Khảo sát đáp ứng miễn dịch với vắc xin Amervacs PRRS trên lợn tại Tuyên Quang

Khảo sát khả năng bảo hộ của vắc xin Amervacs PRRS trên lợn tại Tuyên Quang, kết quả cho thấy, vắc xin Amervac PRRS (vắc xin nhược độc của Công ty Laboratories HIPRA S.A - Tây Ban Nha) an toàn và có khả năng kích thích cơ thể lợn sản sinh kháng thể tốt, có hiệu lực bảo hộ cho 100% số lợn không mắc bệnh tai xanh (hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp - PRRS) trong 4 tháng theo dõi.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khảo sát đáp ứng miễn dịch với vắc xin Amervacs PRRS trên lợn tại Tuyên Quang Nguyễn Văn Quang và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 184(08): 89 - 94 KHẢO SÁT ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH VỚI VẮC XIN AMERVAC PRRS TRÊN LỢN TẠI TUYÊN QUANG Nguyễn Văn Quang *, Nguyễn Thị Kim Lan, Phạm Diệu Thùy, Vũ Minh Thảo, Nguyễn Hữu Hòa Trường Đại học Nông Lâm – ĐH Thái Nguyên TÓM TẮT Khảo sát khả năng bảo hộ của vắc xin Amervacs PRRS trên lợn tại Tuyên Quang, kết quả cho thấy, vắc xin Amervac PRRS (vắc xin nhược độc của Công ty Laboratories HIPRA S.A - Tây Ban Nha) an toàn và có khả năng kích thích cơ thể lợn sản sinh kháng thể tốt, có hiệu lực bảo hộ cho 100% số lợn không mắc bệnh tai xanh (hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp - PRRS) trong 4 tháng theo dõi. Trước và sau khi tiêm vắc xin Amervac PRRS, 100% số lợn được tiêm phòng đều có thân nhiệt và tần số hô hấp nằm trong giới hạn sinh lý bình thường, không lợn nào có biểu hiện phản ứng với vắc xin. Sau 1 tháng có 78,57 - 100% số mẫu huyết thanh có kháng thể trong máu đạt hiệu giá ngưng kết ở mức 1/160. Sau 2 tháng, 3 tháng và 4 tháng 100% số mẫu đều ngưng kết ở hiệu giá từ 1/640 đến 1/2560. Từ khóa: lợn, hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp, hiệu giá kháng thể, vắc xin, Tuyên Quang ĐẶT VẤN ĐỀ* Một trong những bệnh có khả năng lây lan nhanh và gây thiệt hại nhiều cho chăn nuôi lợn là hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn (Porcine Reproductive and Respiratory Sydrome - PRRS) hay bệnh tai xanh ở lợn [1], [3], [4]. Bệnh làm ảnh hưởng trực tiếp đến khả năng sinh sản ở lợn nái, gây sảy thai hoặc đẻ non, lợn con sơ sinh yếu, chết thai, thở khó, đôi khi có triệu chứng thần kinh, tỷ lệ chết cao, lợn thịt giảm ăn, sút cân, lợn đực chất lượng tinh giảm…[7], [9]. Từ năm 2007 - 2013, bệnh đã bùng phát mạnh ở nhiều tỉnh, thành trong cả nước [8], [9], [10]. Lần đầu tiên dịch lợn tai xanh bùng phát ở Hải Dương vào ngày 12/3/2007, sau đó dịch lây lan nhanh và rộng khắp các tỉnh miền Bắc. Các năm tiếp theo dịch PRRS tiếp tục bùng phát ở hầu hết các tỉnh, thành trong cả nước. Tuyên Quang là tỉnh miền núi có nghề chăn nuôi lợn khá phát triển. Theo số liệu thống kê chăn nuôi ngày 01/4/2017, tỉnh Tuyên Quang có tổng số 543.372 con lợn. Mặc dù tỉnh Tuyên Quang chưa có dịch bệnh tai xanh xảy ra, song ở các tỉnh lân cận đã có dịch, vì vậy tỷ lệ mẫu huyết thanh lợn dương tính với virus PRRS chiếm tới 22% (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2017) [6]. Vấn đề phòng bệnh chủ động để bảo về cho đàn lợn bằng vắc xin là rất quan * Tel: 0912 660317, Email: nguyenthikimlan@tuaf.edu.vn trọng (Nguyễn Bá Hiên và cs, 2013 [2]; Văn Đăng Kỳ, 2013 [5]; Yeom M. et al, 2015 [11]). Để có cơ sở khoa học cho công tác phòng bệnh hiệu quả, trong năm 2017, chúng tôi đã nghiên cứu khả năng bảo hộ của vắc xin Amervac PRRS trên lợn tại tỉnh Tuyên Quang. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu Lợn: 600 con, 4 tuần tuổi, khỏe mạnh, nuôi trong điều kiện chăn nuôi công nghiệp (để khảo sát đáp ứng miễn dịch với vắc xin Amervac PRRS). Những lợn này chưa được tiêm vắc xin phòng bệnh tai xanh, là con của những lợn nái cũng chưa được tiêm vắc xin phòng bệnh tai xanh. Mẫu huyết thanh lợn: 300 mẫu (mỗi lợn lấy 1 mẫu) Vắc xin Amervac PRRS và dung dịch pha (Amervac PRRS là vắc xin nhược độc của Công ty Laboratories HIPRA S.A - Tây Ban Nha). Các thiết bị, dụng cụ; giống virus PRRS chuẩn; các loại hóa chất và dung dịch dùng cho nghiên cứu. Nội dung nghiên cứu Xác định khả năng bảo hộ của vắc xin Amervac PRRS trên lợn tại một số trang trại chăn nuôi lợn tại TP. Tuyên Quang, tỉnh Tuyên Quang (mức độ an toàn của vắc xin, hiệu giá kháng thể sau khi tiêm vắc xin Amervac PRRS 1, 2, 3 và 4 tháng). 89 Nguyễn Văn Quang và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ Phương pháp nghiên cứu * Phương pháp sử dụng vắc xin Amervac PRRS - Địa điểm tiêm vắc xin Amervac PRRS cho lợn ở 4 trại lợn trên địa bàn TP. Tuyên Quang Trại 1: Trại lợn Phạm Ngọc Thìn, tại tổ 14, phường Hưng Thành (150 con) Trại 2: Trại lợn Nguyễn Văn Chung, tại tổ 14, phường Hưng Thành (120 con) Trại 3: Trại lợn Nguyễn Thị Kim Oanh, tại tổ 14, phường Hưng Thành (250 con) Trại 4: Trại lợn Long Thị Hằng, tại thôn 1, xã Đội Cấn (80 con) - Điều kiện của lợn được lựa chọn tiêm vắc xin: Trước khi tiêm vắc xin, xác định lợn có kháng thể kháng PRRSV trong huyết thanh hay không: Chọn những đàn lợn không được tiêm phòng bệnh tai xanh, đồng thời là con của những lợn mẹ cũng không được tiêm phòng bệnh này, sau đó kiểm tra định tính thấy không có kháng thể trong máu. Kiểm tra thân nhiệt, tần số hô hấp và biểu hiện của lợn trước khi tiêm vắc xin. - Tiêm vào bắp thịt cho mỗi lợn 2 ml vắc xin Amervac PRRS pha với dung dịch pha có sẵn. Theo dõi thân nhiệt, tần số hô hấp và biểu hiện của lợn sau khi được tiêm vắc xin. * Phương pháp lấy mẫu huyết thanh lợn sau tiêm vắc xin: Lấy mẫu huyết thanh lợn sau khi tiêm vắc xin 1, 2, 3 và 4 tháng. Mỗi thời điểm lấy ngẫu nhiên 75 mẫu huyết thanh (tổng là 300 mẫu). Xác định hiệu giá kháng thể sau tiêm Amervac PRRS bằng phương pháp IPMA. Các mẫu huyết thanh được pha loãng với dung dịch pha loãng theo cơ số 2, bắt đầu từ độ pha loãng 1/40. - Khả năng bảo hộ lợn được xác định bằng hiệu giá kháng thể: Theo TCVN (2014), vắc xin PRRS có khả năng bảo hộ khi hiệu giá kháng thể ngưng kết đạt từ 1/160 trở lên. * Phương pháp IPMA (Immuno – Peroxidase Monolayer Assay) xác định hiệu giá kháng thể được thực hiện theo quy trình chẩn đoán của Trung tâm chẩn đoán thú y trung ương: Bước 1: Nuôi cấy tế bào MARC - 145 - Hồi phục tế bào - Cấy chuyển tế bào 90 184(08): 89 - 94 - Tách tế bào ra khỏi lọ Bước 2: Xử lý mẫu để phân lập virus Bệnh phẩm là huyết thanh: Lắc bằng máy trộn, ly tâm nhanh bằng máy ly tâm ở vận tốc 8000 vòng/phút trong 1 phút. Sau đó xử lý ở nhiệt độ 56oC trong 30 phút để diệt bổ thể rồi đem tiến hành các phương pháp để phát hiện kháng thể. Bước 3: Gây nhiễm các tế bào bằng virus PRRS - Lấy giống virus chuẩn từ nơi bảo quản, làm tan đá nhanh rồi pha loãng với môi trường MEN chứa 5% FCS để được liều 500 TCID50 vi ...