Kết quả phân tích gen ở 42 gia đình Việt Nam bị loạn dưỡng giác mạc di truyền

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm tổng hợp, báo cáo kết quả chẩn đoán gen ở 4 loại loạn dưỡng giác mạc di truyền trên, đồng thời nhận xét điểm khác biệt về hình thái lâm sàng và tổn thương gen ở người Việt Nam.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Kết quả phân tích gen ở 42 gia đình Việt Nam bị loạn dưỡng giác mạc di truyềnTẠP CHÍ Y – DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1 - 2013KẾT QUẢ PHÂN TÍCH GEN Ở 42 GIA ĐÌNH VIỆT NAM BỊLOẠN DƢỠNG GIÁC MẠC DI TRUYỀNNguyễn Thanh Hà*; Hoàng Minh Châu**; Kanai A***TÓM TẮTPhân tích gen ở 42 gia đình Việt Nam bị loạn dưỡng giác mạc (LDGM) di truyền. Chiết xuất chuỗiADN từ bạch cầu, nhân bản và giải mã. Trong 13 gia đình LDGM dạng lưới, giải mã gen TGFBI tìmthấy đột biến R124C gây LDGM dạng lưới týp I (3 gia đình) và đột biến H626R gây LDGM dạng lướitýp IIIB (10 gia đình). Trong 8 gia đình LDGM dạng hạt, giải mã gen TGFBI tìm thấy đột biến R555Wgây LDGM dạng hạt týp I (6 gia đình), đột biến R124H gây LDGM Avellino (1 gia đình) và đột biếnD123H gây LDGM dạng hạt hình thái không điển hình (1 gia đình). Trong 19 gia đình LDGM dạngđốm, giải mã gen CHST6 tìm thấy 6 đột biến đồng hợp tử và 3 đột biến dị hợp phối hợp, trong đóR211Q hay gặp nhất (8 gia đình). Trong 2 gia đình LDGM dạng giọt gelatin, giải mã gen M1S1 tìmthấy đột biến 772 - 783del (ATCTATTACCTG) và 772insT và đột biến nt243insC dạng đồng hợp tử.Kết quả nghiên cứu khẳng định gen TGFBI gây LDGM dạng lưới và dạng hạt; gen CHST6 gâyLDGM dạng đốm; gen M1S1 gây LDGM dạng giọt gelatin. Đột biến D123H gây LDGM dạng hạt hìnhthái không điển hình, đột biến 772 - 783 del (ATCTATTACCTG) và 772insT gây LDGM dạng giọt gelatinvà nhiều đột biến gây LDGM dạng đốm lần đầu tiên được phát hiện ở người Việt Nam, chứng tỏ tínhđa dạng của tổn thương gen gây bệnh. Khác biệt ở người Việt Nam so với người châu Á là LDGMdạng lưới týp IIIB hay gặp hơn so với týp I và LDGM dạng hạt týp I hay gặp hơn dạng Avellino.* Từ khóa: Loạn dưỡng giác mạc di truyền; Nhân bản; Giải mã; Đột biến.OUTCOMES OF GENE ANALYSIS FROM 42 VIETNAMESEFAMILIES WITH HEREDITARY CORNEAL DYSTROPHYSUMMARYForty two Vietnamese families with hereditary corneal dystrophy (CD) was analysed for gen mutations.DNA was extracted from peripheral leukocytes, amplified and sequenced. In 13 families with latticeCD, sequencing of TGFBI gene which revealed R124C mutation caused lattice CD type I (3 families)and H626R mutation caused lattice CD type IIIB (10 families). In 8 families with granular CD, sequencingof TGFBI gene which revealed R555W mutation caused granular CD type I (6 families), R124H mutationcaused Avellino CD (1 family) and D23H mutation caused atypical type of granular CD (1 family). In19 families with macular CD, sequencing of CHST6 gene which revealed 6 homozygous mutationsand 3 compound heterozygous mutations, among these R211Q was the most frequent (8 families).In 2 families with gelatinous drop-like CD, sequencing of M1S1 gene revealed 2 different homozygousmutations 772-783del (ATCTATTACCTG) and 772insT and nt243insC. These results confirmed thatTGFBI gene caused lattice CD and granular CD; CHST6 gene caused macular CD and M1S1 genecaused gelatinous drop-like CD. Here, D123H mutation causing atypical granular CD, 772-783 del* Bệnh viện Hữu Nghị** Bệnh viện Mắt Trung ương*** Đại học Juntendo, Tokyo Nhật BảnChịu trách nhiệm nội dung khoa học: PGS. TS. Trần Văn KhoaPGS. TS. Nguyễn Văn Đàm1TẠP CHÍ Y – DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1 - 2013(ATCTATTACCTG) and 772insT mutation causing gelatinous drop-like CD and numerousmutations causing macular CD were first time found in Vietnamese, thus indicated heterogeneityof gene alteration. The differences found in Vietnamese in comparison with other Asian nationalitieswere: lattice CDtype IIIB more common than type I and granular CD type I more common than Avellino.* Key words: Hereditary corneal dystrophy; Amplification; Sequencing; Mutation.ĐẶT VẤN ĐỀThực nghiệm, mô tả lâm sàng.Kết quả phân tích tìm đột biến gen gâyLDGM di truyền dạng lưới, dạng hạt, dạngđốm và dạng giọt gelatin ở người Việt Namđã được báo cáo trên các tạp chí quốc tế[2, 3, 5, 6]. Nghiên cứu này nhằm: Tổnghợp, báo cáo kết quả chẩn đoán gen ở 4loại LDGM di truyền trên, đồng thời nhậnxét điểm khác biệt về hình thái lâm sàng vàtổn thương gen ở người Việt Nam.* Các bước nghiên cứu: chẩn đoán lâmsàng LDGM di truyền dạng lưới, dạng hạt,dạng Avellino, dạng đốm và dạng giọtgelatin bằng khám sinh hiển vi, dựa vào tổnthương giác mạc ở 2 mắt. Ghi nhận phả hệcủa từng gia đình BN. Lấy mẫu máu từ tĩnhmạch ngoại vi. Phân tách tế bào bạch cầutừ mẫu máu bằng ly tâm, sau đó chuyểnsang nghiên cứu tiếp tại Đại học Juntendo,Tokyo, Nhật Bản, theo giấy phép của Bộ Ytế Việt Nam số 10887 YT/QT. Chiết xuấtchuỗi ADN của bộ gen. Nhân bản đoạn ADNchứa đột biến gen bằng PCR (polymerasechain reaction) với cặp mồi đặc hiệu. Nhânbản đoạn ADN với high pure PCR Purificationkit (Roche Diagnostic GmbH, Mannheim,Đức) và giải mã bằng máy giải mã gen tựđộng ADN Sequencer Model 373A (AppliedBiosystems). Mảnh giác mạc bệnh lấy rakhi ghép giác mạc được nghiên cứu môbệnh học.ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨUKẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀBÀN LUẬNLoạn dưỡng ...