Nghiên cứu quy trình gây miễn dịch tạo kháng thể IgY kháng vi khuẩn (vibrio cholerae) trên gà mái

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xây dựng quy trình gây miễn dịch trên gà mái với kháng nguyên VKT, tạo cơ sở khoa học để thu thập kháng thể IgY kháng VKT từ trứng do gà mái được gây miễn dịch đẻ ra. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của tài liệu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu quy trình gây miễn dịch tạo kháng thể IgY kháng vi khuẩn (vibrio cholerae) trên gà máiTẠP CHÍ Y – DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1 - 2013NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH GÂY MIỄN DỊCH TẠO KHÁNG THỂIgY KHÁNG VI KHUẨN (VIBRIO CHOLERAE) TRÊN GÀ MÁIHoàng Trung Kiên*; Lê Thu Hồng*; Lê Thu Hà**; Nguyễn Đặng Dũng*TÓM TẮTSản xuất kháng thể kháng vi khuẩn tả (VKT) (Vibrio cholerae) để sử dụng như một biện pháp tạomiễn dịch thụ động trong dự phòng và điều trị nhiễm VKT là một hướng nghiên cứu đáng quan tâm.Trong nghiên cứu này, chúng tôi khảo sát khả năng gây miễn dịch trên gà mái với chủng VKT đượcbất hoạt bằng nhiệt, đồng thời xác định khả năng phân lập kháng thể IgY kháng VKT từ trứng của gàđược gây miễn dịch trước đó. Kết quả: gà được gây miễn dịch với kháng nguyên là VKT bất hoạt(nồng độ kháng nguyên tương đương với mật độ VKT 3 x 1010 CFU/ml) có sự hình thành kháng thểIgY đặc hiệu với kháng nguyên VKT sau 1 tuần gây miễn dịch. Kháng thể IgY phân lập từ trứng củagà được gây miễn dịch cho phản ứng dương tính với kháng nguyên VKT (trên ELISA) và có khảnăng gây ngưng kết VKT trong môi trường lỏng.* Từ khóa: Kháng thể IgY; Vi khuẩn tả; Gà mái.STUDY ON PRODUCTION OF YOLK IMMUNOGLOBULIN (IgY)AGAINST VIBRIO CHOLERAE BY EGG-LAYING HENSIMMUNIZATIONSUMMARYProduction of immunoglobulin against Vibrio cholerae to be used as passive preventive and/ortherapeutic method in V. cholerae infection is a research field that interests many scientists. In thisstudy, we investigated the effectiveness of the immunization on egg-laying hens with heat-inactivatedV. cholerae. In addition, we determined the possibility of isolating IgY against V. cholerae from eggyolk laid by the hens previously immunized with V. cholerae antigen.The results showed that: 1- immunization on egg-laying hens using whole cell heat-inactivated V.cholerae as antigen (at bacterial concentration of 3.1010CFU/ml) could elicit an IgY productionresponse one week after first challenge with antigen; 2- IgY isolated from egg yolk laid by the immunizedhens showed positive activity against V. cholerae, in both ELISA and bacterial agglutination assays.* Key words: Immunoglobulin Y (IgY); Vibrio cholerae.ĐẶT VẤN ĐỀTiêu chảy cấp do tả là bệnh truyền nhiễmcấp tính do nhiễm vi khuẩn tả đường tiêuhóa. ệnh có thể gây ra các vụ dịch lớn vàđược coi là một bệnh truyền nhiễm nguyhiểm, do khả năng lan truyền nhanh trongcộng đồng thông qua thức ăn và/hoặc nguồnnước sinh hoạt ô nhiễm bởi VKT. Sau khi* Học viện Quân y** Viện Vệ sinh Phòng dịch Quân độiChịu trách nhiệm nội dung khoa học: PGS. TS. Nguyễn Thái SơnPGS. TS. Lê Văn Đông1TẠP CHÍ Y – DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1 - 2013nhiễm VKT theo đường tiêu hoá, độc tố dovi khuẩn tiết ra sẽ bám và thâm nhập vào tếbào niêm mạc ruột, gây rối loạn quá trìnhvận chuyển tích cực các chất điện giải quamàng tế bào niêm mạc ruột, dẫn đến tăngtiết dịch vào lòng ống tiêu hoá và gây tiêuchảy mất nước. Điều trị bệnh tả chủ yếu làbù nước, điện giải cho bệnh nhân. Đã cónhiều báo cáo về việc sử dụng kháng sinhtrong điều trị nhiễm VKT giúp rút ngắn thờigian điều trị cũng như thời gian vi khuẩnđược bài tiết ra môi trường [3, 4]. Tuynhiên, cũng có báo cáo về một số chủngVKT kháng kháng sinh [5, 9]. Sử dụngkháng thể tạo miễn dịch thụ động là mộttrong những hướng nghiên cứu tìm kiếmcác biện pháp dự phòng và/hoặc điều trịnhiễm VKT được nhiều nhóm nghiên cứuquan tâm trong nhiều năm qua [7, 8]. Khángthể IgY (immunoglobulin từ lòng đỏ trứng yolk immunoglobulin) là một trong nhữngnguồn kháng thể có nhiều tiềm năng ứngdụng, do có nhiều ưu điểm so với kháng thểIgG của động vật có vú (quy trình gây miễndịch và thu thập kháng thể đơn giản, lượngkháng thể thu được cao...). Ở một số loàigia cầm, IgY trong lòng đỏ trứng có cấu trúcphân tử tương tự IgG ở động vật có vú; IgYcó nguồn gốc từ kháng thể trong máu giacầm mẹ, được vận chuyển tích cực sanglòng đỏ trứng, sau đó sang gia cầm nở từtrứng, tạo ra tình trạng miễn dịch thụ độngở gia cầm mới nở.Đề tài này được tiến hành nhằm: Xâydựng quy trình gây miễn dịch trên gà máivới kháng nguyên VKT, tạo cơ sở khoa họcđể thu thập kháng thể IgY kháng VKT từtrứng do gà mái được gây miễn dịch đẻ ra.ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNGPHÁP NGHIÊN CỨU1. Đối tượng, vật liệu nghiên cứu.- Chủng VKT do Khoa Vi sinh vật, Bệnhviện 103 cung cấp, được phân lập từ mẫubệnh phẩm của bệnh nhân mắc bệnh tả tạiViệt Nam.- Gà mái giống Tam Hoàng ở độ tuổi đẻtrứng, số lượng 15 con (với các cá thể cùnglứa), trọng lượng khoảng 1,5 - 2 kg, đượcnuôi trong điều kiện đầy đủ thức ăn vànước uống, chiếu sáng với ánh sáng tựnhiên 10 - 12 giờ/ngày.- Hoá chất, sinh phẩm chủ yếu: tá chấtFreund hoàn chỉnh và không hoàn chỉnh(Sigma, Hoa Kỳ); cộng hợp peroxidase kháng thể IgG cừu kháng IgY gà và các hoáchất cần thiết khác cho phản ứng ELISA(Bio-Rad, Hoa Kỳ; Sanofi, Pháp).- Môi trường nuôi cấy vi khuẩn: thạchkiềm, canh thang BHI.2. Phương pháp nghiên c ...