Nhân nhanh giống hoa Dã yến thảo rũ hồng đậm (Petunia hybrida Hort. ex Vilm.-Andr.) bằng kỹ thuật nuôi cấy mô

Hoa Dã yến thảo rũ hồng đậm (Petunia hybrida Hort. ex Vilm.-Andr.) là loài hoa đẹp, có giá trị kinh tế cao. Việc nhân giống in vitro là phương pháp hữu hiệu để tăng cường số lượng, giúp bảo tổn nguồn gen. Đỉnh sinh trưởng 01 tháng tuổi là mẫu cấy tối ưu được sử dụng là vật liệu khởi đầu cho nuôi cấy in vitro. Đỉnh sinh trưởng được khử trùng bằng dung dịch Javen 7,5% trong 10 phút cho tỷ lệ sống và mẫu sạch cao nhất đạt 53,23%.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nhân nhanh giống hoa Dã yến thảo rũ hồng đậm (Petunia hybrida Hort. ex Vilm.-Andr.) bằng kỹ thuật nuôi cấy môBÁO CÁO KHOA HỌC VỀ NGHIÊN CỨU VÀ GIẢNG DẠY SINH HỌC Ở VIỆT NAM - HỘI NGHỊ KHOA HỌC QUỐC GIA LẦN THỨ 4DOI: 10.15625/vap.2020.000104 NHÂN NHANH GIỐNG HOA DÃ YẾN THẢO RŨ HỒNG ĐẬM (Petunia hybrida Hort. ex Vilm.-Andr.) BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY MÔ * Phạm Phương Thu , Phan Thị Thu Hiền* Tóm tắt: Hoa Dã yến thảo rũ hồng đậm (Petunia hybrida Hort. ex Vilm.-Andr.) là loài hoa đẹp, có giá trị kinh tế cao. Việc nhân giống in vitro là phương pháp hữu hiệu để tăng cường số lượng, giúp bảo tổn nguồn gen. Đỉnh sinh trưởng 01 tháng tuổi là mẫu cấy tối ưu được sử dụng là vật liệu khởi đầu cho nuôi cấy in vitro. Đỉnh sinh trưởng được khử trùng bằng dung dịch Javen 7,5% trong 10 phút cho tỷ lệ sống và mẫu sạch cao nhất đạt 53,23%. Chồi được nhân nhanh trên môi trường MS có bổ sung 0,1 mg/L BAP cho tỷ lệ nhân chồi cao nhất đạt 67,5 chồi/mẫu. Chồi được chuyển sang môi trường ra rễ và môi trường thích hợp để tạo rễ là MS có bổ sung 0,1 mg/L NAA. Cây được chuyển sang huấn luyện trong nhà lưới trong 04 tuần và trồng trong giá thể gồm đất thịt, cát, tro trấu và phân xanh đạt tỉ lệ sống sót là 45%. Quy trình này hiệu quả với việc nhân nhanh một lượng cây con lớn nhằm bảo tồn nguồn giống in vitro ở giống hoa Dã yến thảo rũ hồng đậm (Petunia hybrid L.). Từ khóa: Petunia hybrid L., Dã yến thảo, ex vitro, in vitro, nhân nhanh.1. MỞ ĐẦU Hoa Dã yến thảo (Petunia hybrid L.) là loài thực vật thuộc họ Cà. Cây Dã yếnthảo có hạt nhỏ và cho kết quả nhân giống bằng phương pháp hữu tính không cao.Đối với nhân giống bằng cành thì hệ số nhân thấp, không đồng đều nên chưa đáp ứngnhu cầu khi cần trồng cây số lượng lớn, đồng loạt (Phạm Hoàng Hộ, 2000). Trongkhi đó, nuôi cấy mô là kỹ thuật hiệu quả để nhân nhanh về số lượng và chất lượngcây giống, cây giống sạch bệnh và giảm được giá thành sản phẩm. Hiện nay, một số giống hoa thương phẩm đã được phát triển và nhân nhanh invitro phục vụ thị trường với thị hiếu ngày càng đa dạng (Phan Thị Thu Hiền và nnk.,2017). Đã có rất nhiều loài hoa đẹp, giá trị thương phẩm tốt được nhân nhanh in vitronhư hoa lan, hoa hồng, hoa đồng tiền (Trần Thị Hồng Thúy và nnk., 2015; NguyễnThị Phương Thảo và nnk., 2015; Dương Tấn Nhựt, 2013). Cây hoa Dã yến thảo đã được tiến hành nuôi cấy in vitro và chọn tạo một sốdòng biến dị soma qua nuôi cấy in vitro có ý nghĩa trong chọn giống (Hassan et al., 2010).Trong điều kiện stress có bổ sung NaCl, Sara & Naglaa (2015) đã nghiên cứu khả năng nhânnhanh của cây hoa Dã yến thảo. Tiếp đó, Natalija và cộng sự đã nghiên cứu sự tái sinh đachồi từ lá của cây dạ yến thảo, đã tìm ra được một số điều kiện tối ưu để thực hiện quá trìnhTrường Đại học Sư phạm Hà Nội 2*Email: hienphandt87@gmail.comPHẦN II. NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SINH HỌC PHỤC VỤ ĐỜI SỐNG VÀ PHÁT TRIỂN XÃ HỘI 839tái sinh chồi từ lá của giống hoa này (Natalija et al., 2015). Gần đây nhất, Bùi Thị Cúc vàcộng sự đã nghiên cứu và tìm ra công thức tối ưu nhân nhanh cây Dã yến thảo hoa hồng sọctím từ đoạn thân mang mắt ngủ, nghiên cứu đã xác định được môi trường thích hợp nhất choviệc tái sinh chồi từ đoạn thân mang mắt ngủ của Dã yến thảo là môi trường MS có bổ sung0,25 mg/L TDZ. Trên môi trường tối ưu có bổ sung 0,75 mg/L BAP, 0,1 mg/L αNAA, hệ sốnhân chồi đạt cao nhất là 73,11 lần (Bùi Thị Cúc và nnk. 2017). Nghiên cứu này của chúngtôi sử dụng đoạn thân ex vitro là vật liệu khởi đầu để nuôi cấy cây Dã yến thảo in vitro vàtìm ra điều kiện nhân nhanh tối ưu giống Dã yến thảo rũ hồng đậm.2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU2.1. Vật liệu nuôi cấy Vật liệu nuôi cấy ban đầu là đoạn thân của cây Dã yến thảo rũ hồng đậm thungoài tự nhiên.2.2. Phương pháp nghiên cứuPhương pháp khử trùng mẫu Đoạn thân được rửa sạch bằng vòi nước, sau đó rửa mẫu với xà phòng, rửa lạidưới vòi nước 3 lần. Mẫu được đưa vào tủ cấy vô trùng, rửa bằng nước cất vô trùng 3lần, khử trùng kép bằng dung dịch Javen và cồn 70 o, thấm khô mẫu và cấy mẫu trênmôi trường MS (Murashige & Skoog, 1962).Mẫu được khử trùng bởi CT1: Javen10%, CT2: Javen 10% + cồn 70%, CT3: Javen 10% + cồn 70% + HgCl 2 0,1%, tất cảđều được khử trùng kép trong 10 phút.Phương pháp nhân nhanh cây Dã yên thảo bằng tạo cụm chồi in vitro Chúng tôi đã bổ sung BAP với nồng độ từ 0-0,5 mg/L và kinetin nồng độ0,1 mg/L, 0,3 mg/L, 0,5 mg/L. Ngoài ra, chúng tôi còn kết hợp các chất điều hòa sinhtrưởng ở các nồng độ khác nhau: BAP với nồng độ 0,1mg/L kết hợp với kinetin vớicác nồng độ 0,1 mg/L, 0,3 mg/L, 0,5 mg/L và BAP với nồng độ 0,1 mg/L kết hợp vớiNAA với các nồng độ 0,1 mg/L, 0,3 mg/L, 0,5 mg/L vào môi trường MS để tiến hànhnghiên cứu và nghiên cứu các mẫu theo từng tuần. Chúng tôi sử dụng công thức nhân ...