Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu chế tạo phức hệ nano chitosan mang gen mã hóa telomerase reverse transcriptase (hTERT)

Mục tiêu của đề tài là thiết kế thành công vector tái tổ hợp biểu hiện trong tế bào động vật pcDNA3.1(+)/hTERT mang đoạn gen mã hóa cho epitope của kháng nguyên telomerase reverse transcriptase (hTERT). Hệ vector tái tổ hợp này được bao gói trong nano chitosan.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu chế tạo phức hệ nano chitosan mang gen mã hóa telomerase reverse transcriptase (hTERT) ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ………………… Hoàng Thị NgàNGHIÊN CỨU CHẾ TẠO PHỨC HỆ NANO CHITOSANMANG GEN MÃ HÓA TELOMERASE REVERSE TRANSCRIPTASE (hTERT) LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC Hà Nội, 2013 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ………………… Hoàng Thị NgàNGHIÊN CỨU CHẾ TẠO PHỨC HỆ NANO CHITOSANMANG GEN MÃ HÓA TELOMERASE REVERSE TRANSCRIPTASE (hTERT) Chuyên ngành : Sinh học thực nghiệm Mã số: 60420114 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. LÃ THỊ HUYỀN PGS. TS. NGUYỄN QUANG HUY Hà Nội, 2013 LỜI CẢM ƠN Trước hết, tôi xin gửi lời cảm cám ơn chân thành và sâu sắc nhất đến TS. LãThị Huyền, PGS. TS. Nguyễn Quang Huy đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo và giúpđỡ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu vừa qua. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS. TS. Lê Quang Huấn, Trưởngphòng Phòng Công nghệ tế bào động vật – Viện Công nghệ sinh học – Viện Hànlâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã tận tình hướng dẫn, và tạo mọi điều kiệntrong suốt quá trình nghiên cứu đề tài. Tôi xin gửi lời cảm ơn tới NCS. Lê Thị Thùy Dương, NCS. Lê Thị Hạnh,CN. Phạm Văn Phúc và các anh chị tại phòng Công nghệ tế bào động vật đã giúpđỡ rất nhiệt tình và tạo điều kiện tốt nhất trong quá trình học tập tại đây. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới các thầy giáo, cô giáo dạy Khoa Sinh học, Bộmôn Sinh lý thực vật và hóa sinh, Trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốcgia Hà Nội đã dạy bảo và giúp đỡ trong thời gian học tập và nghiên cứu. Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình, người thân và bạn bè luôn động viên vàgiúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày…..tháng…..năm 2013 Học viên Hoàng Thị Ngà MỤC LỤCLỜI CẢM ƠNDANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮTDANH MỤC CÁC HÌNHDANH MỤC CÁC BẢNGMỞ ĐẦU .....................................................................................................................1CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .....................................................................3 1.1. Giới thiệu về telomerase reverse transcriptase ...............................................3 1.1.1. Giới thiệu chung telomere ở người ............................................................3 1.1.2. Hoạt động telomerase ở người .................................................................5 1.1.3. Tình hình nghiên cứu hTERT .....................................................................7 1.1.4. Vacxin DNA và triển vọng tạo vacxin DNA với kháng nguyên hTERT .....9 1.2. Tổng quan về chitosan ....................................................................................11 1.2.1. Giới thiệu chung chitosan .......................................................................11 1.2.2. Ứng dụng của chitosan ...........................................................................13 1.2.3. Giới thiệu chung về nano chitosan ..........................................................14 1.2.4. Chitosan, chất mang dẫn truyền gen ......................................................16 1.2.5. Các phương pháp tạo nano chitosan .......................................................16CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................22 2.1. Vật liệu ...........................................................................................................22 2.1.1. Vật liệu và hóa chất .................................................................................22 2.1.2. Thiết bị .....................................................................................................22 2.1.3. Môi trường và dung dịch .........................................................................23 2.2. Phương pháp nghiên cứu ................................................................................24 2.2.1. Phương pháp tích hợp đoạn gen hTERT vào vector pcDNA3.1(+) ........24 2.2.2. Phương pháp cắt bằng enzyme giới hạn .................................................25 2.2.3. Phương pháp điện di trên gel agarose ....................................................26 2.2.4. Phương pháp thu đoạn DNA từ gel agarose ...........................................26 2.2.5. Phương pháp biến nạp plasmid vào tế bào E. coli ...