶ nghiªn cøu khö trïng mÉuTrong kü thuËt nu«i cÊy m« thùc vËt, ph−¬ng ph¸p v« trïng m« cÊy th«ng dông nhÊt lµdïng c¸c chÊt ho¸ häc cã ho¹t tÝnh diÖt nÊm, khuÈn. VÝ dô: Canxi hypoclorit, Natri hypoclorit,clorua thuû ng©n, n−íc giaven, chÊt kh¸ng sinh...HiÖu lùc diÖt nÊm khuÈn cña c¸c chÊt nµy phôthuéc vµo thêi gian xö lý, nång ®é vµ kh¶ n¨ng x©m nhËp cña chóng vµo c¸c kÏ ng¸ch låi lâmtrªn bÒ mÆt m« cÊy. Th«ng th−êng ng−êi ta xö lý m« cÊy trong vßng 30 gi©y trong r−îu etylic70% sau ®ã míi xö lý diÖt khuÈn [1].Trong nghiªn cøu nµy, chóng t«i ®l tiÕn hµnh khö trïng c¸c mÇm khoai t©y kháe cã kÝchth−íc tõ 1,5cm - 2,0cm trong cån etylic 70% trong thêi gian 1 phót, sau ®ã xö lý dung dÞchHgCl2 1%, trong c¸c kho¶ng thêi gian tõ 3 phót ®Õn 8 phót, tr¸ng l¹i mÇm b»ng n−íc cÊt v«trïng. MÇm ®l khö trïng ®−îc cÊy vµo m«i tr−êng MS c¬ b¶n, bæ sung agar 1% vµ saccharose2%. Sau 1 tuÇn nu«i cÊy chóng t«i thu ®−îc kÕt qu¶ ë b¶ng 1.B¶ng 1. ¶nh h−ëng cña thêi gian khö trïng tíi kh¶ n¨ng sèng cña mÇm kh«ng bÞ nhiÔmThêi gian khötrïng (phót)345678Tû lÖ sèng cña mÇm kh«ng bÞ nhiÔm (%)(Sau 1 tuÇn)SolaraDiamantNicol ...