Nghiên cứu ứng dụng sản xuất kháng nguyên Streptolysin O, sử dụng trong chẩn đoán thấp tim và viêm cầu thận cấp ở trẻ em

TCNCYH phô b.n 32 (6) - 2004Nghiªn cøu øng dông s.n xuÊt kh¸ng nguyªn streptolysin O, sö dông trong chÈn ®o¸n thÊp tim vµ viªm cÇu thËn cÊp ë trÎ em1NguyÔn ThÞ TuyÕn1, NguyÔn V¨n DÞp2 Bé m«n Vi sinh Y häc, tr−êng §¹i häc Y Hµ Néi 2 Vô Khoa häc vµ §µo t¹o, Bé Y tÕNghiªn cøu ®· ®−a ra ®−îc c¸c b−íc cô thÓ ho¸ vÒ mÆt kü thuËt vµ t×m ra c¸c ®iÒu kiÖn tèi −u trong quy tr×nh s.n xuÊt kh¸ng nguyªn streptolysin O theo khuyÕn c¸o cña Tæ chøc Y tÕ thÕ giíi. §ång...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu ứng dụng sản xuất kháng nguyên Streptolysin O, sử dụng trong chẩn đoán thấp tim và viêm cầu thận cấp ở trẻ emTCNCYH phô b¶n 32 (6) - 2004 Nghiªn cøu øng dông s¶n xuÊt kh¸ng nguyªn streptolysin O, sö dông trong chÈn ®o¸n thÊp tim vµ viªm cÇu thËn cÊp ë trÎ em NguyÔn ThÞ TuyÕn1, NguyÔn V¨n DÞp2 1 Bé m«n Vi sinh Y häc, tr−êng §¹i häc Y Hµ Néi 2 Vô Khoa häc vµ §µo t¹o, Bé Y tÕ Nghiªn cøu ®· ®−a ra ®−îc c¸c b−íc cô thÓ ho¸ vÒ mÆt kü thuËt vµ t×m ra c¸c ®iÒu kiÖn tèi −u trong quytr×nh s¶n xuÊt kh¸ng nguyªn streptolysin O theo khuyÕn c¸o cña Tæ chøc Y tÕ thÕ giíi. §ång thêi ¸p dông s¶nxuÊt thµnh c«ng kh¸ng nguyªn streptolysin O d−íi d¹ng láng víi hiÖu gi¸ æn ®Þnh lµ 1: 16. Ngoµi ra nghiªn cøucòng ®· ®−a ra ®−îc ®iÒu kiÖn gi÷ chñng liªn cÇu nhãm A kinh tÕ nhÊt lµ m«i tr−êng BHI huyÕt thanh ngùa50% vµ nhiÖt ®é b¶o qu¶n lµ - 70°C. I. §Æt vÊn ®Ò 2. VËt liÖu HiÖn nay ë ViÖt Nam còng nh− trªn thÕ giíi, • M«i tr−êng nu«i cÊy vi khuÈn:ph¶n øng ASLO ®−îc sö dông trong chÈn ®o¸n ë - M«i tr−êng th¹ch m¸u, BHI (Brain HearthÇu hÕt c¸c phßng xÐt nghiÖm ë c¸c bÖnh viÖn infusion) cña h·ng Sanofi diagnostics Pasteur.tuyÕn trung −¬ng vµ mét sè bÖnh viÖn tuyÕn tØnh. - M«i tr−êng Kalbak broth tù s¶n xuÊt theoNgoµi ra cßn sö dông trong ch−¬ng tr×nh phßng c«ng thøc vµ quy tr×nh cña TCYTTG 1983, 1996.chèng bÖnh thÊp tim. V× vËy, nhu cÇu sö dôngkh¸ng nguyªn streptolysin O lµ rÊt lín. Song cho • C¸c sinh phÈm vµ ho¸ chÊt chÝnhtíi nay ë ViÖt Nam vÉn ch−a cã c¬ quan nµo - Kh¸ng thÓ kh¸ng streptolysin O cña Mü.nghiªn cøu thµnh c«ng s¶n xuÊt kh¸ng nguyªn - Ho¸ chÊt pha ®Öm PBS.streptolysin O. Do ®ã c¸c phßng xÐt nghiÖm vÉn - Methiolate, hång cÇu thá, huyÕt thanh ngùaph¶i mua kh¸ng nguyªn cña n−íc ngoµi víi gi¸ • Chñng chuÈn quèc tÕ ®Ó s¶n xuÊt kh¸ngthµnh cao. XuÊt ph¸t tõ t×nh h×nh thùc tÕ trªn, nguyªn streptolysin O C203S do Trung t©m KiÓmnghiªn cøu cña chóng t«i tiÕn hµnh nh»m môc tiªu ®Þnh liªn cÇu Quèc gia Th¸i Lan cung cÊp.sau: 3. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu: + Nghiªn cøu c¸c ®iÒu kiÖn gi÷ chñng chuÈnliªn cÇu nhãm A: C203S. 3.1. Ph−¬ng ph¸p gi÷ chñng mÉu liªn cÇu nhãm A C203S: + Nghiªn cøu cô thÓ ho¸ vÒ mÆt kü thuËt cñatõng b−íc trong quy tr×nh s¶n xuÊt kh¸ng nguyªn - Ph−¬ng ph¸p chóng t«i thö nghiÖm trªn m«istreptolysin O theo khuyÕn c¸o cña Tæ chøc Y tÕ tr−êng BHI huyÕt thanh ngùa so s¸nh víi c¸cThÕ giíi (TCYTTG) n¨m 1983 vµ 1996. ph−¬ng ph¸p hiÖn ®ang l−u gi÷ nh−: II. §èi t−îng, VËt liÖu vµ ph−¬ng + Gi÷ trªn m«i tr−êng th¹ch m¸u, gi÷ trªn m«i tr−êng BHI glycerol 20%, gi÷ d−íi d¹ng ®«ng kh«.ph¸p nghiªn cøu: 3.2. Ph−¬ng ph¸p t¸ch chiÕt kh¸ng nguyªn 1. §èi t−îng nghiªn cøu: streptolysin O: - Quy tr×nh gi÷ chñng liªn cÇu nhãm A. - Quy tr×nh s¶n xuÊt kh¸ng nguyªn streptolysin O94TCNCYH phô b¶n 32 (6) - 2004 Theo th−êng quy cña TCYTTG 1983, 1996, Theo th−êng quy cña TCYTTG 1996.nh−ng ®· ®−îc ®Ò tµi nghiªn cøu cô thÓ ho¸ tõng iii. KÕt qu¶b−íc trong quy tr×nh vµ ¸p dông s¶n xuÊt. 1. KÕt qu¶ nghiªn cøu c¸c ®iÒu kiÖn gi÷ 3.3. Ph−¬ng ph¸p chuÈn ®é kh¸ng nguyªn chñng liªn cÇu nhãm A C203S.streptolysin O: B¶ng 1. KÕt qu¶ nghiªn cøu gi÷ chñng liªn cÇu nhãm A C203S ë c¸c m«i tr−êng vµ c¸c ®iÒu kiÖn b¶o qu¶n kh¸c nhau M«i tr−êng b¶o qu¶n NhiÖt ®é b¶o qu¶n Thêi gian vi khuÈn sèng Th¹ch m¸u 4°C 48 giê BHI vµ glycerol - 20°C 1 - 2 tuÇn BHI vµ glycerol - 70°C 2 tuÇn - ...