Phân lập và tinh chế zeaxanthin từ kỷ tử dùng làm chất chuẩn trong sắc ký lỏng hiệu năng cao

A simple method has been developed to isolate and purify zeaxanthin dipalmitate and alltrans zeaxanthin from wolfberry with satisfied purity for use as authentic standard in carotenoid HPLC quantification.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phân lập và tinh chế zeaxanthin từ kỷ tử dùng làm chất chuẩn trong sắc ký lỏng hiệu năng caoT¹p chÝ Hãa häc, T. 45 (6A), Tr. 231 - 236, 2007 PH¢N LËP Vµ TINH CHÕ ZEAXANTHIN Tõ Kû Tö DïNG LµM CHÊT CHUÈN TRONG S¾C Ký LáNG HIÖU N¡NG CAO §Õn Tßa so¹n 15-11-2007 TrÇn ThÞ Thu Thuû , Ho ng ThÞ HuÖ An2, NguyÔn QuyÕt ChiÕn1 1 1 ViÖn Hãa häc, ViÖn Khoa häc v& C«ng nghÖ ViÖt Nam 2 Bé m«n Hãa häc, §¹i häc Nha Trang SUMMARY A simple method has been developed to isolate and purify zeaxanthin dipalmitate and all- trans zeaxanthin from wolfberry with satisfied purity for use as authentic standard in carotenoid HPLC quantification. Keywords: Zeaxanthin, zeaxanthin dipalmitate, wolfberry, carotenoid quantification, HPLC. I - §ÆT VÊN §Ò Trung Quèc v nhãm nghiªn cøu cña Khachik [3] ®+ chØ ra ®©y l mét nguån nguyªn liÖu cã Zeaxanthin ® îc ph©n lËp lÇn ®Çu tiªn v o h m l îng zeaxanthin ®Æc biÖt cao.n¨m 1929 tõ h¹t ng« [1] nh ng m+i ®Õn thËp kû ë n íc ta, kû tö (qu¶ cña c©y Lycium90 cña thÕ kû tr íc ng êi ta míi ®i s©u v o chinense Mill.) tõ l©u ®+ ® îc sö dông nh lnghiªn cøu nh÷ng t¸c dông cña hîp chÊt n y ®èi mét vÞ thuèc ®«ng y th«ng dông v kh«ng ®¾tvíi søc khoÎ cña con ng êi. Cïng víi lutein, tiÒn. V× thÕ, chóng t«i ®+ lùa chän nguånzeaxanthin l mét trong hai carotenoit cã mÆt nguyªn liÖu n y ®Ó ph©n lËp v tinh chÕtrong vâng m¹c cña m¾t. V o th¸ng 9 n¨m zeaxanthin.2007, nhãm nghiªn cøu cña San Giovanni thuécViÖn Nghiªn cøu quèc gia vÒ m¾t, Maryland -Mü, ®+ chøng minh r»ng lutein v zeaxanthin cã II - THùC NGHIÖMt¸c dông b¶o vÖ chèng l¹i bÖnh mï ë ng êi líntuæi g©y nªn bëi sù tho¸i hãa ®iÓm v ng ë vâng Dung m«i chiÕt v xö lý mÉu ®Òu thuéc lo¹im¹c [2]. V× vËy, viÖc ®Þnh l îng zeaxanthin tinh khiÕt ph©n tÝch, hoÆc ® îc ch ng cÊt l¹icòng nh mét sè carotenoit kh¸c trong c¸c tr íc khi sö dông. Dung m«i dïng cho s¾c kýnguyªn liÖu, thùc phÈm, d îc phÈm cã mét tÇm láng cao ¸p thuéc lo¹i tinh khiÕt HPLC (Merck).quan träng lín trong nç lùc n©ng cao tuæi thä v C¸c hãa chÊt kh¸c ®Òu thuéc lo¹i tinh khiÕt ph©nc¶i thiÖn søc khoÎ cña con ng êi tÝch. Trong tù nhiªn, zeaxanthin cã mÆt trong mét Phæ UV-VIS ® îc ghi trªn quang phæ kÕsè lo¹i thùc phÈm dïng h ng ng y nh rau x GBC Instrument-2855; phæ APCI-MS ® îc ghil¸ch, b«ng c¶i xanh, ng«, c¶i Bruxel, ®Ëu, c¶i ë chÕ ®é ®o ®iÖn tÝch d ¬ng (positive mode) trªnb¾p l¸ xanh, ít, c chua, mét sè lo¹i bÇu bÝ, lßng m¸y LC-MS Agilent 1100 series HPLC-DAD®á trøng, mét sè lo i gi¸p x¸c v c¸…N¨m (Agilent Technologies, Wilmington, USA); c¸c1995, lÇn ®Çu tiªn zeaxanthin ® îc ph©n lËp tõ phæ NMR ® îc ghi trªn m¸y Bruker Avancekû tö (qu¶ chÝn ph¬i hay sÊy kh« cña c©y 500 MHz (§øc) víi dung m«i l CDCl3 v chÊt chuÈn néi l TMS.Lycium barbarum L. v Lycium chinense Mill.) 231 S¾c ký b¶n máng (TLC) ® îc tiÕn h nh trªn 16, H-16’); 1,11 (6H, s, H-17, H-17’); 1,26 -b¶n Kieselgel 60 F254 ®Õ nh«m (Merck KGaA, 1,30 (24H, m, 14 CH2, H-23, H-23’); 1,56 (2H,Darmstadt, §øc). S¾c ký láng hiÖu n¨ng cao dd, J = 11; 12 Hz, Hax-2, Hax-2’); 1,60-1,65 (4H,(HPLC) ® îc ch¹y trªn m¸y LC-MS Agilent m, H-22, H-22’); 1,72 (6H, s, H-18, H-18’);1100 series HPLC-DAD, cét Zorbax SB-18 (150 1,78 (2H, ddd, J = 12; 1,5 Hz, Heq-2, Heq-2’);x 3 mm, 5 µm). 1,968 & 1,975 (12H, 2s, H-19, H-19’, H-20, H- 20’); 2,11 (2H, dd, J = 17; 9 Hz, Hax-4, Hax-4’);Nguyªn liÖu 2,29 (4H, t, J = 7,5 Hz, H-21, H-21’); 2.44 (2H, Kû tö (Fructus Lycii) kh« cã nguån gèc tõ dd, J = 17; 5,5 Hz, Heq-4, Heq-4’); 5,06 (2H, m,Trung Quèc ® îc mua t¹i c¸c hiÖu thuèc §«ng H-3, H-3’); 6,11 (4H, overlap, H-7, H-7’, H-8,y ë H néi. H-8’); 6,16 (2H, d, J = 11,5 Hz, H-10, H-10’);Xö lý nguyªn liÖu v ph©n lËp zeaxanthin 6,26 (2H, like d, J = 10 Hz, H-14, H-14’); 6,36este (2H, d, J = 15 Hz, H-12, H-12’); 6,62 - 6,67 (4H, m, H-11, H-11’, H-15, H-15’). 500 g kû tö kh« ® îc ng©m trong n íc cÊt 13qua 1 ®ªm, sau ®ã phÇn vá thÞt v h¹t ® îc t¸ch C-NMR (CDCl3, 125 MHz): (ppm)riªng. PhÇn vá thÞt qu¶ kû tö ® îc xay nhá, 12,75 & 12,82 (CH3, C-19, C-19’, C-20, C-20’);ng©m v chiÕt b»ng diclometan cho ®Õn ...