Nghiên cứu định lượng đồng thời metformin và sitagliptin trong chế phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xây dựng phương pháp định lượng đồng thời metformin và sitagliptin (SG) trong chế phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Đối tượng và phương pháp: tiến hành phân tích “Viên nén bao phim Janumet” do Công ty Merck Sharp and Dohme sản xuất trên hệ thống HPLC với cột: RP8 (250 x 4,6 mm, 5 µm), bước sóng 265 nm, tốc độ dòng 1 ml/phút, thể tích tiêm 20 µl, pha động là hỗn hợp methanol-nước chứa 0,3% triethylamin 0,1% (60:40).
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu định lượng đồng thời metformin và sitagliptin trong chế phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng caoT¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 8-2016NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI METFORMIN VÀSITAGLIPTIN TRONG CHẾ PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁPSẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAONguyễn Ngọc Nhã Thảo*; Phạm Thị Mỹ Lệ*Phạm Thành Suôl*; Nguyễn Thị Ngọc Vân*TÓM TẮTMục tiêu: xây dựng phương pháp định lượng đồng thời metformin và sitagliptin (SG) trongchế phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Đối tượng và phương pháp: tiến hành phântích “Viên nén bao phim Janumet” do Công ty Merck Sharp and Dohme sản xuất trên hệ thốngHPLC với cột: RP8 (250 x 4,6 mm, 5 µm), bước sóng 265 nm, tốc độ dòng 1 ml/phút, thể tíchtiêm 20 µl, pha động là hỗn hợp methanol-nước chứa 0,3% triethylamin 0,1% (60:40). Kết quả:phương pháp định lượng đã xây dựng đảm bảo tính đặc hiệu, tính tương thích, tính tuyến tính,độ đúng và độ lặp lại. Áp dụng xác định hàm lượng metformin và SG trên 3 lô “Viên nén baophim Janumet”. Kết luận: đã xây dựng được quy trình định lượng đồng thời metformin và SGđảm bảo đơn giản, tiết kiệm thời gian, không sử dụng hệ đệm vô cơ như phosphat gây đóngmuối hệ thống sắc ký và giảm tuổi thọ của thiết bị.* Từ khóa: Metformin hydrochlorid; Sitagliptin; HPLC; Định lượng.Study of Simultaneous Measurement of Metformine and Sitagliptinby HPLC MethodSummaryObjectives: To establish a reversed-phase high performance liquid chromatography (HPLC)method for simultaneous measurement of metformine hydroclorid (MH) and sitagliptin (SG) infilm coated tablet. Subjects and methods: Film coated Janumet tablet was analyzed on aPhenomenex Luna RP - C8 column (250 x 4.6 mm, 5 µm) with mobile phase in isocratic modeconsisting of methanol - water 60:40 v/v containing 0.3% v/v triethylamine and was adjusted tothe pH of 9.5 with formic acid with DAD detector highly selective to HPLC system. The flow ratewas 1 mL min-1 and the photodiod - array detection wave length was 265 nm. Result: Thismethod ensures the specificity, system suitability, linearity, accuracy and repeatability. Theproposed method was successfully applied for the analysis of MH and SG in film coatedJanumet tablet. Conclusion: A simple, rapid, and non-inorganic buffer HPLC method forsimultaneous determination of MH and SG phosphate, in tablet dosage form has beendeveloped and validated.* Key words: Metformine hydrochloride; Sitagliptin; HPLC; Measurement.* Trường Đại học Y Dược Cần ThơNgười phản hồi (Corresponding): Nguyễn Thị Ngọc Vân (ntnvan@ctump.edu.vn)Ngày nhận bài: 24/06/2016; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 01/09/2016Ngày bài báo được đăng: 16/09/201621T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 8-2016ĐẶT VẤN ĐỀMetformin hydroclorid (MH) là thuốcđiều trị đái tháo đường, dùng đường uống,ưu tiên được lựa chọn trong điều trị khởiđầu đái tháo đường týp 2. MH giúp hạđường huyết thông qua cơ chế giảm tổnghợp glucose ở gan. Sitagliptin phosphatmonohydrat là thuốc điều trị đái tháođường týp 2 thuộc nhóm ức chế DPP-4(dipeptidyl peptidase-4), có tác dụng giảmphân hủy GLP-1 và tăng bài tiết insulin,giảm tiết glucagon từ tuyến tụy, dẫn đếngiảm đường huyết. Việc kết hợp 2 thànhphần này trong chế phẩm đã có trên thịtrường ở dạng viên bao phim phóng thíchtức thời, dạng phóng thích kéo dài nàyvẫn chưa có ở Việt Nam. Trên thế giới,sử dụng các phương pháp để định lượngđồng thời hai hoạt chất trên như quangphổ tử ngoại khả kiến, sắc ký lỏng hiệunăng cao; sắc ký lớp mỏng hiệu năng caovà điện di mao quản… [1, 2, 4, 8]. Tuynhiên, các phương pháp này sử dụng hệpha động phức tạp, thời gian phân tíchdài [5, 6, 7, 9]. Tại Việt Nam, chưa có đềtài nào nghiên cứu định lượng đồng thờiMH và SG bằng phương pháp sắc kýlỏng hiệu năng cao (HPLC). Do đó, nghiêncứu này thực hiện với mục tiêu: Xây dựngvà thẩm định quy trình định lượng đồngthời MH và SG trong chế phẩm bằngphương pháp HPLC-DAD với hệ phađộng đơn giản, thời gian phân tích ngắn.NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ VÀPHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU1. Nguyên liệu và thiết bị.* Nguyên liệu:- Mẫu thử.Chế phẩm thử: viên nén bao phimJanumet® (Công ty Merck Sharp và22Dohme) chứa MH 500 mg và SG 50 mg.Số đăng ký: VN1-694-12. Số lô: J001206.- Hóa chất - dung môi.+ Chất chuẩn đối chiếu: MH có hàmlượng 99,54% (tính trên chế phẩm nguyêntrạng), số kiểm soát: QT 168 050413 doViện Kiểm nghiệm Thuốc TP.HCM cungcấp. SG phosphat monohydrat có hàmlượng 99,15% (tính trên chế phẩmnguyên trạng, số kiểm soát): WS/STP13012, do Công ty Glenmark GenericsLtd., Ấn Độ cung cấp.+ Dung môi: methanol (MeOH) đạt tiêuchuẩn dùng cho HPLC (Baker, Mỹ) vàaxít formic, triethylamin dùng trong phântích kiểm nghiệm (Merck, Đức).- Thiết bị.Hệ thống HPLC Hitachi L-2000 với đầudò dãy diod quang Hitachi L-2455, bểsiêu âm Elmasoonic S70H, cân phân tíchABT 220-5DM, máy đo pH HANNApH 211.2. Phương pháp nghiên cứu.* Chuẩn bị dung dịch:- Dung dịch chuẩn gốc:+ Dung dịch MET chuẩn gốc 2 mg/ml( ...