Nghiên cứu xây dựng mô hình và đặc điểm hình thái ung thư gan người trên chuột thiếu hụt miễn dịch

Bài viết xây dựng mô hình tạo khối ung thư gan người trên chuột thiếu hụt miễn dịch; nghiên cứu đặc điểm hình thái mô u trên chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối ung thư gan người.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu xây dựng mô hình và đặc điểm hình thái ung thư gan người trên chuột thiếu hụt miễn dịchHOẠT ĐỘNG KH-CN NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG MÔ HÌNH VÀ ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI UNG THƯ GAN NGƯỜI TRÊN CHUỘT THIẾU HỤT MIỄN DỊCH n ThS. Bs. Nguyễn Tuấn Anh ThS. Nguyễn Hoàng Phi, ThS. Đặng Xuân Định Trường Đại học Y khoa Vinh I. ĐẶT VẤN ĐỀ Dụng cụ và hóa chất để tiến hành ghép Ung thư là bệnh nguy hiểm có tỷ lệ tử vong cao. tạo u trên chuột.Theo thông báo của Cơ quan Quốc tế Nghiên cứu ung 2. Phương pháp nghiên cứuthư (IARC) thuộc Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), năm 2.1. Kỹ thuật nuôi cấy tế bào ung thư2008, trên thế giới có khoảng 12,7 triệu ca mắc mới gan người Hep-3Bvới 7,6 triệu người chết do ung thư. Dự báo vào năm Các tế bào ung thư gan dòng Hep-3B2030, mỗi năm sẽ có 21,4 triệu người mới mắc bệnh được nuôi cấy trên đĩa nuôi cấy tế bào đườngung thư và 13,3 triệu người chết vì bệnh này. kính 10cm bằng môi trường nuôi cấy tương Một trong những thành tựu về nghiên cứu ung thư ứng là EMEM có bổ sung 10% FBS và 1%từ cuối thế kỷ 20 là các nhà khoa học đã tạo ra được kháng sinh Penicillin và Streptomycine. Mậtnhững con chuột mang ung thư người. Tế bào ung thư độ tế bào trong môi trường được xác dịnhngười được dung nạp và chuột sẽ mang khối ung thư bằng cách sử dụng buồng đếm Neubauer.người. Trên mô hình chuột mang ung thư người này, 2.2. Tạo khối ung thư gan người trênngười ta đánh giá sự hình thành, phát triển khối u và chuột thiếu hụt miễn dịcháp dụng để phát hiện, điều trị cho bệnh nhân ung thư. Chuột thiếu hụt miễn dịch (nude mice, Đứng trước thách thức về mức độ ác tính, kháng Foxn1nu) được nuôi trong điều kiện phòngđiều trị của ung thư gan, cần phải có những phương sạch, không khí được lọc và có áp lực dươngpháp và dược chất mới để điều trị. tính (25 ± 0,50C, độ ẩm 52 ± 5%), ánh sáng Chính vì vậy, đề tài “Nghiên cứu xây dựng mô hình được tự động điều khiển bật lúc 7h00, tắt lúcvà đặc điểm hình thái ung thư gan người được ghép 19h00. Thức ăn và nước uống được tiệttrên chuột thiếu hụt miễn dịch” được tiến hành với trùng trước khi sử dụng. Chuột được chiamục tiêu: xây dựng mô hình tạo khối ung thư gan thành nhóm 5 con mỗi lồng.người trên chuột thiếu hụt miễn dịch; nghiên cứu đặcđiểm hình thái mô u trên chuột thiếu hụt miễn dịchmang khối ung thư gan người. II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU 1. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu 1.1. Đối tượng nghiên cứu - 10 chuột nhắt BALB/c thiếu hụt miễn dịch(nude mice). - Dòng tế bào ung thư gan tế bào Hep-3B được muatừ Công ty ATCC (Hoa Kỳ). 1.2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu Labo nuôi cấy tế bào đầy đủ trang thiết bị. Chuột nude trong lồng trên giá cách lySỐ 7/2018 Tạp chí [14] KH-CN Nghệ An HOẠT ĐỘNG KH-CN Ghép tế bào ung thư vào dưới da đùi chuột Khối ung thư gan trên đùi chuột sau ghép 11 ngày Chuột thiếu hụt miễn dịch được nuôi ổn Trọng lượng chuột: Cân hàng tuần bằng cân điệnđịnh ít nhất 3 ngày trước lúc tiến hành thí tử có độ chính xác 10-3.nghiệm. Cố định và tiêm 0,1ml vào dưới da 2.3. Phân tích mô bệnh học khối u hình thànhđùi phải (106 tế bào/chuột). Quá trình thao trên chuộttác được thực hiện trong điều kiện vô trùng Sau kết thúc thí nghiệm, tiến hành lấy mẫu môtuyệt đối. Chuột được ăn uống theo chế độ bệnh phẩm khối u trên chuột và bảo quản khối uăn bình thường; theo dõi tại chỗ tiêm và toàn trong dung dịch Formalin 10% trong vòng 24-48thân chuột hàng ngày; đo u và cân trọng giờ, nhuộm Hematoxylin- Eosin (HE) và xác địnhlượng 2 lần/ tuần x 4 tuần. Khối u được đánh hình thái siêu vi thể khối u trên kính hiển vi điện tửgiá theo sự phát triển tại vị trí tiêm (đùi phải) truyền qua.2 lần mỗi tuần, kích thước u được tính theo III. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨUcông thức: 1. Kết quả nuôi cấy tế bào Hep- 3B V=D x R2 x 0,5. Sau 24 giờ, tế bào đã bám đều trên bề mặt đáy chai V: thể tích khối u ...