Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Thiết kế vector biểu hiện mang gen scFv kháng CD47 và biểu hiện protein trong vi khuẩn E.coli

Đề tài được nghiên cứu với mục tiêu thiết kế thành công vector biểu hiện mang gen scFv đặc hiệu CD47 và biểu hiện được protein trong vi khuẩn E.coli. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Thiết kế vector biểu hiện mang gen scFv kháng CD47 và biểu hiện protein trong vi khuẩn E.coli ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Vân AnhTHIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN MANG GENscFv KHÁNG CD47 VÀ BIỂU HIỆN PROTEIN TRONG VI KHUẨN E. coli LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2019 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Vân AnhTHIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN MANG GENscFv KHÁNG CD47 VÀ BIỂU HIỆN PROTEIN TRONG VI KHUẨN E. coli Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420101.14 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Người hướng dẫn khoa học: 1. PGS. TS Nguyễn Quang Huy 2. TS. Lã Thị Huyền Hà Nội - 2019 LỜI CẢM ƠN Không có sự thành công của một học viên nào mà không có sự hỗ trợ,giúp đỡ và đóng góp của các Thầy cô. Trong suốt thời gian học tập, nghiêncứu tại trường Đại học Khoa học Tự nhiên – Đại học Quốc gia Hà Nội, ViệnHàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam, em đã nhận được sự hướng dẫnvà giúp đỡ của các Thầy cô trong Trường và đặc biệt là các Thầy cô trongKhoa Sau đại học. Lời đầu tiên em xin gửi lời cảm ơn chân thành và sâu sắc nhất tới PGS.TS Nguyễn Quang Huy – Trưởng khoa Hoá sinh Trường Đại học Khoa họcTự Nhiên Hà Nội, TS. Lã Thị Huyền – Phòng công nghệ động vật viện hànlâm khoa học công nghệ Việt Nam đã tận tình hướng dẫn và dìu dắt em trongsuốt thời gian em học tập và hoàn thành luận văn. Tiếp theo, em xin được gửi lời cảm ơn chân thành tới các thầy, cô củaKhoa Sinh học – Đại học Khoa học Tự nhiên đã nhiệt tình giảng dạy và tạođiều kiện giúp đỡ để em có thể hoàn thành luận văn. Em cũng xin chân thành cảm ơn toàn thể các GS, TS, cán bộ nghiên cứucủa Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã tạo điều kiện, luôntận tình sát sao chỉ bảo, chia sẻ những kinh nghiệm và cho em những lờikhuyên quý báu trong công việc cung như cuộc sống. Và cuối cùng, bằng tình cảm chân thành và yêu mến em xin được gửilời biết ơn sâu sắc tới gia đình và người thân, những người luôn ủng hộ, độngviên và tạo cho em những điều kiện tốt nhất về tinh thần cũng như vật chấttrong suốt thời gian học tập và thực tập. Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Học viên Nguyễn Thị Vân Anh MỤC LỤCLỜI CẢM ƠN ............................................................................................................. 1MỞ ĐẦU ..................................................................................................................... 1CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ..................................................................... 31.1. Tổng quan về bệnh ung thư ....................................................................................... 3 1.1.1. Ung thư ........................................................................................................... 3 1.1.2. Ảnh hưởng của bệnh ung thư ......................................................................... 5 1.1.3. Nguyên nhân gây ung thư .............................................................................. 51.2. Protein kháng nguyên CD47 và kháng thể kháng CD47...................................... 7 1.2.1. Protein kháng nguyên CD47- đích trong điều trị ung thư ........................... 71.3.3. Các thành tựu sử dụng kháng thể kháng CD47 trong điều trị ung thư .................. 91.3. Kháng thể và kháng thể đơn chuỗi ứng dụng trong điều trị bệnh ung thư..... 10 1.4. Mảnh kháng thể đơn chuỗi (scFv).................................................................. 11CHƢƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........................... 132.1. Vật liệu ........................................................................................................................ 13 2.1.1. Hóa chất và sinh phẩm ................................................................................ 132.2. Thiết bị ........................................................................................................................ 13 2.3.1. Nhân gen mã hóa scFv kháng CD47 bằng phản ứng PCR ....................... 14 2.3.2. Điện di trên gel agarose............................................................................... 14 2.3.5. Gắn nối sản phẩm PCR vào vector pET22b+ ............................................ 16 2.3.6. Biến nạp sản phẩm gắn nối vào tế bào khả biến E.coli DH5α bằng phương pháp sốc nhiệt ........................ ...