Lưu hành kháng thể kháng H. pylori, CagA, VacA ở các bệnh nhân có bệnh dạ dày - tá tràng và người bình thường không triệu chứng

ự phát hiện ra Helicobacter pylori (H. pylori) và vai trò của nó trong các bệnh về dạ dày - tá tràng là một trong những phát hiện có ý nghĩa nhất trong lĩnh vực vi khuẩn học và hệ thống tiêu hóa cuối thế kỷ 20. Tiếp sau phát hiện của Marshall và Warren năm 1983 [8], rất nhiều nghiên cứu đã được công bố. Ngày nay H. pylori đã được thừa nhận là nguyên nhân chủ yếu gây viêm, loét dạ dày - tá tràng, có vai trò quan trọng trong bệnh sinh của ung thư dạ dày...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Lưu hành kháng thể kháng H. pylori, CagA, VacA ở các bệnh nhân có bệnh dạ dày - tá tràng và người bình thường không triệu chứng TCNCYH 23 (3) 2003 L−u hµnh kh¸ng thÓ kh¸ng H. pylori, CagA, VacA ë c¸c bÖnh nh©n cã bÖnh d¹ dµy - t¸ trµng vµ ng−êi b×nh th−êng kh«ng triÖu chøng NguyÔn Th¸i S¬n1, Phïng §¾c Cam2, Åsa Ljungh3 1 Häc viÖn qu©n y 2 ViÖn vÖ sinh dÞch tÔ trung −¬ng 3 Khoa vi khuÈn häc, §¹i häc Lund, Thôy §iÓn XÐt nghiÖm 110 mÉu huyÕt thanh bÖnh nh©n cã bÖnh d¹ dµy-t¸ trµng vµ 31 mÉu tõ ng−êi b×nhth−êng b»ng kü thuËt immunoblot cho thÊy, tû lÖ nhiÔm H. pylori cao ë c¶ hai nhãm. Tû lÖ H. pylorid−¬ng tÝnh ë c¸c bÖnh nh©n loÐt d¹ dµy, loÐt t¸ trµng vµ viªm d¹ dµy lÇn l−ît lµ 76,5; 95,8 vµ 73%.Tû lÖ huyÕt thanh häc d−¬ng tÝnh víi H. pylori ë ng−êi lµnh lµ 64,5%. Tû lÖ kh¸ng thÓ kh¸ng cagAvµ VacA lµ 86.2% vµ 60.6% ë ng−êi bÖnh vµ 70% vµ 40.0% ë ng−êi lµnh.i. §Æt vÊn ®Ò tiªu t×m hiÓu thªm vÒ tØ lÖ l−u hµnh kh¸ng thÓ kh¸ng H. pylori, vµ tØ lÖ mang CagA, VacA ë Sù ph¸t hiÖn ra Helicobacter pylori (H. c¸c bÖnh nh©n cã bÖnh d¹ dµy – t¸ trµng vµpylori) vµ vai trß cña nã trong c¸c bÖnh vÒ d¹ ng−êi b×nh th−êng kh«ng triÖu chøng b»ng küdµy - t¸ trµng lµ mét trong nh÷ng ph¸t hiÖn cã thuËt Immunoblot.ý nghÜa nhÊt trong lÜnh vùc vi khuÈn häc vµ hÖ ii. VËt liÖu vµ ph−¬ng ph¸pthèng tiªu hãa cuèi thÕ kû 20. TiÕp sau ph¸t nghiªn cøuhiÖn cña Marshall vµ Warren n¨m 1983 [8], rÊtnhiÒu nghiªn cøu ®· ®−îc c«ng bè. Ngµy nay 1. §èi t−îngH. pylori ®· ®−îc thõa nhËn lµ nguyªn nh©nchñ yÕu g©y viªm, loÐt d¹ dµy - t¸ trµng, cã vai 1.1. BÖnh nh©ntrß quan träng trong bÖnh sinh cña ung th− d¹ 110 bÖnh nh©n (tuæi tõ 15 ®Õn 70, trungdµy [9]. Kh¶ n¨ng g©y bÖnh cña H. pylori cã b×nh 39) cã viªm hoÆc loÐt d¹ dµy, t¸ trµngliªn quan ®Õn hai yÕu tè ®éc tÝnh quan träng ®−îc chÈn ®o¸n qua néi soi t¹i BÖnh viÖn 103,cña chóng lµ CagA vµ VacA [5]. Møc ®é l−u Häc viÖn qu©n y tõ 3/1998 ®Õn 6/2000, gåm:hµnh cña H. pylori qua c¸c nghiªn cøu cho thÊy - LoÐt d¹ dµy: 17 bÖnh nh©nkh¸c nhau gi÷a c¸c quèc gia, khu vùc vµ s¾ctéc [10]. Nh×n chung, tØ lÖ nhiÔm H. pylori ë - LoÐt t¸ trµng: 24 bÖnh nh©nc¸c n−íc ®ang ph¸t triÓn cao h¬n h¼n ë c¸c - LoÐt d¹ dµy kÌm loÐt t¸ trµng: 20 bÖnhn−íc ph¸t triÓn [10]. ViÖt Nam lµ mét n−íc nh©n®ang ph¸t triÓn, tØ lÖ nhiÔm H. pylori t−¬ng ®èicao qua mét sè nghiªn cøu ®−îc c«ng bè [1]; - Viªm d¹ dµy: 26 bÖnh nh©ntuy nhiªn c¸c yÕu tè CagA vµ VacA vÉn ch−a®−îc nghiªn cøu nhiÒu. §Ò tµi nµy nh»m môc54TCNCYH 23 (3) 2003 - Viªm d¹ dµy kÌm viªm t¸ trµng: 23 bÖnh Sweden). C¸c líp protein kh¸ng nguyªn ®−îcnh©n ph©n t¸ch b»ng ®iÖn di gradient trªn gel SDS- PAGE (Precast gradient gel 10-20% Tris-HCl, 1.2. Ng−êi khoÎ m¹nh catalog 345-0045, Bio - Rad, CA, USA) víi bé 31 ng−êi b×nh th−êng khoÎ m¹nh (tuæi tõ 19 ®iÖn di gel (Bio - Rad, Richmond, CA, USA).®Õn 60, trung b×nh 32), kh«ng cã tiÒn sö vµ TiÕp theo c¸c kh¸ng nguyªn l¹i ®−îc ®iÖn ditriÖu chøng d¹ dµy- t¸ trµng tÝnh ®Õn thêi ®iÓm chuyÓn sang mµng PVDF. Sau khi ®iÖn di,nghiªn cøu. phÇn mµng chøa c¸c marker mÉu ®−îc c¾t TÊt c¶ c¸c ®èi t−îng nghiªn cøu ®Òu riªng, nhuém Amidoblack. PhÇn mµng ®· phñ®−îc lÊy m¸u tÜnh m¹ch dïng cho xÐt nghiÖm kh¸ng nguyªn ®−îc ®¸nh dÊu, c¾t thµnh c¸c d¶iH. pylori. 3mm chiÒu réng, ®Æt vµo khay ñ, phñ huyÕt thanh bÖnh nh©n pha lo·ng 1:100, 1 ml/ d¶i, ®Ó 2. VËt liÖu qua ®ªm ë 8oC. H«m sau, c¸c d¶i mµng ®−îc - Kh¸ng nguyªn t¸ch chiÕt b»ng ph−¬ng lÊy ra röa s¹ch huyÕt thanh thõa, råi sau ®ãph¸p glycine tõ chñng chuÈn H. pylori CCUG ®−îc ñ tiÕp víi kh¸ng thÓ kh¸ng IgG ng−êi g¾n17874 (Lund University, Sweden). peroxidase (Dako, Glostrup, Denmark) pha lo·ng 1/600, ñ trong 2 giê, sau ®ã röa s¹ch - SDS - PAGE (sodium dodecylsulfate kh¸ng thÓ thõa. C¸c vÞ trÝ kÕt hîp ®Æc hiÖu gi÷apolyacrylamide gel electrophoresis) víi Precast kh¸ng nguyªn vµ kh¸ng thÓ trªn mµng ®−îcgradient gel 10- 20% Tris-HCl (catalog 345- ph¸t hiÖn sau khi ñ 30 phót víi ®Öm c¬ chÊt0045, Bio-Rad, CA, USA). (gåm sodium acetate buffer, 1% 3-amino-9- - Bé ®iÖn di thÊm (electroblotter equipment, ethyl Carbazole, H202 30%) [4].Ancos, Vig, Denmark) ...