Kỹ thuật nuôi cấy và bảo quản P.falciparum dài ngày trong phòng thí nghiệm

Nhằm đáp ứng nhu cầu nghiên cứu khoa học và thực hiện các thử nghiệm đánh giá hiệu lực của các thuốc điều trị sốt rét, đồng thời phục vụ cho công tác giảng dạy. Sau một thời gian dài thực hiện việc nuôi cấy, bảo quản ký sinh trùng sốt rét Plasmodium falciparum trong phòng thí nghiệm, Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng TP. Hồ Chí Minh đã nghiên cứu, bổ sung hoàn thiện các nội dung kỹ thuật, các thành phần, tiêu chuẩn, điều kiện nuôi cấy, bảo quản và tổ chức biên soạn thành tài liệu hướng dẫn kỹ thuật nuôi và bảo quản Plasmodium falciparum ở phòng thí nghiệm.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Kỹ thuật nuôi cấy và bảo quản P.falciparum dài ngày trong phòng thí nghiệmpituitary function after brain injury – induced Matta (2006). “Incidence of adrenal insufficiency afterhypopiyuitarism: A prospective 12 month study”. JCEM severe traumatic brain injury varies according to90: 6085 – 6092. definition used: clinical implications”. British Journal of 4. Bondanelli M, de Marinis L, Ambrosio MR, Monesi Anaesthesia 96 (1): 72–6M, Valle D, Zatelli MC, Fusco A, Bianchi A, Farneti M & 8. Ghigo E, Masel E, Aimaretti G, et al (2005),degli Uberti EC, (2004) “Occurrence of pituitary “Consensus guidlines on screening for hypopituitarismdysfunction following traumatic brain injury”, Journal of following traumatic brain injury”, Brain Injury 19:711–Neurotrauma 21: 685–696. 724. 5. Brooke AM, Kalingag LA, Miraki-Moud F, et al 9. Herrmann BL, Rehder J (2006). “ Hypopituitarism(2006). “Dehydroepiandrosterone (DHEA) replacement following severe traumatic brain injury”. Experimentalreduces growth hormone (GH) dose requirement in and Clinical Endocrinology and Diabetes 114 316–321.female hypopituitary patients on GH replacement”. Clin 10. Kelly DF, Gaw Gonzalo IT, Cohan P, Berman N,Endocrinol (Oxf) 65(5):673–80. Swedloff R, Wang C (2000), “Hypopituitarism following 6. Bushnik T, Englander J & Katznelson L (2007).” traumatic brain injury and aneurysmal subarachnoidFatigue after TBI: association with neuroendocrine hemorrhage: a preliminary report”, Journal ofabnormalities”. Brain Injury 21 559–566. Neurosurgery 93:743–752. 7. F. Bernard1, J. Outtrim, D. K. Menon and B. F. Kü THUËT NU¤I CÊY Vµ B¶O QU¶N P.FALCIPARUM DµI NGµY TRONG PHßNG THÝ NGHIÖM Lª Thµnh §ång, TrÞnh Ngäc H¶i Vin St rét - KST - CT TP H Chí Minh ĐẶT VẤN ĐỀ b) Vật tư, dung môi, hóa chất tiêu hao: Nhằm đáp ứng nhu cầu nghiên cứu khoa học và - Màng lọc millipore kích thước 0,22µlthực hiện các thử nghiệm đánh giá hiệu lực của các - Kim bướm, bơm tiêm 1, 2, 5 và 10 mlthuốc điều trị sốt rét, đồng thời phục vụ cho công tác - Nitơ lỏng, mẫu máu, lam kínhgiảng dạy. Sau một thời gian dài thực hiện việc nuôi - Dung dịch sulfocromic đậm đặccấy, bảo quản ký sinh trùng sốt rét Plasmodium - Ethanol và methanolfalciparum trong phòng thí nghiệm, Viện Sốt rét - Ký - Chất chống đông: heparin 5000 IUsinh trùng - Côn trùng TP. Hồ Chí Minh đã nghiên - NaHCO3 5%, sorbitol 5%, RPHS, pH, bột RPMIcứu, bổ sung hoàn thiện các nội dung kỹ thuật, các 1640, glucozathành phần, tiêu chuẩn, điều kiện nuôi cấy, bảo quản - Giemsa với dung dịch đệm pH 7,2và tổ chức biên soạn thành tài liệu hướng dẫn kỹ - Gentamicinethuật nuôi và bảo quản Plasmodium falciparum ở - NaOH, axit citric, natricitrat, NaCl 0,9%, glyxerolphòng thí nghiệm. Tài liệu này đã được Hội đồng Lưu ý: Các hoá chất phải có hạn sử dụng và bảoKhoa học kỹ thuật và các chuyên gia, các nhà khoa quản đúng theo yêu cầu.học góp ý và thống nhất thông qua. d) Các loại môi trường: KỸ THUẬT NUÔI CẤY VÀ BẢO QUẢN - Môi trường nuôi cấy RPMI 1640 (gibco hoặc 1. Điều kiện phòng nuôi cấy và trang thiết bị, sigma)dụng cụ, vật tư - Môi trường RP 1.1. Điu kin phòng - Môi trường đầy đủ có 10% huyết thanh (RPHS) Phòng nuôi cấy phải đảm bảo đủ diện tích để lắp - Môi trường đầy đủ (RPHS)đặt các buồng nuôi, có lối đi, nơi đứng thao tác, có - Hematocritđiều hoà không khí, máy hút ẩm và đèn cực tím. - Hepès 1.2. Trang thit b, dng c, vt t Tùy theo nhu cầu mà mua sắm các dụng cụ, vật a) Trang thiết bị, dụng cụ cố định: tư, hóa chất và môi trường đủ đáp ứng. - Box vô trùng, 2. Nguyên tắc vô trùng trong thu thập mẫu và - Tủ sấy, tủ ấm, tủ lạnh thường và tủ lạnh sâu nuôi cấy - Nồi cách thuỷ, nồi hấp, bình đựng nitơ lỏng 2.1. Nguyên tc vô trùng trong thu thp mu - Phích đá, cân phân tích, máy đo pH, kính hiển vi máu thc đa - Máy cất nước 1 và 2 lần, bình nuôi (dessicator), - Nơi tiến hành lấy máu phải thoáng và sạch.chai 20ml,100ml ...