Nhân dòng và phân tích trình tự promoter của gene Igf2 từ nhau thai chuột

Gene Igf2 (Insulin-like growth factor 2) là gene in dấu, chỉ biểu hiện trên allele có nguồn gốc từ cá thể đực (bố). Nó giữ nhiều chức năng quan trọng, cơ chế kiểm soát biểu hiện của gene Igf2 khá phức tạp và được điều khiển trực tiếp bởi các promoter.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nhân dòng và phân tích trình tự promoter của gene Igf2 từ nhau thai chuộtTAÏP CHÍ KHOA HOÏC ÑAÏI HOÏC SAØI GOØN Soá 31 (56) - Thaùng 8/2017 Nhân dòng và phân tích trình tự promoter của gene Igf2 từ nhau thai chuộtCloning and analysing the sequence of Igf2 gene’s promoter from the mouse’s placenta Đỗ Mỹ Hiếu, Trường Đại học Sư phạm Huế Do My Hieu, Hue University of Education TS. Phạm Quang Chinh, Trường Đại học Sư phạm Huế Nguyen Thi Thu Hang, Ph.D., Hue University of Education TS. Trần Văn Giang, Trường Đại học Sư phạm Huế Tran Van Giang, Ph.D., Hue University of EducationTóm tắtGene Igf2 (Insulin-like growth factor 2) là gene in dấu, chỉ biểu hiện trên allele có nguồn gốc từ cá thểđực (bố). Nó giữ nhiều chức năng quan trọng, cơ chế kiểm soát biểu hiện của gene Igf2 khá phức tạp vàđược điều khiển trực tiếp bởi các promoter. Hai promoter P2 và P3 của gene Igf2 đã được tách chiết,khuếch đại, tinh sạch và nhân dòng từ mô nhau thai chuột 17 ngày. Trình tự promoter P2 và P3 của geneIgf2 có chiều dài lần lượt là 420 và 212 nucleotid. Trình tự của các promoter này có độ tương đồng rấtcao với trình tự (U71085.1) và (AH001929.2) trên GenBank.Từ khóa: gene in dấu, Igf2, nhau thai, nhân dòng, promoter.AbstractGene Igf2 (Insulin-like growth factor 2) is an imprinted gene which is expressed from only one of theparental chromosomes. This gene plays a lot of important functions; the mechanism for controlling itsexpression is quite complex and is carried out by the promoters. The P2 and P3 promoters of Igf2 havebeen successfully split, amplified, purified and cloned from placental tissues of 17-day-old male mice.The P2 and P3 promoters of the Igf2 gene are 420 and 212 nucleotides in length, which are very muchsimilar with GenBank sequences (U71085.1 and AH001929.2 respectively).Keywords: imprinted gene, Igf2, placenta, cloning, promoter. 1. Đặt vấn đề đều có sự biểu hiện như nhau. Thế nhưng, Động vật có vú là những loài có bộ một số gene chỉ biểu hiện bản sao có nguồnnhiễm sắc thể lưỡng bội, đời con thừa gốc từ bố hoặc mẹ. Hiện tượng đó được gọihưởng bộ nhiễm sắc thể của cả bố và là in dấu hệ gene (Genomic imprinting). Cómẹ. Như vậy, chúng có hai bản sao của mỗi hơn 100 gene in dấu, trong đó điển hình làgene. Theo quy luật Mendel, thông thường gene Igf2 (Insulin - like growth factor 2)cả hai bản sao từ bố hoặc mẹ của mỗi gene nằm trên nhiễm sắc thể số 7 của chuột và số 11NHÂN DÒNG VÀ PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ PROMOTER CỦA GENE IGF2 TỪ NHAU THAI CHU T11 của người [4 5]. Ở người, gene in dấu exon 6. Trong đó, exon 4 là exon đầu tiên(Imprinting gene) này chỉ biểu hiện trên và mang bộ ba mã hóa amino acid mở đầu.allele có nguồn gốc từ bố, còn bản sao này Hai promoter P2 và P3 biểu hiện phổ biếntừ cơ thể mẹ truyền cho con thì không được trong tất cả các mô và nằm gần exon 4, nênbiểu hiện [3]. Gene này mã hóa một protein nó liên quan rất lớn đến cơ chế biểu hiệnhoạt động như một yếu tố điều hòa sinh của gene Igf2. Khi nghiên cứu mức độ biểutrưởng, đặc biệt hoạt động mạnh trong giai hiện promoter P2 và P3 trên chuột thì thấyđoạn phôi thai ở động vật có vú cũng như ở rằng hai promoter này biểu hiện cao hầu hếtngười. Gene Igf2 kiểm soát sự tăng sinh, các mô cơ quan được nghiên cứu (gan,sinh trưởng và biệt hóa của tế bào và đặc thận, tim). Còn các promoter khác như P0biệt là liên quan đến sự điều hòa phát triển và P1 thì biểu hiện khá thấp [3]. Vì vậy, xácphôi và sự phát triển của nhau thai. Với định được trình tự của các promoter nàychức năng đó, gene Igf2 biểu hiện sớm trong nhau thai để từ đó nghiên cứu chínhtrong quá trình phát triển phôi ở tất cả các xác mức độ biểu hiện của gene Igf2 trongloại mô nội bì, ngoại bì và trung bì, ở cơ thể nhau thai chuột thực sự là cần thiết.trưởng thành, gene này biểu hiện thấp [1]. 2. Nguyên liệu và phương pháp Gene Igf2 trên chuột được điều khiển 2.1. Nguyên liệu và hóa chấtbởi 4 promoter khác nhau và các promoter 2.1.1. Nguyên liệunày có trình tự bảo thủ cao giữa gene Igf2 Các mẫu nhau thai chuột đực 17 ngàytrên chuột và người và chúng chỉ biểu hiện tuổi được thu nhận tại phòng thí nghiệmtrên allele có nguồn gốc từ cá thể đực (bố) Giải phẫu - Sinh lý thuộc khoa Sinh,truyền cho đời con [2]. Mức độ biểu hiện ...