Nghiên cứu sự biến đổi hàm lượng protein, phổ điện di protein của dòng callus mía (saccharum officinarum l.) chịu hạn

Trong phạm vi bài báo này các tác giả trình bày những kết quả nghiên cứu thu được về sự biến đổi hàm lượng protein, phổ điện di protein và bước đầu tìm hiểu bản chất của việc xuất hiện băng protein mới ở callus mía xử lý stress hạn. Mời các bạn cùng tham khảo.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu sự biến đổi hàm lượng protein, phổ điện di protein của dòng callus mía (saccharum officinarum l.) chịu hạnTẠPCHÍKHOAHỌC,ĐạihọcHuế,Số29,2005 NGHIÊNCỨUSỰBIẾNĐỔIHÀMLƯỢNGPROTEIN, PHỔĐIỆNDIPROTEINCỦADÒNGCALLUSMÍA (SACCHARUMOFFICINARUML.)CHỊUHẠN NgôThịMinhThu,HoàngVănHạnh,TrươngThịBíchPhượng TrườngĐạihọcKhoahọc,ĐạihọcHuế I.ĐẶTVẤNĐỀ Míalàmộtloạicâycôngnghiệpngắnngày,cóvị tríkinhtế ngàycàngquantrọngởnướcta.ỞmộtsốvùngcủaViệtNam,câymíađãtrởthànhmộttrongnhững nguồnthunhậpchủyếucủangườidân. MiềnTrungViệtNamlàmộtvùngnôngnghiệpđadạng,cótiềmnănglớn trongsảnxuấtnôngnghiệp,nhưngsảnlượnglươngthựcthựcphẩm ở vùngnày chưacaodođiềukiệnkhíhậukhắcnghiệt,hạnhánkéodàivàomùakhô.Đặcbiệt đốivớimía,điềukiệnkhôhạn,thiếunước,đấtxấu...làmmíasinhtrưởngchậm, thânmíanhỏ,lóngngắn,năngsuấtrấtthấp. Vìvậyviệcchọntạocácgiốngcâytrồngcókhảnăngchốngchịutốtvớiđiềukiệnngoạicảnhbấtlợi,chonăngsuấtcao,phẩmchấttốtlàviệcvôcùngquan trọng,cấpthiếtvàcóýnghĩathựctiễntolớn. Trongphạmvibàibáonàychúngtôichỉ xinđượctrìnhbàynhữngkếtquảnghiêncứuthuđượcvềsựbiếnđổihàmlượngprotein,phổđiệndiproteinvàbướcđầutìmhiểubảnchấtcủaviệcxuấthiệnbăngproteinmớiởcallusmíaxửlýstress hạn. II.ĐỐITƯỢNGVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 1.Đốitượng ĐốitượngnghiêncứucủachúngtôilàhaimíagiốngROC10vàROC16củacâymíađường(SaccharumofficinarumL.)[2]. GiốngmíaROC10cónguồngốctừĐàiLoan.Giốngnàycókhả năngthâm canhcao,cótínhthích ứngrộng,khả năngnảymầmvàtáisinhkhỏe,cónăngsuấtbìnhquânđạt70tấn/havàhàmlượngđườngcao(1315%).Nếuđượcthâmcanhtốt cóthể đạtnăngsuất120125tấn/ha.Giốngmíanàyđãđượccôngnhậnlàgiốngquốcgiavàhiệntạiđâylàgiốngmíacódiệntíchlớnnhấttrongvùngmíanguyên liệucủatấtcảnhàmáyđườngcôngnghiệpởnướctahiệnnay[1]. 85 GiốngmíaROC16cónguồngốctừĐàiLoan.Đặcđiểmcủagiốngnàylànảy mầmvàđẻ nhánhmạnh,tậptrung,tốcđộ vươnlóngcao,độ đồngđềukhá,không trổcờ,chịuúngtốt,cónăngsuấttrungbìnhcao(60tấn/ha)vàhàmlượngđườngcao.Giốngmíanàyđãđượccôngnhậnlàgiốngquốcgiavàápdụngphổbiếnởnhiềuđịa phươngtrêncảnước[2]. 2.Phươngphápnghiêncứu: 2.1.Xửlýstressnướcchocallus Nuôicấycácmôlánoncủamíatrênmôitrườngtạocallusgồmcómôitrường cơ bảnMS(MurashigevàSkoog,1962)bổ sungsaccharose30g/l,2,4D3,0mg/l, kinetin0,1mg/l,agar8g/lvàpH5,8. Cáccalluschọnlọcđượctrênmôitrườngxử lý3,6%mannitolđượctiếptụcxửlýmannitolởcácnồngđộ9,12và15%mannitolởcáckhoảngthờigian7,14,21 và28ngàyxửlý.Cáccallussốngsótsẽđượcphântíchcácchỉtiêusinhlý,hóasinh chứngtỏchokhảnăngchịuhạncủacallus. 2.2.Xácđịnhhàmlượngproteinvàphổđiệndiprotein 2.2.1.Xácđịnhhàmlượngprotein Hàmlượngproteintổngsố đượcxácđịnhbằngcáchđođộ hấpthụ trênmáy quangphổởbướcsóng260nmvà280nm(mẫutrắnglàđệmPBSpH7,4).Nồngđộproteinhòatantổngsốtínhtheocôngthức[5]: PC(mg/ml)=1,5xA2800,75xA260TrongđóPC:nồngđộprotein;A280:độhấpthụquangởbướcsóng280nm;A260:độhấpthụquangởbướcsóng260nm. 2.2.2.Điệndiprotein ProteinsaukhixácđịnhhàmlượngsẽđượcđiệndiSDStrêngelpolyacrylamide 12%. III.KẾTQUẢVÀTHẢOLUẬN 1.Hàmlượngproteintổngsốcủacallusmíaxửlýstresshạn: Phảnứngthôngthườngcủathựcvậtkhichịutácđộngbấtlợicủangoạicảnh làbiếnđổihàmlượngvàthànhphầncủaprotein.Hàmlượngproteinvàthànhphần chấtlượngcủachúngđãảnhhưởngmạnhmẽlêntínhchịuhạncủacây,lượngacid nucleiccao,đặcbiệtlàRNAtạokhảnăngtổnghợpproteinvàđiềuđólàmtăngtínhchốngchịucủacâyđốivớihạn.Purinvàprimidinởhàmlượngcaocũngcótácdụngkíchthíchsựtổnghợpacidnucleicởtrongcâychịuhạn,chúngứcchếhoạttínhcủaenzymeRNaseđểtăngquátrìnhtổnghợpprotein[4]. 86 Ở cácdòngmíaxử lýstresshạn,hàmlượngproteinthayđổikhácnhauvà khôngtheoquyluật.Điềunàyliênquanđếntínhđadạngvàkhôngđịnhhướngcủacácbiếndịditruyềnxuấthiệntrongqúatrìnhnuôicấymô. Qua kết quả nghiên cứu, 60 chúng tôi nhận thấy callus Hµm lîng protein (mg/gTLT) 48.33 giốngROC10xửlýstresshạn hàm lượng protein tổng số 40 7 ngµy tăng dần khi tăng nồng độ 14 ngµymannitoltừ9đến12%vàhàm 19.51 21 ngµylượngproteingiảmkhixử lý 20 28 ngµycallustrênmôitrườngbổsung 15% mannitol trong khoảng thời g ...